O documento discute a importância da higienização das mãos para reduzir a transmissão de infecções em serviços de saúde. Ele fornece o contexto histórico do desenvolvimento dos protocolos de higienização das mãos a partir do século XIX e descreve a técnica de coloração de Gram, usada para diferenciar bactérias.

1. Profa.Rosana Saint Clair

2. Lavagens das mãos
Atualmente, a atenção à segurança do paciente,
envolvendo o tema “Higienização das Mãos” tem sido
tratada como prioridade, a exemplo da “Aliança
Mundial para Segurança do Paciente”, iniciativa da
Organização Mundial de Saúde (OMS) já firmada com
vários países (http://www.who.int/patientsafety/en). A
criação dessa aliança realça o fato de que a segurança
do paciente, agora é reconhecida como uma questão
global. Esta iniciativa se apóia em intervenções e ações
que tem reduzido os problemas relacionados com a
segurança dos pacientes nos países que aderiram a esta
aliança.

3. As mãos são consideradas ferramentas principais dos
profissionais que atuam nos serviços de saúde, pois são
as executoras das atividades realizadas. Assim, a
segurança do paciente nesses serviços depende da
higienização cuidadosa e freqüente das mãos destes
profissionais.

4. Contexto histórico
A prevenção e o controle das infecções relacionadas à
assistência à saúde constituem grandes desafios da
medicina atual. Desde 1846, uma medida simples, a
higienização apropriada das mãos, é considerada a
mais importante para reduzir a transmissão de
infecções nos serviços de saúde

5. Há muito já era aventada a relação entre os hospitais e as
infecções, mas foi apenas no século XIX, quando a
medicina ainda era permeada pela Teoria da Geração
Espontânea e pela Concepção Atmosférico-
Miasmática, que James Young Simpson (1811-1870)
indicou a realização de procedimentos cirúrgicos
domiciliares, ao constatar que a mortalidade
relacionada à amputação era de 41,6% quando
realizada no ambiente hospitalar e apenas 10,9%, no
domicílio.

6. Foi o médico húngaro Ignaz Philip Semmelweis (1818-1865),
que em 1846, comprovou a íntima relação da febre
puerperal com os cuidados médicos. Ele notou que os
médicos que iam diretamente da sala de autópsia para a de
obstetrícia tinham odor desagradável nas mãos. Ele
postulou que a febre puerperal que afetava tantas mulheres
parturientes fosse causada por “partículas cadavéricas”
transmitidas na sala de Ignaz Philip Semmelweis (1818-
1865) autópsia para a ala obstétrica por meio das mãos de
estudantes e médicos. Por volta de maio de 1847, ele insistiu
que estudantes e médicos lavassem suas mãos com solução
clorada após as autópsias e antes de examinar as pacientes
da clínica obstétrica4-5. No mês seguinte após esta
intervenção, a taxa de mortalidade caiu de 12,2 para 1,2%6 .

7. Higienização das mãos
Em 2002, os CDC publicaram o “Guia para higiene de
mãos em serviços de assistência à saúde”. Nesta
publicação, o termo “lavagem das mãos” foi alterado
por “Higienização das mãos” devido à maior
abrangência deste procedimento. De acordo com este
documento, a fricção anti-séptica das mãos com
preparações alcoólicas constitui o método preferido de
higienização das mãos pelos profissionais que atuam
em serviços de saúde1

8. Evidências diretas
As mãos dos profissionais de saúde já foram implicadas
como fonte de surtos causados por bactérias Gram-
positivas, bactérias Gramnegativas e fungos, usando
tipagem molecular que evidenciou o mesmo clone nas
mãos desses profissionais e nos pacientes infectados.

10. Técnica

15. Importantíssimo a lavagens das mão
para a manipulação de culturas.
Evitando assim a contaminação das
mesmas.

16. Isolamento de microorganismos

20. Coloração
As bactérias podem ser observadas de duas maneiras, com e sem
coloração. Em uma observação sem coloração (a fresco, através
de observação de suspensão bacteriana entre lâmina e lamínula,
ou pela gota pendente), os microrganismos são observados vivos.
Geralmente, a observação a fresco é utilizada para visualização da
mobilidade e morfologia de bactérias espiraladas (que podem
ficar distorcidas se fixadas), ou mesmo em outras bactérias, para
observar alterações na divisão celular e formação de esporos.
Neste caso, utiliza-se geralmente um microscópio de campo
escuro, pois as bactérias ao microscópio de campo claro tendem
a aparecer transparentes, sendo necessária, muitas vezes, a
utilização de filtros de densidade neutra para diminuir a
intensidade luminosa e facilitar a visualização.

21. Por outro lado, em uma preparação com a utilização de
corantes, os microrganismos são corados, após serem
mortos pelas interações químicas que muitas vezes
podem ocorrer com auxílio de calor. Assim, quando
utilizamos material fixado e corado, temos várias
vantagens, pois além de as células ficarem mais visíveis
após a coloração, podemos transportar estas lâminas
sem risco (pois o material está fixado), bem como
diferenciar células de afinidades distintas aos corantes
e de morfologia variada.

22. Coloração de GRAM
Desenvolvida pelo médico dinamarquês Hans Christian
Joachim Gram, em 1884. Tem como fundamento o fato
de que as bactérias, quando coradas por derivados
próximos da rosanilina (violeta genciana, cristal-
violeta, metilvioleta, etc.) e depois de tratadas pelo
iodo (solução iodo-iodetada, conhecida como lugol),
formam um composto de coloração escura roxa ou azul
escuro. Este composto, nas bactérias Gram-positivas, é
fortemente retido e não pode ser facilmente removível
pelo tratamento posterior com o álcool, ao passo que
nas Gram-negativas este composto é facilmente
descorado pelo álcool

23. Muitas explicações já foram sugeridas na tentativa de elucidar
o mecanismo da reação de Gram. As mais plausíveis dizem
respeito à diferença na estrutura química da parede celular.
Num primeiro momento, todas as bactérias (G+ e G-)
absorvem igualmente o cristal violeta (corante básico que
possui afinidade pelos seus citoplasmas, devido à carga
elétrica negativa oriunda principalmente dos radicais
fosfatos dos ácidos nucléicos). A seguir, o lugol reage com o
cristal violeta formando o complexo iodo-cristal violeta
(CV-I), que se fixa e cora a célula mais intensamente.
Posteriormente, quando tratamos o esfregaço com álcool,
as bactérias se comportam de maneira diferente:

24. Bactérias G+
As bactérias Gram-positivas não se descoram facilmente
pelo tratamento com o álcool. Isto se explica pelo fato
dessas bactérias possuírem uma espessa parede celular
(várias camadas de peptidioglicano), além de outros
possíveis componentes, como: ácidos teicóicos,
proteínas, polissacárides e etc. Estas substâncias não
são solúveis em álcool, que parece atuar reduzindo a
permeabilidade da parede, dificultando a extração
(saída) do complexo CV-I (no citoplasma). A bactéria
Gram-positiva permanece então com a coloração
(coram-se em roxo) até o final.

26. Bactérias G-
As bactérias Gram-negativas são descoradas pelo tratamento
com o álcool. Estas bactérias possuem uma delgada camada
de peptideoglicano (que não é suficiente para impedir a
passagem do solvente) além de uma membrana externa rica
em lipídios (lipoproteina, fosfolípides e lipídio “A” que
participa do LPS). O álcool solubiliza (dissolve) estes
lipídeos (muitas vezes dissolvendo membrana externa), o
que contribui para um aumento da permeabilidade da
parede, permitindo a remoção CV-I, descorando a célula.
Finalmente, as bactérias descoradas pelo álcool, por não
apresentarem contraste que permita sua visualização, são
contra coradas pelo corante secundário, que é a fucsina
(coram-se em rosa).

30. Obrigada. Deus abençoe