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Princípios Básicos de Microbiologia Médica
Profº Pedro Filho
Dimensão das bactérias (mm/1000)
CITOLOGIA BACTERIANA
Introdução
• As células são as unidades fundamentais dos seres vivos
• Bactérias são os menores seres vivos independentes
Introdução
Classificação das Bactérias – Aspectos
Macroscópicos
• A diferenciação inicial entre as bactérias pode ser realizada
pelas características de crescimento em diferentes meios de
cultura;
• A soma de suas características determinam as características
diferenciais como a cor, tamanho, forma e odor;
• Utilizando meios de cultura adequados, podem ser
determinadas a capacidade de resistir a certos antibióticos,
de fermentar açúcares específicos, lisar hemácias;
Morfologia Bacteriana
Cocos - Células esféricas que quando agrupadas aos pares recebem o nome de
diplococos. Quando agrupadas em cadeias são denominados
estreptococos. Cocos em agrupados cachos de uva recebem o nome
de estafilococos.
Diplococos
Streptococcus pneumoniae Neisseria gonorrhoeae
Estreptococos
Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus
Estafilococos
Classificação das Bactérias – Aspectos
Microscópicos
Morfologia Bacteriana
Bastonetes - Células em forma de bastão.
Vibriões
Espiroquetas
Classificação das Bactérias – Aspectos
Microscópicos
Morfologia Bacteriana
Coloração de Gram
• É um teste rápido, importante e fácil que permite aos clínicos
a diferenciação entre as duas mais importantes classes de
bactérias, permitindo um diagnóstico inicial e começar;
Técnicas de identificação bacterianas
Técnicas de identificação bacterianas
Sorotipagem
• Testes sorológicos usados em tipos de bactérias que não
podem ser cultivados, exemplos, Treponema pallidum –
causador da sífilis, Francisella – organismo causador da
tularemia, Escherichia coli sorotipo O157, agente causador da
colite hemorrágica;
Técnicas de identificação bacterianas
Estruturas bacterianas
x
Morfologia Bacteriana
O citoplasma das bactérias
contém o DNA cromossomal,
mRNA, ribossomos, proteínas
e metabólitos
Morfologia Bacteriana
Nucleoide – local
no citoplasma, onde
fica o DNA
Morfologia Bacteriana
Plasmídeo –
Formas circulares
de DNA
extracromossomal
Morfologia Bacteriana
DNA – Molécula que carrega
a informação necessário para o
crescimento e
desenvolvimento da bactéria
Morfologia Bacteriana
Ribossomo –
Maquinaria para
síntese de proteínas
Morfologia BacterianaPolissomos ou polirribossomos
Membrana
plasmática –
Maquinaria para
síntese de proteínas
Morfologia Bacteriana
Parede celular –
Estrutura responsável
pela sustentação
mecânica da bactéria
Morfologia Bacteriana
Parede Celular
• Os componentes da parede celular diferenciam as bactérias
Gram positivas das Gram negativas;
• Os componentes celulares são, também, peculiares para as
bactérias e suas estruturas repetitivas contribuem para as
respostas da imunidade inata humana;
Morfologia Bacteriana
Parede Celular
Morfologia Bacteriana
Bactéria Gram positivas
• Bactérias Gram positivas possuem uma parede celular
espessa em múltiplas camadas constituída principalmente de
peptídoglicano;
Funções do peptídoglicano:
Funciona como exoesqueleto
Essencial para estrutura da bactéria
Está envolvido no processo de duplicação
Proteção contra ambientes hostis
Morfologia Bacteriana
GRAM POSITIVAS
Estrutura do Peptideoglicano
Bactéria Gram positivas
Morfologia Bacteriana
Bactéria Gram positivas
• Na parede celular de bactérias Gram positivas pode incluir
outros componentes tais como
• Ácido teicoicos – São solúveis em água, são essenciais para a
viabilidade celular, e são responsáveis pela virulência da
bactéria;
• Ácido lipoteicoicos – Estão ligados a membrana plasmática
através de ácidos graxos ancorados. São os antígenos de
superfície;
Morfologia Bacteriana
ÁCIDOS TEICÓICO e LIPOTEICÓICO
• Polimeros Hidrossoluveis
• Antígenos de Superfície
• Auxílio na seleção de moléculas
Morfologia Bacteriana
Bactéria Gram Negativas
• A parede celular de bactérias Gram negativas são estrutural e
quimicamente mais complexas do que as da bactérias Gram
positivas;
Morfologia Bacteriana
Além de manter a estrutura
bacteriana, permite o
transporte de moléculas
importantes, fornece proteção
para condições ambientais
adversas.
Bactéria Gram Negativas
 A parede celular de bactérias Gram negativas são estrutural e
quimicamente mais complexas do que as da bactérias Gram
positivas;
Morfologia Bacteriana
Lipopolissacarideo (LPS) ou endotoxina, é um potente
desencadeador de resposta imune inata. O LPS ativa os
linfócitos B, células dendríticas, macrófagos, e outras
células a liberar IL-1 e IL-6, TNF. Induz à produção
de febre e pode causar choque séptico. Causa a reação
de Shwartzman.
Estruturas externas
É fracamente antigênica e
antifagocítica sendo um
importante fator de
virulência. Impende a
passagem de moléculas
tóxicas, e serve para
aderência no tecido do
hospedeiro
Streptococcus mutans utiliza a sua cápsula para se
aderir e perfurar o esmalte dentário
Morfologia Bacteriana
Estruturas externas
São responsáveis pela adesão da
bactérias as mucosas, sendo de
fundamental importância para a
virulência bacteriana.
Morfologia Bacteriana
Divisão Celular
• A divisão celular inicia com
a replicação do
cromossomo;
• Extensão da parede celular;
• Formação do septo;
Morfologia Bacteriana
Esporos bacterianos
• Geralmente são formados por bactérias Gram positivas;
• Sob condições ambientais inóspitas, como privação
nutricional, as bactérias podem passar do estado vegetativo
para o estado de dormência;
• O esporo é uma estrutura de múltiplas capas, desidratada
que protege e permite que a bactéria exista em “estado de
animação suspenso”;
Morfologia Bacteriana
Esporos bacterianos
• O esporo tem
– Uma membrana externa;
– Duas camadas de peptidoglicano;
– Um revestimento proteico semelhante a
queratina;
Morfologia Bacteriana
Esporos bacterianos
• Ácido dipicolínico é produzido para ser ligado ao cálcio e
assim, estabilizar o interior do esporo;
Morfologia Bacteriana
Esporos bacterianos
Morfologia Bacteriana
Esporos bacterianos
 Forma de resistência:
 calor;
 dessecação;
 agentes químicos;
 agentes físicos.
Morfologia Bacteriana
Esporos bacteriano
• A germinação do esporo ocorre após um estresse mecânico
causando a ruptura do revestimento externo;
• Após a iniciação do processo de germinação o esporo absorve
água do meio e está pronto para produzir uma bactéria
idêntica a original;
Morfologia Bacteriana
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
Metabolismo Bacteriano
Conjunto de reações bioquímicas necessárias à vida,
compreende o catabolismo e anabolismo
catabolismo – reações químicas que liberam energia a
partir da degradação de substância orgânicas
anabolismo – reações químicas que consomem energia
e permitem a síntese de precursores metabólicos,
macromoléculas e estruturas celulares
Metabolismo
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
Metabolism
o
Catabolism
o
Anabolismo
EnergiaEnergia
Crescimento
E
Multiplicação
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
luminosa
Fotossintetizantes
Compostos Inorgânicos (Fe2+, NO2-,
H2)
Litotróficos
Compostos Orgânicos (Glicose)
Heterotróficos ou Organotróficos
ATPATP
Biossíntes de
Macromoléculas
Montagem de
Estruturas
Divisão Celular
Exigências metabólicas
• O crescimento bacteriano requer uma fonte de energia e
matéria-prima para a construção de proteinas, estruturas e
membranas;
• Os elementos essenciais são, proteínas, lipídios, e ácido
nucléicos (C, N, O, H, S, P), e íons (K, Na, Mg, Ca, Cl, Fe, Zn,
Mn, Mo, Se, Co, Cu, Ni)
Metabolismo
A exigência mínima para o crescimento é uma fonte de carbono e nitrogênio,
uma fonte de energia, água e vários íons.
Exigências metabólicas
• Clostridium perfringens, causador da gangrena gasosa, não
pode crescer na presença de O2. Portanto, é considera
anaeróbio obrigatório;
• Mycobacterium tuberculosis, causador da tuberculose, exige a
presença de oxigênio, sendo portanto, um aeróbio
obrigatório;
• Anaeróbios facultativos  Bactérias que vivem tanto na
presença como na ausência de oxigênio;
Metabolismo
Produção da enzima
superóxido dismutase
Exigências metabólicas
Metabolismo
Autotróficos – Utilizam CO2 como fonte de carbono
Organotróficos – Utilizam compostos orgânicos como fonte
de carbono
Quimiolitotróficos – Utilizam compostos inorgânicos como
fonte de energia e CO2 como fonte de carbono
Fototróficos – Utilizam luz como fonte de energia e CO2 como
fonte de carbono
Quimioorganotróficos – Utilizam compostos orgânicos como
fonte de energia e de carbono
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
Metabolismo Bacteriano
Metabolismo
Genética Bacteriana
• O genoma bacteriano é a coleção total de genes portados por
uma bactéria;
• Os genes são sequências de DNA que contém informação
para a síntese de proteínas;
Genética Bacteriana
Transcrição
• A informação presente no DNA é transcrita em um RNA
mensageio (mRNA);
• Essa reação é realizada pela RNA polimerase
Genética Bacteriana
Tradução
• A tradução é processo pelo qual a linguagem do código
genético, na forma de mRNA, é convertida (traduzida) em
uma sequência de aminoácidos, a proteína;
Genética Bacteriana
Tradução
• A síntese de proteínas é tão importante para as bactérias, que
muitos antibióticos atuam inibindo a síntese de proteínas;
• Os antibióticos aminoglicosídeos (estreptomicina e
gentamicina) e as tetraciclinas, macrolídios (eritromicina), e
licomicinas (clindamicina) agem ligando-se aos ribossomos
inibindo a síntese de proteínas;
Genética Bacteriana
Replicação do DNA
• O cromossomo bacteriano é um depositório de informação
pelo qual as características das bactérias são definidas;
• Quando a bactéria inicia o processo de divisão celular, o
ponto inicial é a replicação do DNA;
Genética Bacteriana
Crescimento Bacteriano
Genética Bacteriana
Divisão celular
• A duplicação bacteriana é o processo pelo qual duas células-
filhas são produzidas;
• O processo de duplicação é um processo cuidadosamente
regulado;
Crescimento Bacteriano
Uma vez iniciado o ciclo, a síntese de DNA deve caminhar para a
conclusão, mesmo que todos os nutrientes sejam retirados do meio;
Divisão celular
Crescimento Bacteriano
Fases do crescimento bacteriano
Crescimento Bacteriano
1
2
3
4
NúmerodeBactérias(log)
Tempo
Fase Lag
Fase Log
(Exponencial)
Fase
Estacionária
Fase de Morte
adaptação
multiplicação
Falta de nutrientes
Acúmulo de subprodutos tóxicos
Equilíbrio multiplicação e morte
Ativação de enzimas que lisam parede ceular
Condições de crescimento bacteriano
Crescimento Bacteriano
• TEMPERATURA
Psicrófilas (12 a 17 graus C)
Mesófilas (28 a 37 graus C)
Termófilas (57 a 90 graus C)
Termófilas extremas (>100 graus C)
• pH
Acidófilas (ph<5)
Alcalófilas (pH>10)
• Oxigenação
Aeróbicas (patógenos respiratórios e de mucosa),
Anaeróbicas (trato gastrointestinal e ambiente –
esporos), Microaerófilas ( PO2), Facultativas,
Aerotolerntes (Anaeróbio)
• Salinidade Bactérias Halófitas
Requerimento de nutrientes
Crescimento Bacteriano
• Algumas bactérias são capazes de crescer em meio
simples – organismos entéricos
• Algumas bactérias são extremamente fastidiosas
(complexo requerimento nutricional) – organismos que
crescem nas mucosas ou no interior da célula do
hospedeiro
• Algumas bactérias crescem em meio indefinido
(sangue, soro, extrato de levedura, etc…)
Antibiograma
• É o resultado de um exame laboratorial com o objetivo de
identificar a sensibilidade de uma linhagem de bactérias
isoladas contra diferentes tipos de antibióticos;
Detecção de Bactérias
Antibiograma
• Nos hospitais e clínicas, antibióticos são frequentemente
prescritos com base em guias gerais do conhecimento a
respeito da sensibilidade;
• ex: Infecções do trato urinário sem complicações podem ser
tratadas com quinolonas. Isso ocorre porque a E. coli é o
provável, e é sabidamente sensível ao tratamento com
quinolonas;
Detecção de Bactérias
Antibiograma
Detecção de Bactérias
• Muitas bactérias são resistentes a diversas classes de
antibióticos, e o tratamento não é tão simples. Este é o caso
de pacientes internados em unidades de terapia intensiva;
• Quando esses pacientes desenvolvem uma pneumonia
adquirida em ambiente hospitalar, bactérias mais resistentes
como Pseudomonas aeruginosa estão potencialmente
envolvidas;
• Antibióticoterapia empírica;
Antibiograma
Detecção de Bactérias
• Antes de iniciar o tratamento, o procedimento correto é, o
médico ou enfermeiro deve coletar uma amostra do indivíduo
com suspeita de contaminação;
• Essas amostras são transferidas para o laboratório de
microbiologia que analisa a amostra através do microscópio e
tenta cultivar a bactéria.
• O procedimento seguinte é realizar um ANTIBIOGRAMA!
Antibiograma
Detecção de Bactérias
• QUAL O OBJETIVO DE REALIZAR UM
ANTIBIOGRAMA, COM UMA AMOSTRA
COLETADA DE INDIVÍDUO COM SUSPEITA DE
INFECÇÃO BACTERIANA
Antibiograma
Detecção de Bactérias
Antibiograma
Detecção de Bactérias
• Uma vez que a cultura tenha se estabelecido,
há duas formas de se obter um antibiograma:
Método de Kirby-Bauer
Antibiograma
• Um método semi-quantitativo baseado em difusão. Pequenos
discos contendo diferentes antibióticos;
Método de Kirby-Bauer
Antibiograma
• Um método semi-quantitativo baseado em difusão. Pequenos
discos contendo diferentes antibióticos;
Método quantitativo de diluição
Antibiograma
• Em série de recipientes com diluições de antibiótico
progressivamente menores são inoculadas com o
microrganismo analisado;
• Quando a concentração inibitória mínima é calculada, ela
pode ser comparada com os valores conhecidos para a
relação entre a bactéria e o antibiótico.