3EM #05 Biologia molecular (2017)
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O documento discute o uso de bactérias e enzimas de restrição no estudo de biologia molecular, incluindo a replicação do DNA, eletroforese, vetores de DNA e técnicas de engenharia genética para a produção de insulina humana e plantas transgênicas.
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3EM #05 Biologia molecular (2017)
- 1. © Prof. Kyoshi Beraldo | Centro de Ensino São José Biologia molecular 3ºEM 2017 aula #05 março
- 2. © Bactéria: uma ferramenta • Ciclo rápido • E.coli duplica em 20min. • Populações pequenas • bilhões em uma placa de petri • DNA circular e pequeno • Plasmídeos • pedaços extra de DNA • intercambiáveis Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 3. © Enzimas de restrição •Cortam DNA em locais específicos • Ex: enzima bacteriana Eco RI corta onde houver G|AATT C C TTTA|G • vendidas por laboratórios Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 4. © Enzimas de restrição • DNA submetido a uma enzima sofre cortes sempre nos mesmos locais • Ex: DNA do vírus SV40 tratado com enzima Hind II é cortada em 11 fragmentos Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 5. © Estrutura do DNA • "Escada" do DNA composta de fosfato e desoxirribose • Posição dos carbonos: 5' em cima, 3' em baixo Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 6. © Replicação do DNA • Novos nucleotídeos adicionados somente no sentido 5' -> 3' Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 7. © Replicação do DNA • Complexo enzimático - DNA polimerase, Primase etc. Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 8. © Eletroforese •Analogia: • trens de tamanhos variados e desconhecidos • trem menor chega mais rápido •Cromatografia: processo semelhante Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 10. © Eletroforese • Gel de análise genética de milhos "cavalo de tróia" Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 11. © Teste de paternidade •Trechos de DNA VTNR • número variável de repetições em sequência Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 12. © Sequenciamento de DNA • Método Sanger • Bases nitrogenadas marcadas radioativamente Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 13. © Bactérias •Plasmídio como vetor Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 14. © Bactérias •Vírus bacteriófago como vetor Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 15. © Bactérias •Transgenia: produção de insulina humana Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 16. © Plantas • Plasmídio da bactéria Agrobacterium • Multiplicação do DNA • Injeção do DNA em planta Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 18. © Éxons e Íntrons • Íntron - região do DNA que não codifica aminoácidos • presentes no DNA de eucariotos Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia
- 19. © Splicing • O mesmo trecho de DNA pode ser transcrito de formas distintas Prof. Kyoshi Beraldo © #05 Biomol Bactéria Enzima restrição Eletrofor. Paternid. Vetores Transgenia