O documento apresenta os procedimentos para análise microbiológica de água coletada de uma lagoa em Minas Gerais. Descreve a coleta da amostra, o levantamento das características do local e dos usos da água. Também detalha os métodos para contagem de bactérias heterotróficas e identificação de coliformes totais e Escherichia coli na amostra.

1. Microbiologia
ANALISE DE ÁGUA

2. DADOS DA AMOSTRA
 Local da coleta: LAGOA DA PRTROBRÁS – SARZEDO MG (Barragem das Palmeiras);
 Data: 09/08/2019;
 Horário: 07:06;
 Chuvas nas 24 horas anteriores da coleta: ( ) SIM (X) NÃO;
 Tipo de água: TRATADA ( ) NÃO TRATADA (X);
 Responsável pela coleta: LETÍCIA GOMES FERNANDES ROSSI ANDRADE;
 Data do processamento da amostra: 09/08/2019
 Local do processamento da amostra: CEFET-MG campus 1.

3. LEVANTAMENTO DO LOCAL ESCOLHIDO
 Como é o entorno do local escolhido?
A Lagoa da Petrobrás, também chamada Lagoa de Ibirité, é uma represa localizada
nos municípios de Betim, Ibirité e Sarzedo, em Minas Gerais, na Região
Metropolitana de Belo Horizonte.
Rodeada por mata, casas, circundada por estrada movimentada.
 Qual é a extensão/volume do local onde foi feita a coleta?
Extenso, flui até o rio Paraopeba

4.  Essa fonte de água possui uma história? Tente levantá-la e registrá-la conversando com
moradores antigos.
Sim, a aproximadamente era um lugar de lazer, onde as pessoas nadavam e pescavam sem
nenhum medo ou insegurança. Havia vitória regia e outras lindas plantas aquáticas. Lazer
em Parker chamado Verde Galho que recebia água da represa, contudo atualmente está
desativado.
 Como é a biodiversidade da região? Existe algum cuidado ambiental? Limpeza periódica
desse local?
Têm uma biodiversidade ampla, com animais aquáticos terrestres e uma imensa vegetação.
A Petrobrás trata a agua que utiliza para o seu refino antes retornar a lagoa e tentam tirar
os aguapé em excesso diariamente, contudo o esgoto lançado pela prefeitura de Ibirité não
sofre nenhum tratamento.

5.  Qual a importância desse local para a população? E para a população da cidade?
A represa foi construída para abastecer hidricamente as atividades decorrentes do
processo de refino de petróleo da Refinaria Gabriel Passos em Betim. Esta água
segue em direção ao rio Paraopeba, que desagua no rio São Francisco.
 Quanto e como é utilizada essa água?
é utilizada no refino da REGAP e descarte de esgoto da cidade de Ibitié
 A população pesca nesse local? Existe consumo do pescado?
Sim, pescam e consomem.

6.  No local onde foi feito a coleta, existe sinalização contendo informações sobre a
qualidade dessa água? Quais?
Não existe nenhuma placa perto da coleta.
 Outras informações do local jugar importante considerando o impacto dessa
água para a população em geral que se utiliza dela.
O relatório da UFMG aponta que o Córrego Pintado, que recebe águas da refinaria
da Petrobras e deságua na lagoa, tem altos índices de condutividade elétrica,
nitrato e nitrito originados do processo de refino do petróleo. A água ainda tem
zinco, fósforo, cianeto, óleos e graxas.

9. DILUIÇÃO SERIADA
Diminuir a amostras a fim de minimizar a quantidade
de colônias obtidas na inoculação.
OBJETIVO

10. DILUIÇÃO SERIADA
MATERIAIS
Amostra de água coletada;
6 tubos com 90mL de água de diluição.

11. PROCEDIMENTOS

12. TESTE PRESUNTIVO PARA PRESENÇA DE COLIFORMES TOTAIS
EM ÁGUA
Determinar o número mais provável (NMP) de
bactérias do grupo coliformes em água pela técnica dos
tubos múltiplos.
OBJETIVO

13. TÉCNICA PARA COLETA DE AMOSTRAS DE ÁGUA
MATERIAIS
Frasco coletor de vidro ( 200mL ) esterilizável em autoclave;
Barbante.

14. PROCEDIMENTOS
PREPARAR O
FRASCO
Passar barbante
(20cm) em volta
do frasco;
REMOVER A
TAMPA
Remover a
tampa do frasco
juntamente com
o papel protetor;
COLETA
(ENCHER O
FRASCO)
Mergulhar o
frasco
completamente
no rio/lagos
segurando a
ponta do
barbante;
COLETA
(PUXAR O
FRASCO)
Puxar o frasco
quando estiver
cheio e descartar
um pouco da
água de maneira
que não
ultrapasse 80%
do seu volume;
FECHAR
Recolocar a
tampa
juntamente com
o papel protetor
fechar e amarrar.

15. PARTE 1 - MÉTODO ENZIMÁTICO: TÉCNICA DO SUBSTRATO
CROMOGÊNICO E FLUOROGÊNICO (ONPG/MUG)
Estabelecer procedimentos para pesquisa
(presença/ausência) de coliformes totais e E. coli pela
técnica do substrato cromogênico em água.
OBJETIVO

16. TÉCNICA PARA COLETA DE AMOSTRAS DE ÁGUA
MATERIAIS
Água coletada;
1 substrato cromogênico.

17. PROCEDIMENTOS
Colocar 1
envelope De
cromogênio no
frasco
Tampa,
homogeneizar
e incubar em
35°C por 24
horas
Retirar 100mL
da amostra
coletada e
colocar em um
frasco estéril.
Resultado

18. TESTE PRESUNTIVO PARA PRESENÇA DE COLIFORMES TOTAIS
EM ÁGUA
Determinar a presença de bactéria do grupo coliforme
(coliformes totais) em uma amostra de água pela
técnica do NMP-Número Mais Provável.
OBJETIVO

19. TESTE PRESUNTIVO PARA PRESENÇA DE COLIFORMES TOTAIS
EM ÁGUA
MATERIAIS
5 Tubos de Caldo Lactosado com
concentração dupla (CLD);
10 Tubos contendo Caldo Lactosado com
concentração simples (CLS);
Pipetas graduada de 1mL e 10mL;
Amostra de água para a análise.

20. PROCEDIMENTO

21. PARTE 2 – CONTAGEM PADRONIZADA DE BACTÉRIAS
HETEROTRÓFICAS EM ÁGUA
Verificar a quantidade bacteriológica de água a partir
da quantificação de bactérias heterotróficas,
estabelecendo sua classificação e adequação para o
uso.
OBJETIVO

22. CONTAGEM PADRONIZADA DE BACTÉRIAS HETEROTRÓFICAS
EM ÁGUA
MATERIAIS
Placas de Petri esterilizadas;
Tubos de ensaio contendo 9mL de água
destilada esterilizada;
Meio de cultura PCA (Plate Count Agar)
esterilizado, em tubos ou erlenmeyer fundido;
Banho-Maria com termostato;
Ponteiras de 1 e 10mL esterilizadas;
Amostra de água a ser analisada.

23. PROCEDIMENTOS

25. ENUMERAÇÃO DE COLIFORMES TERMOTOLERANTES EM
AMOSTRAS DE ÁGUA
Quantificar coliformes termotolerantes em amostras de
água.
OBJETIVO

26. MATERIAIS
Alça de platina;
Tubos de ensaio contendo caldo EC (caldo
Escherichia coli);
Bico de Bunsen;
Tubos de Duhram.

27. PROCEDIMENTOS

28. PROVAS BIOQUÍMICAS PARA IDENTIFICAÇÃO DE E. COLI
Identificar as espécies de enterobactérias isolada a
partir dos tubos contendo caldo EC;
Confirmar a presença de E. coli nas amostras de água
analisadas;
OBJETIVO

29. MATERIAIS
Ágar E.A.M. em placas Petri;
Caldo VM-VP;
Meio SIM;
Meio Citrato Simmons;
Alça de platina.

30. PROCEDIMENTOS
Marcar as placas
EAM
correspondente
aos tubos de caldo
EC positivo
Agitar o tubo de
caldo EC, inclinar e
mergulhar a alça de
platina
devidamente
flambada e resfriada
Retirar uma porção
dos tubos E transferir
para a placa com Ágar
PCA utilizado a
técnica de
esgotamento
Fechar a placa e
incubar por 48 horas
em 36°C

32. RESULTADOS
Resultado
INCOLOR
Ausência de
coliformes
AMARELO
presença de
Coliformes
Totais
Fluorescência
sob luz UV