Produção de Spawn (Semente) de Cogumelos

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Produção de Spawn (Semente) de Cogumelos

  1. 1. Módulo I: Produção de Inóculo 1. Breves Noções de Micologia: O que é um cogumelo? 2. Preparação do Laboratório e Protocolos 3. Preparação dos Meios de Cultura 4. Clonagem e Selecção de Estirpes 5. Preparação do Inóculo: Grão e Cavilhas 6. Produção do Inóculo: G2G 7. Parâmetros de Incubação 8. Contaminações www.cogusbox.com
  2. 2. 1. O que é um Cogumelo??
  3. 3. As 3 Fases do Cultivo de Cogumelos
  4. 4. Laboratório www.cogusbox.com
  5. 5. 2. Protocolos  Limpeza/Assepsia  Fluxo de trabalho: limpo > menos limpo, e.g.  Tempo: ciclo de autoclave > inoculação, e.g.  Inventário/Perdas  Identificação e Registo de Pontos Críticos/Reais e Potenciais Vectores de Contaminação  Resolução de Problemas  Máquinas/Equipamento/Materiais  Pesagem/Rotulagem/Registos  Limpeza/Assepsia www.cogusbox.com
  6. 6. 3. 1 Prep. Meios de Cultura Composição: Agar + Meio nutritivo: malte, batata, dextrose, etc Preparação:  10g de Agar  9g de Extrato de Malte  500ml Água destilada Modus Operandi:  Capacidade do Recipiente: 1/3  Tampa ligeiramente fechada  Alumínio  Em suspensão 15min  Autoclavar 15 mins a 115ºC www.cogusbox.com
  7. 7. 3.2 Meios de Cultura: Agar>Placas  Arrefecer no AC/CFL  Não deixar solidificar  Muito quente=condensação  Deixar placas solidificar www.cogusbox.com
  8. 8. 4.1 Clonagem  Seleção do espécime  Abrir longitudinalmente  Retirar um pedaço do interior  Colocar no meio de cultura  Rotular  Selar com parafilme  Incubar a 15-20ºC www.cogusbox.com
  9. 9. 4.2 Isolamento de Estirpes  Seleção do espécime  Abrir longitudinalmente  Retirar pedaço do interior  Colocar no meio de cultura  Rotular  Selar com parafilme  Incubar a 15-20ºC  Repicar até rizomorfos  Testar  Registar www.cogusbox.com
  10. 10. 5. Prep. Grão • Limpar o grão de impurezas(água límpida) • Demolhar o grão 6 a 16h • Cozer durante 10 minutos (al dente) • Escorrer/Secar Superfície • Tampa ligeiramente fechada/Alumínio • Esterilizar • Arrefecer • Inocular com cultura pura ou grão colonizado • Tempo de colonização: 15 a 30 dias (aprox.)
  11. 11. 6. Produção de Inóculo • Técnica: G2G (Grain to Grain) • Rácio aumento peso/vol: 1-20/geração • Taxa de inoc 2-5% peso/vol • Máx. de expansão recomendado: G3 (geração 3): G0 (mother) – G1 – G2 – G3 • Geração óptima para substrato: G2
  12. 12. 7. Parâmetros de Incubação Temp: 15-20ºC HR da Câmara: 30/40% Luz: Ausência www.cogusbox.com
  13. 13. 8. Contaminações • Trichoderma, Aspergillus, etc • Identificar vectores • Manter Registos-Rastreabilidade • Rever formulações, tempos, protocolos,etc • Remover das Instalações • Limpeza www.cogusbox.com
  14. 14. Agora, mãos no grão  www.cogusbox.com

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