A PerkinElmer apresenta um ensaio comercial para triagem de TREC, um marcador de imunodeficiência combinada severa (SCID) em recém-nascidos, usando tecnologia de amplificação de ácido nucleico. O sistema inclui reagentes, instrumentos e software para uma triagem eficaz, com alta sensibilidade e especificidade. Os produtos não estão disponíveis em alguns países, incluindo EUA e Brasil, e a empresa fornece treinamento e suporte para a implementação do teste.

1. Sistema EnLiteTM Neonatal TREC
TREC
PARA A
SAÚDE

2. A PerkinElmer tem orgulho em apresentar o primeiro ensaio comercial para
triagem de TREC. O ensaio faz parte de um sistema completo, com marca
CE para garantir o uso seguro e eficaz como um auxiliar na triagem de
SCID.
O ensaio EnLiteTM Neonatal TREC é um ensaio de manchas de sangue
seco (DBS) que emprega a amplificação de ácido nucleico baseado em PCR
e a tecnologia de transferência de energia de ressonância por fluorescência
por tempo resolvido (TR-FRET). Fabricado de acordo com as boas práticas
de fabricação (GMP), o kit contém todos os reagentes prontos para o uso,
além de controles e calibradores em formato DBS para torná-los tão
representativos quanto possível.
Triagem de SCID no início da vida
Solução com marca CE para triagem SCID

3. A Imunodeficiência combinada grave
(SCID) é um grupo de distúrbios
caracterizados por um defeito grave na
produção e no funcionamento da célula T.
Normalmente, bebês com SCID falecerão
por infecções antes de um ano de idade, a
menos que o sistema imunológico do bebê
seja restaurado através de tratamento [1].
O tratamento preferido é o transplante de
medula óssea/células-tronco. Evidências de
séries de ensaios de grande porte indicam
que crianças que recebem transplantes de
células-tronco devido ao SCID muito cedo
apresentam resultados melhores em
comparação com crianças que são tratadas
mais tarde [2].
Por que a triagem para SCID?
Os círculos excisados do receptor
de células T (TRECs) são fragmentos
circulares de DNA gerados durante
o rearranjo do receptor de células T.
Em neonatos saudáveis, os TRECs
são criados em grandes quantidades,
enquanto que em bebês com SCID
os TREC são dificilmente detectáveis.
O que são TRECs?

4. Um sistema completo:
Produtos, Treinamentos e Apoio
A PerkinElmer, a primeira empresa em triagem de
SCID, oferece os reagentes, os instrumentos de
medição e o software de que você precisa.
Ao desenvolver estes produtos, os primeiros do
gênero, a PerkinElmer economizou para os
programas individuais, grande parte do trabalho que
programas pioneiros anteriores tinham que executar
eles mesmos. A PerkinElmer buscou e controlou a
qualidade de todos os materiais, observou as
normas GMP em todos os estágios de fabricação e
atendeu os requisitos para a certificação CE, de
forma que os usuários podem confiar na segurança
e na eficácia dos produtos.

5. • Instrumento VICTORTM EnLite:
O VICTOR EnLite é um fluorômetro de leitura de placa, recorrendo à tecnologia
TR-FRET para assegurar a detecção simultânea das marcações duplas do ensaio.
• Ensaio EnLiteTM Neonatal TREC:
O ensaio EnLite Neonatal TREC é um ensaio duplo que detecta TREC, o marcador
de SCID, e a beta-actina, que é usada como controle interno para cada amostra.
• Software da estação de trabalho EnLite com opção
Specimen Gate® :
A estação de trabalho EnLite interpreta os resultados a partir do instrumento
e fornece opções de relatório flexíveis.
Além do fornecimento de uma solução de produto completa, temos grande prazer em
colocar nossa experiência à sua disposição, oferecendo treinamento, aconselhamento
e suporte abrangente, quando você implementar a triagem de SCID.

6. PICOTAGEM ELUIÇÃO AMPLIFICAÇÃO MEDIÇÃO
Quatro etapas para
obter resultados:
Iniciando com um cartão de amostra de mancha de sangue seco, o próprio ensaio tem
apenas quatro etapas: picotagem, eluição, amplificação e medição. Não há extração de
DNA e não há transferências. O ensaio é executado através das etapas de eluição,
amplificação e medição, tudo na mesma microplaca.
A ausência de transferência minimiza o risco às amostras.
A abordagem prática da triagem de SCID

7. O software dedicado do fornecedor líder de software para o
gerenciamento de dados de triagem garante a interpretação
e o relatório fáceis e flexíveis dos resultados.
O software da estação de trabalho EnLite pode ser usado de
forma independente ou com o Specimen Gate® para permitir
a total integração do ensaio de TREC nos programas de
triagem existentes.
Interpretação e relatórios
dos resultados

8. O Software da estação de trabalho EnLiteTM inclui:

10. Quando o desempenho
é importante
Excelente sensibilidade e especificidade
Clara separação de uma amostra de risco, com poucos falsos positivos
Em um estudo recente [3], o ensaio EnLite TREC foi usado para testar mais de 5.000
manchas de sangue seco anônimas e retrospectivas conjuntamente com 18 manchas de
sangue SCID positivo confirmadas.
No estudo, todas as 18 amostras SCID DBS foram identificadas com sucesso como
positivos de SCID. O número de positivos presuntivos variou de 0,04–1,00% das amostras
testadas, dependendo das configurações do limite de valor de corte para TREC.

12. No estudo, todas as amostras foram testadas pela primeira vez
em uniplicata para TREC. As amostras com um valor baixo de
TREC foram então testadas novamente em duplicata, para
confirmar o baixo resultado de TREC. Ao mesmo tempo, os
resultados do ensaio com beta-actina foram comparados com as
amostras inferiores ao valor de corte, para identificar quaisquer
amostras caracterizadas pela falha na amplificação do DNA.
O processo de duas rodadas destina-se a minimizar o número de
amostras falso-positivas e também a identificar amostras nas
quais a amplificação falhou, tornando necessária uma nova
amostra. Os usuários do produto podem desenvolver seus
próprios procedimentos e valores de corte, para melhor atender
as necessidades do seu programa de triagem.

14. Os laboratórios que trabalham com os produtos também necessitarão de uma máquina de PCR, de um
picotador com cabeçote de picotagem de 1,5 mm e de rotores/centrífugas de placa.
Os produtos não estão disponíveis nos EUA, no Canadá, Japão, México, Brasil, na China, Singapura,
Argentina, Colômbia e em alguns outros países asiáticos e sul-americanos.
Verifique a disponibilidade junto ao seu representante local da PerkinElmer.
Para obter mais informações sobre novos produtos da PerkinElmer para ensaio de TREC, visite:
www.perkinelmer.com/SCID
Para conhecer a triagem de recém-nascidos PerkinElmer, visite www.perkinelmer.com/newborn

15. Referências
[1] Centers for Disease Control and Prevention (2004): MMWR Morb. Mortal. Wkly. Rep., 53 (No. RR-1), 1–29.
[2] Buckley RH (2000) Advances in the understanding and treatment of human severe combined immunodeficiency.
Immunol Res 22, 237–251.
[3] Dados do estudo PerkinElmer.