O documento discute a preservação da fertilidade masculina, resumindo: 1) A técnica foi desenvolvida na década de 1960 e expandida para preservar a fertilidade antes de tratamentos de câncer e outras condições; 2) A criopreservação de espermatozoides tem resultados de gravidez similares às técnicas de reprodução assistida usando espermatozoides frescos; 3) Apesar da baixa qualidade após descongelamento, a criopreservação permite a paternidade por meio de técnicas

1. 25º Congresso Brasileiro de Reprodução Humana – São Paulo, Nov-2012
Preservação da fertilidade
masculina
Sidney Verza Jr
Biólogo,
ANDROFERT- Centro de Referência em Reprodução Masculina
Campinas – São Paulo
www.androfert.com.br

2. Histórico
 Desenvolvido em ~1960 (Sherman, JK, 1964);
 Ganhou ênfase após o desenvolvimento
da R. A. Alta Complexidade:
 FIV convencional (Steptoe & Edwards, 1978)
 ICSI (Palermo et al, 1992)
 Expandido para as técnicas de extração
espermática

3. Indicações
 Anterior ao tratamentos gonadotóxicos;
 Profissões de risco;
 Pré vasectomia;
 Sincronização de datas em RA;
 Programas de doação de óvulos;

4. Indicações
 Associado às técnicas de extração de
espermatozoides do epidídimo/testículo;

5. Câncer e Fertilidade no homem
 Homens idade reprodutiva:
Brasil: 15.000 novos casos de
câncer/ano
Testículo, linfoma Hodgkin e
leucemia
CA Testículo: 1-2%dos homens

6. Efeitos da quimioterapia na fertilidade
Tipo de Agente Efeito na Duração do
câncer quimioterápico fertilidade efeito
Doença de Hodgkin MOPP, CPP, MVPP Azoospermia: 94% Frequentemente
irreversível
Sarcoma Agentes alquilantes Azoospermia: 90% Irreversível em
50%
Câncer de testículo Bleomicina, Azoospermia: 20% 50% de
etoposídeo, cisplatina recuperação em
2 anos
MOPP = mecloretamina, vincristina (Oncovin), procarbazina e prednisona;
CPP = ciclofosfamida, vincristina (Oncovin), procarbazina e prednisona;
MVPP = mecloretamina, vinblastina, procarbazina e prednisona.
Monga M. et al, Contemporary Urology, 1999.

7. Avaliação das características seminais nos homens com
câncer no momento do armazenamento
(Banco de Sêmen)
Laboratório de Andrologia e Banco de Sêmen Terapêutico
ANDROFERT – Centro de Referência em Infertilidade Masculina, Campinas, São Paulo
Concentração espermática normal (>20 milhões/mL)
*
85%
*
70% *
63%
*p<0,01
35%
Controle CA Linfoma/ Sarcoma/
n=24 testículo Leucemia outros
n=106 n=84 n=22

8. Características de um Banco de Sêmen
Terapêutico para homens com câncer no Brasil
Laboratório de Andrologia e Banco de Sêmen Terapêutico
ANDROFERT – Centro de Referência em Infertilidade Masculina, Campinas, São Paulo
Sobrevida %
48 49
39 39
36
controle cancer CA test linf/leuc sarcoma/outros

9. ICSI
46% CA Testículo
Banco Sêmen
pacientes
oncológicos FIV
IIU
33%
Androfert 21%
Sarcoma/outros
Técnica de Reprodução
Assistida indicada
conforme qualidade
seminal pós-
descongelamento
Linfoma/ Leucemia

10. Infra-estrutura e regras
Agência Nacional de Vigilância Sanitária
Normas técnicas para o funcionamento de Banco
de Células e Tecidos Germinativos
 Infra-estrutura: sala coleta, laboratório, tanques
armazenamento, sistema alarme, cabine
segurança biológica, equipamentos
congelamento, centro cirúrgico

11. Criopreservação de Espermatozoides
 Diluição com crioprotetor
 Objetivo: evitar a formação intracelular
de cristais de gelo (glicerol)
 Adição fracionada (25% cada vez)
 Acondicionamento T
(graus/Celsius)
25
 Crio:
 Fase resfriamento
4
 Fase vapor
 Fase armazenamento
Equilíbrio
-79
-
79°
C V
15-18 A Nitrogê -
-196
cm P nio 196°C
O líquido
R
136
16
Nitrogênio 8 Tempo (min)
líquido

12. Efeitos da criopreservação sobre os
espermatozoides
 Alterações na penetração no muco cervical (Fjallbrant & Ackerman, 1969)
 Diminuição da motilidade espermática e integridade da
membrana plasmática (Keel et al., 1987, Esteves et al., 1996)
 Diminuição da penetração em oócitos de hamster (Critser et al., 1987)
 Alterações na estrutura acrossômica (Cross & Hanks, 1987; Esteves et al., 1998, 2000)
 Diminuição da atividade da acrosina (Mack & Zaneveld, 1987; Lasso et al., 1994)
 25-75% dos espermatozoides morrem ou sofrem
lesões irreversíveis.

13. Impacto da técnica

14. Impacto do crioprotetor

15. RA sêmen criopreservado:
resultados
 IIU: 16%-30%/ciclo; taxa
cumulativa até 70%/ 6 ciclos
 FIV/ICSI: taxas
semelhantes sêmen
fresco
 (25%-50%/ciclo; taxa
cumulativa até 75%/4
ciclos)
II Consenso Brasileiro de Infertilidade Masculina, SP, 2003

16. RA e Sptz criopreservado de
Epidídimo/Testículo:
resultados
 Epidídimo:  Testículo:
 Tx gravidez  Friedler, Ben Rhouma,
Habermann, Huang:
similares entre
fresco vs. Resultados similares;
criopreservado;  De Croo:
Resultados inferiores no
congelado vs. fresco

17. Seleção de espermatozoides
vivos para ICSI
 THO: Teste
hiposmótico
(Liu et al, 1997);
 Teste da flexibilidade
da cauda
(Soares et al, 2003)
 Uso de substâncias
estimulantes da
motilidade
(Esteves et al, 1998).
T.H.O. T.F.C.

18. Pesquisas
Com paração dos parâmetros seminais entre o
subgrupo CÂNCER, após o 1º e após o 2º
descongelamento.
 20 amostras sêmen homens
50
câncer 45
40
que solicitaram descarte 35
30
 Descongelamento e 25
20
recongelamento 15
10
 Avaliação parâmetros 5
espermáticos 0
Conc. Sptz motilidade motilidade vitalidade (%) morfologia
moveis total (%) progressiva (%)
(x106/ml) (%)
Câncer (1º) Câncer (2º)

19. Pesquisa

20. O que há de novo?
 Vitrificação:
 Uso de capilares para congelamento de
pequenas amostras (10 µL);
 Relato de bebês nascidos com
espermatozoides vitrificados.
Isachenko V et al , 2012
 Congelamento de sptz em pequenos volumes
pós PESA/TESA/micro-TESE.
Endo et al, 2012

21. Conclusões
 Técnica bem estabelecida: Vapor de
nitrogênio líquido e glicerol;
 Resultados similares de gravidez associado às
técnicas de RA;
 Baixa qualidade seminal pós-crio não
inviabiliza paternidade (TRA);
 Criopreservação espermatozoides extraídos do
epidídimo ou parênquima testicular: viável.

22. 25º Congresso Brasileiro de Reprodução Humana – São Paulo, Nov-2012
Preservação da fertilidade
masculina
Contato: labfiv@androfert.com.br
Para rever esta aula: www.androfert.com.br/aulas