17/10/2013

Caractetizacão da Estrutura e Função
Celular

“Pequenos”

Limite: 0,15 µm

Pq tão pequenos?
É vantajoso ser
pequeno?

Importância de ser pequeno
Taxa metabólica varia com o tamanho. Em células muito
grandes, os processos de captação podem limitar o
metabolismo, tornando o organismo pouco competitivo em
relação aos menores.
Pequenas – maior área superficial em relação ao volume celular.

Implicações
• Células menores crescem mais rapidamente
• Maior quantidade de células por unidade de nutrientes
• Explica parcialmente as taxas de mutação e evolução mais
rápidas em microrganismos
• Maior facilidade de adaptação ambiental – ubíquos –
ambientes extremos

Papel dos micro-organismos
• Maior biomassa da Terra
• Realizam processos fundamentais para outras formas de vida
• Cianobactérias – oxigenação (surgimento de vida na Terra)
• Ciclagem de Nutrientes (manutenção de vida na Terra)
• Benéficos ou nocivos

• População: 5.000.000.000.000.000.000.000.000.000.000
• Maioria não está na superfície da crosta
• C-biomassa = plantas
• N e P = 10x plantas

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Micro-organismos são unicelulares

THE ENDOSYMBIOTIC THEORY
Reduced carbon
Electron transport
compounds + O2
chain
Reduced carbon Fermentation Low ATP
compounds
yield

High ATP
yield

• Composição química – Macromoléculas (95% p.s.) – proteínas,
ácidos nucléicos, lipídeos e polissacarídeos
• Não significa que vivem isoladas

Aerobic bacterium
Anaerobic eukaryote
1. Eukaryotic cell surrounds
and engulfs bacterium.

• Comunidades
• Comunicação

2. Bacterium lives within
eukaryote cell.

Pyruvate
and O2

3. Eukaryote supplies bacterium
with reduced carbon compounds.
Bacterium supplies eukaryote with
ATP.

ATP

• Interação (e até definição) com o ambiente (habitat)
• Interação com animais e plantas

Principais características da vida celular

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17/10/2013

Morfologia - forma

“a forma segue a função”

Primeira classificação – microscópios

Geneticamente direcionada e evolutivamente selecionada –
adequação ambiental

Limitações

Morfologia = forma
celular

Organização – característicos de alguns
gêneros
Cadeias de cocos – Ex. Streptococcus

Cubos tridimensionais – Ex. Sarcinas

Conjuntos “cacho de uva” – Staphylococcus

Bacillus

Spirulina

Bordetella

Clostridium

Staphylococcus Streptococcus

Escherichia

Salmonella

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17/10/2013

Estrutura celular

Dinophyceae –
dinoflagelados –
autotróficos na maioria
Menor limitação

Membrana Citoplasmática – Bacteria
Funções

Functions of Cell Wall

Proteção – delimitação do citoplasma
Barreira de permeabilidade seletiva –
concentrar metabólitos e excretar dejetos

capacidade

de

Expessura de 6 a 8 nanômetros
Transporte e sistemas de transporte
transmembrana – hidrofobicidade (G1)

–

proteínas

Relativamente fluida – óleo muito denso
Reações bioquímicas produtoras de energia – prot. transm. –
força próton motiva

• Maintaining the cell's characteristic shape- the
rigid wall compensates for the flexibility of the
phospholipid membrane and keeps the cell from
assuming a spherical shape
• Countering the effects of osmotic pressure
• Providing attachment sites for bacteriophages
• Providing a rigid platform for surface appendagesflagella, fimbriae, and pili all emanate from the
wall and extend beyond it
• Play an essential role in cell division
• Be the sites of major antigenic determinants of
the cell surface。
• Resistance of Antibiotics

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17/10/2013

Estrutura de bicamada fosfolipídica – mosaico de
proteínas

Célula eucariótica – esteróis – rigidez
Moléculas planas e rígidas

Ácidos graxos

Glicerol-fosfato

Archaea – mesma estrutura – diferença na ligação química
entre isopreno (porção hidrofóbica no lugar de ácido graxo) e
glicerol – ligação éter ao invés de éster.

Célula procarióticas – hopanoides

Monocamada lipídica – Archaea - hipertermófilos

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17/10/2013

Proteínas embebidas
Porção hidrofóbica interage com ácidos graxos
Porção hidrofílica volta-se para exterior e citoplasma

Parede celular de procariotos - bactérias
Citoplasma com alta concentração de solutos – pressão
osmótica
Conferem resistência à lise, forma e rigidez
Peptideoglicano

Discriminação – gram+ e gram-

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17/10/2013

Diferenças entre as paredes das bactérias

Células gram+ e gram-

gram-positivas e gram-negativas

Células gram+ e gram-

Coloração de Gram
Médico dinamarquês
Hans Christian Gram – 1884

Doenças respiratórias - corar cortes de pulmão
Certas bactérias também se descoravam pelo álcool

Emile Roux, em 1886
Dividiu as espécies bacterianas em Gram+ e Grampara fins de identificação.

Mecanismo de ação
Estrutura e composição da parede celular
bacteriana
Gram-positivas, a camada de PG é
mais espessa, não há membrana
externa ou espaço periplásmico.

Gram-negativas, a camada de
PG é fina e envolvida pela
membrana externa.

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17/10/2013

O método consiste no tratamento sucessivo
de um esfregaço bacteriano, fixado pelo
calor, com os reagentes cristal violeta, lugol
(iodeto de potássio), álcool e vermelho
safranina

Passo 1: Preparar um esfregaço fino, secar ao ar e fixar na
chama.
Passo 2: Cobrir com cristal violeta por 10 segundos. Enxaguar
com água.
Passo 3: Cobrir com solução de iodo por 10 segundos. Enxaguar
(coloração roxa devido ao complexo cristal violeta-iodo
formado em seus citoplasmas).
Passo 4: Descorar com álcool e enxaguar.
Passo 5: Cobrir com safranina para contra-corar por 10
segundos

Passo 6: Enxaguar e secar
Apenas as células Gram-negativas retêm o corante vermelho
safranina. Desta forma, as células Gram-positivas aparecem
corada em roxo escuro, ao microscópio.

Os poros do peptidioglicano das bactérias grampositivas contraem-se, o complexo cristal violeta-iodo
fica retido no citoplasma e as células permanecem
coradas.

Antraz

Nas bactérias gram-negativas, o álcool dissolve a
porção lipídica da membrana externa e o complexo
cristal violeta-iodo é removido, descorando as células.

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Importante!
Bactéria Gram-positiva
Bacillus brevis

A Gram-positividade não é uma propriedade definitiva. Alguns
fatores podem alterar o resultado da coloração:
• Idade da cultura - os resultados só são válidos para culturas
de 18 a 24 horas;
• pH do meio de cultura;
• Integridade da parede celular e membrana citoplasmática;
• Erros na técnica

Bactéria Gram-negativa
Aeromonas hydrophila

Camadas de superfície celular
Cápsulas e camadas limosas:

• Ação de substâncias químicas e outras substâncias que podem
alterar a reação.

Capsules and slime layers





• Polissacarídeos ou proteínas




• Formação de biofilmes



Attachment
Protection from phagocytic
engulfment.
Resistance to drying.
Depot for waste products.
Reservoir for certain
nutrients.
protection

• Fator de virulência

• These are structures surrounding the outside of the cell envelope. They
usually consist of polysaccharide; however, in certain bacilli they are
composed of a polypeptide (polyglutamic acid). They are not essential
to cell viability and some strains within a species will produce a
capsule, whilst others do not. Capsules are often lost during in vitro
culture.

Fímbrias e pili
• Estruturas protéicas filamentosas
• Fímbrias – adesão – ex.: Salmonella

Pili

• Pili – mais longas, papel na conjugação, além da adesão – ex.:
Cólera

• Pili are hair-like projections of the cell , They are
known to be receptors for certain bacterial viruses.
Chemical nature is pilin
• Classification and Function
a. Common pili or fimbriae: fine , rigid numerous,
related to bacterial adhesion
b. Sex pili: longer and coarser, only 1-4, related to
bacterial conjugation

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17/10/2013

Inclusões Celulares

PHBs

• Armazenamento de energia e constituintes básicos, como o C
• Formas insolúveis
• Visível ao microscópio
PHB – poli-3-hidroxibutirato

• Envoltas por membranas
• PHB – ácido Poli-β-hidroxibutírico
• Utilização na indústria – “plástico” – propriedades similares ao
polipropileno
• Suturas cirúrgicas, cápsulas de liberação lenta de drogas,
biopolímeros para containers e peças de automóveis

Magnetossomos
• Incrustrações de magnetita (Fe3O4)


granulos
e

Inclusions are
aggregates of
various
compounds that
are normally
involved in storing
energy reserves or
building blocks for
the cell. Inclusions
accumilate when a
cell is grown in the
presence of excess
nutrients and they
are often observed
under laboratory
conditions.

Inclusions of
Bacteria

• Magnetotaxia – função ainda obscura
• Hipótese – correlação com menor taxa de CO2 – orientar para
baixo – gravidade – menos O2

Aquaspirillum
magnetotacticum

Endósporos
• Produzidos durante a esporulação
• Células modificadas extremamente resistentes ao calor,
produtos químicos e radiação
• Resistência a altas temperaturas, ressecamento e escassez
de nutrientes
• Estrutura de disperção – vento, trato gastrintestinal e água
• Solos – ex.: Bacillus e Clostridium

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Endospores
(spores)





• Dormant cell
• Resistant to
adverse conditions
- high temperatures
- organic solvents

Identification of
Bacteria
Pathogenesis
Resistance

• Produced when starved
• Contain calcium
dipicolinate
DPA, Dipicolinic acid
• Bacillus and Clostridium

Flagelos

Nucleus
Polar
Lofotríquio

• Lacking nuclear
membrane, absence
of nucleoli, hence
known as nucleic
material or nucleoid,
one to several per
bacterium.

Polar

Peritríquio

Some bacterial

species are mobile and possess
locomotory organelles - flagella. Flagella consist of a
number of proteins including flagellin
The diameter of a flagellum is thin, 20 nm, and
long with some having a length 10 times the
diameter of cell. Due to their small diameter,
flagella cannot be seen in the light microscope
unless a special stain is applied. Bacteria can
have one or more flagella arranged in clumps
or spread all over the cell.




Flagella

Identification
of Bacteria
Pathogenesis
Motility of
bacteria

Monotrichate/Amphitrichate/Lophotrichate/Peritrichate

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Microbiologia Geral - Caracterização da Estrutura e Função Celular dos Microrganismos

  • 1.
    17/10/2013 Caractetizacão da Estruturae Função Celular “Pequenos” Limite: 0,15 µm Pq tão pequenos? É vantajoso ser pequeno? Importância de ser pequeno Taxa metabólica varia com o tamanho. Em células muito grandes, os processos de captação podem limitar o metabolismo, tornando o organismo pouco competitivo em relação aos menores. Pequenas – maior área superficial em relação ao volume celular. Implicações • Células menores crescem mais rapidamente • Maior quantidade de células por unidade de nutrientes • Explica parcialmente as taxas de mutação e evolução mais rápidas em microrganismos • Maior facilidade de adaptação ambiental – ubíquos – ambientes extremos Papel dos micro-organismos • Maior biomassa da Terra • Realizam processos fundamentais para outras formas de vida • Cianobactérias – oxigenação (surgimento de vida na Terra) • Ciclagem de Nutrientes (manutenção de vida na Terra) • Benéficos ou nocivos • População: 5.000.000.000.000.000.000.000.000.000.000 • Maioria não está na superfície da crosta • C-biomassa = plantas • N e P = 10x plantas 1
  • 2.
    17/10/2013 Micro-organismos são unicelulares THEENDOSYMBIOTIC THEORY Reduced carbon Electron transport compounds + O2 chain Reduced carbon Fermentation Low ATP compounds yield High ATP yield • Composição química – Macromoléculas (95% p.s.) – proteínas, ácidos nucléicos, lipídeos e polissacarídeos • Não significa que vivem isoladas Aerobic bacterium Anaerobic eukaryote 1. Eukaryotic cell surrounds and engulfs bacterium. • Comunidades • Comunicação 2. Bacterium lives within eukaryote cell. Pyruvate and O2 3. Eukaryote supplies bacterium with reduced carbon compounds. Bacterium supplies eukaryote with ATP. ATP • Interação (e até definição) com o ambiente (habitat) • Interação com animais e plantas Principais características da vida celular 2
  • 3.
    17/10/2013 Morfologia - forma “aforma segue a função” Primeira classificação – microscópios Geneticamente direcionada e evolutivamente selecionada – adequação ambiental Limitações Morfologia = forma celular Organização – característicos de alguns gêneros Cadeias de cocos – Ex. Streptococcus Cubos tridimensionais – Ex. Sarcinas Conjuntos “cacho de uva” – Staphylococcus Bacillus Spirulina Bordetella Clostridium Staphylococcus Streptococcus Escherichia Salmonella 3
  • 4.
    17/10/2013 Estrutura celular Dinophyceae – dinoflagelados– autotróficos na maioria Menor limitação Membrana Citoplasmática – Bacteria Funções Functions of Cell Wall Proteção – delimitação do citoplasma Barreira de permeabilidade seletiva – concentrar metabólitos e excretar dejetos capacidade de Expessura de 6 a 8 nanômetros Transporte e sistemas de transporte transmembrana – hidrofobicidade (G1) – proteínas Relativamente fluida – óleo muito denso Reações bioquímicas produtoras de energia – prot. transm. – força próton motiva • Maintaining the cell's characteristic shape- the rigid wall compensates for the flexibility of the phospholipid membrane and keeps the cell from assuming a spherical shape • Countering the effects of osmotic pressure • Providing attachment sites for bacteriophages • Providing a rigid platform for surface appendagesflagella, fimbriae, and pili all emanate from the wall and extend beyond it • Play an essential role in cell division • Be the sites of major antigenic determinants of the cell surface。 • Resistance of Antibiotics 4
  • 5.
    17/10/2013 Estrutura de bicamadafosfolipídica – mosaico de proteínas Célula eucariótica – esteróis – rigidez Moléculas planas e rígidas Ácidos graxos Glicerol-fosfato Archaea – mesma estrutura – diferença na ligação química entre isopreno (porção hidrofóbica no lugar de ácido graxo) e glicerol – ligação éter ao invés de éster. Célula procarióticas – hopanoides Monocamada lipídica – Archaea - hipertermófilos 5
  • 6.
    17/10/2013 Proteínas embebidas Porção hidrofóbicainterage com ácidos graxos Porção hidrofílica volta-se para exterior e citoplasma Parede celular de procariotos - bactérias Citoplasma com alta concentração de solutos – pressão osmótica Conferem resistência à lise, forma e rigidez Peptideoglicano Discriminação – gram+ e gram- 6
  • 7.
    17/10/2013 Diferenças entre asparedes das bactérias Células gram+ e gram- gram-positivas e gram-negativas Células gram+ e gram- Coloração de Gram Médico dinamarquês Hans Christian Gram – 1884 Doenças respiratórias - corar cortes de pulmão Certas bactérias também se descoravam pelo álcool Emile Roux, em 1886 Dividiu as espécies bacterianas em Gram+ e Grampara fins de identificação. Mecanismo de ação Estrutura e composição da parede celular bacteriana Gram-positivas, a camada de PG é mais espessa, não há membrana externa ou espaço periplásmico. Gram-negativas, a camada de PG é fina e envolvida pela membrana externa. 7
  • 8.
    17/10/2013 O método consisteno tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol (iodeto de potássio), álcool e vermelho safranina Passo 1: Preparar um esfregaço fino, secar ao ar e fixar na chama. Passo 2: Cobrir com cristal violeta por 10 segundos. Enxaguar com água. Passo 3: Cobrir com solução de iodo por 10 segundos. Enxaguar (coloração roxa devido ao complexo cristal violeta-iodo formado em seus citoplasmas). Passo 4: Descorar com álcool e enxaguar. Passo 5: Cobrir com safranina para contra-corar por 10 segundos Passo 6: Enxaguar e secar Apenas as células Gram-negativas retêm o corante vermelho safranina. Desta forma, as células Gram-positivas aparecem corada em roxo escuro, ao microscópio. Os poros do peptidioglicano das bactérias grampositivas contraem-se, o complexo cristal violeta-iodo fica retido no citoplasma e as células permanecem coradas. Antraz Nas bactérias gram-negativas, o álcool dissolve a porção lipídica da membrana externa e o complexo cristal violeta-iodo é removido, descorando as células. 8
  • 9.
    17/10/2013 Importante! Bactéria Gram-positiva Bacillus brevis AGram-positividade não é uma propriedade definitiva. Alguns fatores podem alterar o resultado da coloração: • Idade da cultura - os resultados só são válidos para culturas de 18 a 24 horas; • pH do meio de cultura; • Integridade da parede celular e membrana citoplasmática; • Erros na técnica Bactéria Gram-negativa Aeromonas hydrophila Camadas de superfície celular Cápsulas e camadas limosas: • Ação de substâncias químicas e outras substâncias que podem alterar a reação. Capsules and slime layers    • Polissacarídeos ou proteínas   • Formação de biofilmes  Attachment Protection from phagocytic engulfment. Resistance to drying. Depot for waste products. Reservoir for certain nutrients. protection • Fator de virulência • These are structures surrounding the outside of the cell envelope. They usually consist of polysaccharide; however, in certain bacilli they are composed of a polypeptide (polyglutamic acid). They are not essential to cell viability and some strains within a species will produce a capsule, whilst others do not. Capsules are often lost during in vitro culture. Fímbrias e pili • Estruturas protéicas filamentosas • Fímbrias – adesão – ex.: Salmonella Pili • Pili – mais longas, papel na conjugação, além da adesão – ex.: Cólera • Pili are hair-like projections of the cell , They are known to be receptors for certain bacterial viruses. Chemical nature is pilin • Classification and Function a. Common pili or fimbriae: fine , rigid numerous, related to bacterial adhesion b. Sex pili: longer and coarser, only 1-4, related to bacterial conjugation 9
  • 10.
    17/10/2013 Inclusões Celulares PHBs • Armazenamentode energia e constituintes básicos, como o C • Formas insolúveis • Visível ao microscópio PHB – poli-3-hidroxibutirato • Envoltas por membranas • PHB – ácido Poli-β-hidroxibutírico • Utilização na indústria – “plástico” – propriedades similares ao polipropileno • Suturas cirúrgicas, cápsulas de liberação lenta de drogas, biopolímeros para containers e peças de automóveis Magnetossomos • Incrustrações de magnetita (Fe3O4)  granulos e Inclusions are aggregates of various compounds that are normally involved in storing energy reserves or building blocks for the cell. Inclusions accumilate when a cell is grown in the presence of excess nutrients and they are often observed under laboratory conditions. Inclusions of Bacteria • Magnetotaxia – função ainda obscura • Hipótese – correlação com menor taxa de CO2 – orientar para baixo – gravidade – menos O2 Aquaspirillum magnetotacticum Endósporos • Produzidos durante a esporulação • Células modificadas extremamente resistentes ao calor, produtos químicos e radiação • Resistência a altas temperaturas, ressecamento e escassez de nutrientes • Estrutura de disperção – vento, trato gastrintestinal e água • Solos – ex.: Bacillus e Clostridium 10
  • 11.
    17/10/2013 Endospores (spores)    • Dormant cell •Resistant to adverse conditions - high temperatures - organic solvents Identification of Bacteria Pathogenesis Resistance • Produced when starved • Contain calcium dipicolinate DPA, Dipicolinic acid • Bacillus and Clostridium Flagelos Nucleus Polar Lofotríquio • Lacking nuclear membrane, absence of nucleoli, hence known as nucleic material or nucleoid, one to several per bacterium. Polar Peritríquio Some bacterial species are mobile and possess locomotory organelles - flagella. Flagella consist of a number of proteins including flagellin The diameter of a flagellum is thin, 20 nm, and long with some having a length 10 times the diameter of cell. Due to their small diameter, flagella cannot be seen in the light microscope unless a special stain is applied. Bacteria can have one or more flagella arranged in clumps or spread all over the cell.    Flagella Identification of Bacteria Pathogenesis Motility of bacteria Monotrichate/Amphitrichate/Lophotrichate/Peritrichate 11