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17
Introdução
01Intro
Cadastrada por
Raquel Silva
Material - onde encontrar
em supermercados
e farmácias
Material - quanto custa
entre 10 e 25 reais
Tempo de apresentação
mais de um dia
Dificuldade
intermediário
Segurança
requer cuidados básicos
Materiais Necessários
Os microorganismos (fungos, bactérias e vírus) são chamados
assim por terem um tamanho bastante reduzido. Eles são tão
pequenos que não conseguimos enxergá-los a olho nu, mas apenas
utilizando microscópio óptico ou eletrônico. No entanto, colônias
ou aglomerados de microorganismos podem ser visualizados sem
o auxílio de microscópios ou lupas. A seguir apresentamos passo
a passo um experimento que pode ser utilizado para pesquisar a
presença de microorganismos nos diversos ambientes.
* placas de Petri esterilizadas
* liquidificador
* Fita indicadora de pH ou solução de azul
de bromotimol
* peneira
* colher, espátulas
* 1 frasco de vidro grande (volume de cerca
de 250 ml)
* Um frasco de vidro médio (volume de
cerca de 50 ml)
* 4 Frascos de vidro médio (volume de cerca
de 50ml)
* 3 Conta gotas (descartáveis podem ser
comprados em farmácias)
* Algodão hidrofóbico
* Papel craft
* Fita crepe
* 30 ml de água filtrada
* 2% (4 gramas) de agar comercial
* Duas cenouras médias
* Nota de dinheiro
* Panela de pressão ou autoclave para esterilizar os
materiais
* Alça de vidro, ou algum material para espalhar
líquido no meio que possa ser passado no fogo
Colônia de Fungos
várias experiências, um só lugar
Ubiquidade de microorganismos
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Introdução
01
Cadastrada por
Raquel Silva
Material - onde encontrar
em supermercados
e farmácias
Material - quanto custa
entre 10 e 25 reais
Tempo de apresentação
mais de um dia
Dificuldade
intermediário
Segurança
requer cuidados básicos
Materiais Necessários
Os microorganismos (fungos, bactérias e vírus) são chamados
assim por terem um tamanho bastante reduzido. Eles são tão
pequenos que não conseguimos enxergá-los a olho nu, mas apenas
utilizando microscópio óptico ou eletrônico. No entanto, colônias
ou aglomerados de microorganismos podem ser visualizados sem
o auxílio de microscópios ou lupas. A seguir apresentamos passo
a passo um experimento que pode ser utilizado para pesquisar a
presença de microorganismos nos diversos ambientes.
Colônia de Fungos
Fita indicadora de pH Alça de vidro
várias experiências, um só lugar
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Ubiquidade de microorganismos
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Passo 1
01
Preparação do meio de cultura agar-cenoura
Cozinhe duas cenouras e bata no liquidificador com 100 ml de água. Passe a mistura na peneira para
separar a parte líquida.
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Passo 2
02
Filtre a mistura com um papel de filtro ou uma gaze dobrada. Adicione 4 gramas de agar comercial e
misture.
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Passo 3
03
Complete o volume para 200 ml com água e meça o pH (você pode usar uma fita indicadora ou uma
solução de azul de bromotimol). Ele deve estar em torno de 7,0. Caso não esteja, ajuste o pH utilizando
gotas de limão (solução ácida) ou solução de bicarbonato de sódio (solução básica). Tampe o frasco com
uma rolha de algodão hidrofóbico e coloque um pedaço de papel craft por cima.
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Passo 4
04
Preparo do material
A partir desse passo, os materiais (placas de Petri e meio de cultura, frascos de vidro, espátulas, conta-
gotas) devem estar livres de microorganismos, ou seja, estéreis. Veja como esterilizar o material nos
experimentos: Esterilizando com uma panela de pressão e Como funciona uma autoclave
Embrulhe as placas de Petri, as espátulas, palitos de picolé, conta-gotas, frascos de vidro com papel
craft. Autoclave também um dos frascos com aproximadamente 30 ml de água e tampe-o com papel
craft.
Autoclave todo o material e o meio de cultura durante 15 minutos (Para aprender a autoclavar, consulte
o experimento “Esterilizando com uma panela de pressão”).
IMPORTANTE: Ao utilizar uma autoclave pela primeira vez, peça a alguém que já tenha experiência com
esse aparelho para lhe acompanhar.
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Passo 5
05
Coleta dos materiais a serem testados
Neste experimento, você pesquisará a presença de microorganimos em amostras de terra, de água de
lago, de água de torneira, em dinheiro e no ar.
Dissolva a terra (aproximadamente uma colher de chá) na água autoclavada
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Passo 6
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Coletamos as duas amostras de água diretamente nos frascos autoclavados.
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Passo 7
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Escolha os ambientes e materiais a serem testados, colete as amostras e mãos a obra! Limpe e prepare
o local onde será feito o procedimento. Identifique as placas com as respectivas amostras e adicione,
ainda, uma placa fechada, como controle.
Mantenha uma chama acesa sobre a mesa, no local de trabalho (pode ser uma lamparina, ou bico de
bunsen), para evitar contaminação do meio de cultura com fungos e bactérias do ar. Distribua o meio de
cultura nas placas de Petri. Se o meio de cultura estiver sólido, utilize banho-maria ou microondas para
fluidificá-lo.
Coloque aproximadamente 20 ml de meio de cultura dentro de cada placa de Petri.
Deixe as placas próximas ao fogo, até que o meio se solidifique.
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Passo 8
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Com o conta-gotas, coloque em cada placa duas ou três gotas das amostras líquidas a serem testadas.
Flambe a alça de vidro no fogo e a esfrie, encostando-a no canto da placa. Utilize a alça para espalhar o
líquido sobre o meio e feche imediatamente a placa.
Flambar a alça de vidro
Espalhar com alça
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Passo 9
09
Se você for pesquisar a presença de microorganismos em algum objeto, passe-o com cuidado sobre o
meio de cultura, como fizemos neste experimento com o dinheiro. Cuidado para que seus dedos não
encostem no meio de cultura.
Para pesquisar a presença de microorganismos no ar ambiente, basta deixar a placa aberta durante
aproximadamente 5 minutos.
A placa identificada como controle não receberá qualquer amostra e nem mesmo deverá ser aberta.
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Passo 10
10
Todas as placas devidamente identificadas devem ser deixadas viradas para baixo a temperatura
ambiente.
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Passo 11
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Resultados - Observação com 24 horas
Placa água de torneira
Placa terra
Placa ar
Placa dinheiro
Placa controle
Placa água de lago
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Passo 12
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Observação com 48 horas
Placa água de torneira 48 horas
Placa terra 48 horas
Placa ar 48 horas
Placa dinheiro 48 horas
Placa controle 48 horas
Placa água de lago 48 horas
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Passo 13
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Observe a diferença entre colônias cremosas e filamentosas
As colônias de aspecto cremoso e brilhante são colônias de bactérias. Já as colônias filamentosas
apresentam aspecto aveludado e são colônias de fungos. Elas são constituídas fundamentalmente por
elementos multicelulares denominados hifas.
Colônia cremosa Colônias filamentosas
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Passo 14
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Observações com 5 dias
Placa água de torneira 5 dias
Placa terra 5 dias Placa terra 5 dias
Placa água de lago 5 dias
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Passo 14
Placa dinheiro 5 dias
Placa ar 5 dias
Placa dinheiro 5 dias
Colônias cremosas (bacterianas) e filamentosas (fúngicas)
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Passo 15
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O que acontece
Os microorganismos estão presentes na água (mares, rios, lagos e água subterrânea) no solo, no ar, nos
animais (pele, mucosas, tubo digestório), nas plantas e até em ambientes pobres em nutrientes, tais
como a água destilada e também em alguns alimentos que consumimos. Em todos esses ambientes os
microorganismos têm papel fundamental na manutenção do equilíbrio biológico. Felizmente, a maioria dos
microorganismos não faz mal ao homem, porém existem aqueles que são considerados potencialmente
patogênicos, que podem causar danos aos hospedeiros.
A ubiqüidade dos microorganismos, ou seja, a capacidade de habitar uma gama enorme de ambientes
se deve basicamente a três fatores: o tamanho reduzido, que possibilita a dispersão; a variação e
flexibilização metabólica, existente no grupo que permite se adaptar rapidamente às condições ambientais;
e a sua grande capacidade de transferência horizontal de genes. Transferência gênica horizontal é uma
maneira que os microrganismos têm de trocar material gênico. A transferência vertical é a que acontece
entre o indivíduo e sua prole (seus “filhos”). Já na transferência horizontal, o organismo recebe um
fragmento de DNA ou RNA de outro organismo que não é seu antecedente. Esse processo é importante,
pois a aquisição de material gênico aumenta as chances de adaptação do microorganismo a diferentes
condições ambientais. Por exemplo, no fragmento de DNA recebido podem existir genes que conferem
resistência a algum antibiótico ou a altas temperaturas.
Por todos esses motivos é possível observar crescimento de colônias bacterianas e fúngicas em placas
inoculadas com amostras de diferentes ambientes.
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Para saber mais
Um pouco de história...
Em 1674 o holandês Antony van Leeuwenhoek (1632 - 1723) criou o primeiro protótipo de microscópio.
Foi ele quem observou pela primeira vez organismos móveis, não vistos a olho nu, em gotas de água,
fezes, material removido dos dentes – os micróbios!
Em 1857 o químico francês Louis Pasteur (1822 -1895) mostrou que a presença de organismos
microscópicos do ar atmosférico era a fonte da ‘contaminação’ dos meios de cultivo em contato com o
ar. Os frascos que não estavam expostos ao ar permaneciam estéreis, enquanto que os expostos, após
algum tempo, entravam em putrefação. Ele também desenvolveu o processo de pasteurização para a
eliminação de microorganismos.
Ao contrário de muitos cientistas do século XIX, o médico alemão Robert Koch (1843 - 1910), acreditava
que algumas doenças pudessem ser causadas por microorganismos. Depois de vários estudos, Koch
descobriu que o agente causador do carbúnculo (doença que estava dizimando o gado na Europa), era
uma bactéria em forma de bastão. Em 1882, ele descobriu o bacilo da tuberculose, denominado de bacilo
de Koch.
Finalmente, em 1928, é descoberto o primeiro antibiótico, a penicilina, pelo escocês Alexander Fleming
(1881 - 1955). Ele observou que, em algumas placas contaminadas com bolor (fungo), as bactérias não
cresciam. É que o fungo ali presente (Penicillium notatum) produzia a penicilina, substância capaz de
inibir crescimento de outros microorganismos.
Desde então, muitas descobertas foram feitas sobre os microorganismos. Hoje em dia nós sabemos que
eles são importantes em vários campos da biotecnologia, incluindo a produção de alimentos, o uso de
transgênicos na agricultura, e até no controle agroecológico de pragas e doenças
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29 ubiquidade de microorganismos

  • 1. Ubiquidade de microorganismos 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 Introdução 01Intro Cadastrada por Raquel Silva Material - onde encontrar em supermercados e farmácias Material - quanto custa entre 10 e 25 reais Tempo de apresentação mais de um dia Dificuldade intermediário Segurança requer cuidados básicos Materiais Necessários Os microorganismos (fungos, bactérias e vírus) são chamados assim por terem um tamanho bastante reduzido. Eles são tão pequenos que não conseguimos enxergá-los a olho nu, mas apenas utilizando microscópio óptico ou eletrônico. No entanto, colônias ou aglomerados de microorganismos podem ser visualizados sem o auxílio de microscópios ou lupas. A seguir apresentamos passo a passo um experimento que pode ser utilizado para pesquisar a presença de microorganismos nos diversos ambientes. * placas de Petri esterilizadas * liquidificador * Fita indicadora de pH ou solução de azul de bromotimol * peneira * colher, espátulas * 1 frasco de vidro grande (volume de cerca de 250 ml) * Um frasco de vidro médio (volume de cerca de 50 ml) * 4 Frascos de vidro médio (volume de cerca de 50ml) * 3 Conta gotas (descartáveis podem ser comprados em farmácias) * Algodão hidrofóbico * Papel craft * Fita crepe * 30 ml de água filtrada * 2% (4 gramas) de agar comercial * Duas cenouras médias * Nota de dinheiro * Panela de pressão ou autoclave para esterilizar os materiais * Alça de vidro, ou algum material para espalhar líquido no meio que possa ser passado no fogo Colônia de Fungos várias experiências, um só lugar
  • 2. Ubiquidade de microorganismos 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 Introdução 01 Cadastrada por Raquel Silva Material - onde encontrar em supermercados e farmácias Material - quanto custa entre 10 e 25 reais Tempo de apresentação mais de um dia Dificuldade intermediário Segurança requer cuidados básicos Materiais Necessários Os microorganismos (fungos, bactérias e vírus) são chamados assim por terem um tamanho bastante reduzido. Eles são tão pequenos que não conseguimos enxergá-los a olho nu, mas apenas utilizando microscópio óptico ou eletrônico. No entanto, colônias ou aglomerados de microorganismos podem ser visualizados sem o auxílio de microscópios ou lupas. A seguir apresentamos passo a passo um experimento que pode ser utilizado para pesquisar a presença de microorganismos nos diversos ambientes. Colônia de Fungos Fita indicadora de pH Alça de vidro várias experiências, um só lugar Intro
  • 3. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 Passo 1 01 Preparação do meio de cultura agar-cenoura Cozinhe duas cenouras e bata no liquidificador com 100 ml de água. Passe a mistura na peneira para separar a parte líquida. várias experiências, um só lugar
  • 4. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 1513 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 2 02 Filtre a mistura com um papel de filtro ou uma gaze dobrada. Adicione 4 gramas de agar comercial e misture. várias experiências, um só lugar
  • 5. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 0805 1614 0906 17 01 Passo 3 03 Complete o volume para 200 ml com água e meça o pH (você pode usar uma fita indicadora ou uma solução de azul de bromotimol). Ele deve estar em torno de 7,0. Caso não esteja, ajuste o pH utilizando gotas de limão (solução ácida) ou solução de bicarbonato de sódio (solução básica). Tampe o frasco com uma rolha de algodão hidrofóbico e coloque um pedaço de papel craft por cima. várias experiências, um só lugar
  • 6. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 1007 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 4 04 Preparo do material A partir desse passo, os materiais (placas de Petri e meio de cultura, frascos de vidro, espátulas, conta- gotas) devem estar livres de microorganismos, ou seja, estéreis. Veja como esterilizar o material nos experimentos: Esterilizando com uma panela de pressão e Como funciona uma autoclave Embrulhe as placas de Petri, as espátulas, palitos de picolé, conta-gotas, frascos de vidro com papel craft. Autoclave também um dos frascos com aproximadamente 30 ml de água e tampe-o com papel craft. Autoclave todo o material e o meio de cultura durante 15 minutos (Para aprender a autoclavar, consulte o experimento “Esterilizando com uma panela de pressão”). IMPORTANTE: Ao utilizar uma autoclave pela primeira vez, peça a alguém que já tenha experiência com esse aparelho para lhe acompanhar. várias experiências, um só lugar
  • 7. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 08 16 03 14 0906 17 01 Passo 5 05 Coleta dos materiais a serem testados Neste experimento, você pesquisará a presença de microorganimos em amostras de terra, de água de lago, de água de torneira, em dinheiro e no ar. Dissolva a terra (aproximadamente uma colher de chá) na água autoclavada várias experiências, um só lugar
  • 8. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 14 09 17 01 Passo 6 06 Coletamos as duas amostras de água diretamente nos frascos autoclavados. várias experiências, um só lugar
  • 9. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 1004 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 7 07 Escolha os ambientes e materiais a serem testados, colete as amostras e mãos a obra! Limpe e prepare o local onde será feito o procedimento. Identifique as placas com as respectivas amostras e adicione, ainda, uma placa fechada, como controle. Mantenha uma chama acesa sobre a mesa, no local de trabalho (pode ser uma lamparina, ou bico de bunsen), para evitar contaminação do meio de cultura com fungos e bactérias do ar. Distribua o meio de cultura nas placas de Petri. Se o meio de cultura estiver sólido, utilize banho-maria ou microondas para fluidificá-lo. Coloque aproximadamente 20 ml de meio de cultura dentro de cada placa de Petri. Deixe as placas próximas ao fogo, até que o meio se solidifique. várias experiências, um só lugar
  • 10. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 05 16 03 14 0906 17 01 Passo 8 08 Com o conta-gotas, coloque em cada placa duas ou três gotas das amostras líquidas a serem testadas. Flambe a alça de vidro no fogo e a esfrie, encostando-a no canto da placa. Utilize a alça para espalhar o líquido sobre o meio e feche imediatamente a placa. Flambar a alça de vidro Espalhar com alça várias experiências, um só lugar
  • 11. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 14 06 17 01 Passo 9 09 Se você for pesquisar a presença de microorganismos em algum objeto, passe-o com cuidado sobre o meio de cultura, como fizemos neste experimento com o dinheiro. Cuidado para que seus dedos não encostem no meio de cultura. Para pesquisar a presença de microorganismos no ar ambiente, basta deixar a placa aberta durante aproximadamente 5 minutos. A placa identificada como controle não receberá qualquer amostra e nem mesmo deverá ser aberta. várias experiências, um só lugar
  • 12. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 0704 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 10 10 Todas as placas devidamente identificadas devem ser deixadas viradas para baixo a temperatura ambiente. várias experiências, um só lugar
  • 13. Ubiquidade de microorganismos Intro 12 100704 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 11 11 Resultados - Observação com 24 horas Placa água de torneira Placa terra Placa ar Placa dinheiro Placa controle Placa água de lago várias experiências, um só lugar
  • 14. Ubiquidade de microorganismos Intro 11 100704 15 02 13 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 12 12 Observação com 48 horas Placa água de torneira 48 horas Placa terra 48 horas Placa ar 48 horas Placa dinheiro 48 horas Placa controle 48 horas Placa água de lago 48 horas várias experiências, um só lugar
  • 15. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 13 13 Observe a diferença entre colônias cremosas e filamentosas As colônias de aspecto cremoso e brilhante são colônias de bactérias. Já as colônias filamentosas apresentam aspecto aveludado e são colônias de fungos. Elas são constituídas fundamentalmente por elementos multicelulares denominados hifas. Colônia cremosa Colônias filamentosas várias experiências, um só lugar
  • 16. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 0906 17 01 Passo 14 14 Observações com 5 dias Placa água de torneira 5 dias Placa terra 5 dias Placa terra 5 dias Placa água de lago 5 dias várias experiências, um só lugar
  • 17. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 0906 17 01 Passo 14 Placa dinheiro 5 dias Placa ar 5 dias Placa dinheiro 5 dias Colônias cremosas (bacterianas) e filamentosas (fúngicas) várias experiências, um só lugar 14
  • 18. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 10070402 13 0805 16 03 14 0906 17 01 Passo 15 15 O que acontece Os microorganismos estão presentes na água (mares, rios, lagos e água subterrânea) no solo, no ar, nos animais (pele, mucosas, tubo digestório), nas plantas e até em ambientes pobres em nutrientes, tais como a água destilada e também em alguns alimentos que consumimos. Em todos esses ambientes os microorganismos têm papel fundamental na manutenção do equilíbrio biológico. Felizmente, a maioria dos microorganismos não faz mal ao homem, porém existem aqueles que são considerados potencialmente patogênicos, que podem causar danos aos hospedeiros. A ubiqüidade dos microorganismos, ou seja, a capacidade de habitar uma gama enorme de ambientes se deve basicamente a três fatores: o tamanho reduzido, que possibilita a dispersão; a variação e flexibilização metabólica, existente no grupo que permite se adaptar rapidamente às condições ambientais; e a sua grande capacidade de transferência horizontal de genes. Transferência gênica horizontal é uma maneira que os microrganismos têm de trocar material gênico. A transferência vertical é a que acontece entre o indivíduo e sua prole (seus “filhos”). Já na transferência horizontal, o organismo recebe um fragmento de DNA ou RNA de outro organismo que não é seu antecedente. Esse processo é importante, pois a aquisição de material gênico aumenta as chances de adaptação do microorganismo a diferentes condições ambientais. Por exemplo, no fragmento de DNA recebido podem existir genes que conferem resistência a algum antibiótico ou a altas temperaturas. Por todos esses motivos é possível observar crescimento de colônias bacterianas e fúngicas em placas inoculadas com amostras de diferentes ambientes. várias experiências, um só lugar
  • 19. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 080503 14 0906 17 01 Passo 16 16 Para saber mais Um pouco de história... Em 1674 o holandês Antony van Leeuwenhoek (1632 - 1723) criou o primeiro protótipo de microscópio. Foi ele quem observou pela primeira vez organismos móveis, não vistos a olho nu, em gotas de água, fezes, material removido dos dentes – os micróbios! Em 1857 o químico francês Louis Pasteur (1822 -1895) mostrou que a presença de organismos microscópicos do ar atmosférico era a fonte da ‘contaminação’ dos meios de cultivo em contato com o ar. Os frascos que não estavam expostos ao ar permaneciam estéreis, enquanto que os expostos, após algum tempo, entravam em putrefação. Ele também desenvolveu o processo de pasteurização para a eliminação de microorganismos. Ao contrário de muitos cientistas do século XIX, o médico alemão Robert Koch (1843 - 1910), acreditava que algumas doenças pudessem ser causadas por microorganismos. Depois de vários estudos, Koch descobriu que o agente causador do carbúnculo (doença que estava dizimando o gado na Europa), era uma bactéria em forma de bastão. Em 1882, ele descobriu o bacilo da tuberculose, denominado de bacilo de Koch. Finalmente, em 1928, é descoberto o primeiro antibiótico, a penicilina, pelo escocês Alexander Fleming (1881 - 1955). Ele observou que, em algumas placas contaminadas com bolor (fungo), as bactérias não cresciam. É que o fungo ali presente (Penicillium notatum) produzia a penicilina, substância capaz de inibir crescimento de outros microorganismos. Desde então, muitas descobertas foram feitas sobre os microorganismos. Hoje em dia nós sabemos que eles são importantes em vários campos da biotecnologia, incluindo a produção de alimentos, o uso de transgênicos na agricultura, e até no controle agroecológico de pragas e doenças várias experiências, um só lugar
  • 20. Ubiquidade de microorganismos Intro 1211 100704 15 02 13 0805 16 03 14 090601 Passo 17 17 Veja também O senhor microscópio várias experiências, um só lugar