Este documento fornece instruções para um experimento de biologia que envolve a preparação de um meio de cultura a partir de batata e repolho, a obtenção de amostras de microrganismos do ambiente, a semeadura dessas amostras no meio de cultura e a observação subsequente do crescimento de colônias microbianas com e sem a adição de um antibiótico.

1. Prática de Biologia - Investigação e observação de microorganismos.
COTUCA – Março/2012
Equipe: (Mesa__________)
Nome :____________________________________RA:_______________
Nome :____________________________________RA:_______________
Nome :____________________________________RA:_______________
Nome :____________________________________RA:_______________
Nome :____________________________________RA:_______________
Etapa 1 – Preparo do meio.
Caldo nutriente de batata e repolho:
Ingredientes:
1 batata;
Repolho roxo (1 prato de sobremesa de repolho roxo desfolhado);
400 mL de água
Em uma panela bem lavada e enxaguada, cozinhe uma batata em pedaços e um prato de sobremesa de
repolho roxo desfolhado em 400 mL de água durante 10 minutos. Reserve o líquido em um recipiente e tampe
para evitar contaminação.
Preparo do meio de cultura:
Ingredientes:
300 mL do caldo nutriente;
1 colher de açúcar;
½ colher de chá de sal de cozinha (cloreto de sódio);
3 envelopes de gelatina em pó incolor.
Coloque 300 mL do caldo nutriente ainda quente em um recipiente e adicione 3 envelopes de gelatina em pó
incolor. Em seguida, acrescente uma colher de chá de açúcar, meia colher de café de sal.
Para a esterilização das placas, lave-as previamente e, após a secagem, passe álcool na superfície interna,
deixe-o evaporar e coloque o meio de cultura. O álcool tem a finalidade de destruir os microrganismos do ar que se
depositaram na placa.
Distribua o meio na placa de petri, evitando que se formem bolhas. Antes de tampar, espere esfriar para que
o vapor não condense na tampa e eventualmente caia sobre o meio, estragando-o. Tampe a placa, vede com fita
adesiva ou papel filme. Deixe em temperatura ambiente.
* Você também pode utilizar frascos de vidro como de maionese ou azeitona para criar uma superfície de
semeadura. Para isso é importante que você esterilize os frascos da mesma forma ensinada anteriormente.
Coloque o meio de cultura, incline um pouco o frasco (entre 30° e 45°) feche os frascos com papel alumínio de
maneira que fiquem vedados.
Esta quantidade de ingredientes é suficiente para quatro a seis placas de petri. Voc~es podem repartir com
os colegas.
Evite conversar durante o preparo do meio de cultura e esteja com as mãos bem lavadas!!!
Etapa 2 - Obtenção de bactérias para a semeadura.
Quaisquer locais do ambiente contem bactérias, porém locais úmidos e sombreados, ricos em matéria
orgânica em decomposição são mais aptos a demonstrarem a sua presença. Por isso, é importante a escolha dos
locais de onde os inóculos serão retirados, devendo ser evitados aqueles de baixa umidade.
Algumas sugestões:
- Suspensão de terra: Colocar +ou- 1g de terra em um copinho de café com um pouco de água. Agite bem e
espere decantar. Em seguida umedeça o cotonete com o sobrenadante.
- Dinheiro; - Boca; - Tábua de carne de madeira;- Corrimão/maçanetas;- Box do banheiro;-
sapatos/meias/pés.
Etapa 3 – Semeadura dos inóculos.
Materiais:
Cotonetes; Meio de cultura

2. Umedeça o cotonete em água antes de passar sobre a superfície escolhida. Abra a placa de petri (ou o frasco)
e delicadamente esfregue (semeie) a superfície do cotonete sobre a superfície do meio de cultura. Feche a placa de
petri e vede com fita adesiva ou papel filme. Coloque na estufa.
Evite conversar durante a semeadura e esteja com as mãos bem lavadas.
Etapa 4 – Colocação do antibiótico.
Traga a placa de petri (e/ou outro(s) fraco(s)) abra com cuidado e coloque delicadamente o disco de
antibiótico disponibilizado pela professora. Tampe novamente a placa e vede com fita adesiva ou papel filme.
Coloque na estufa.
Sugira hipóteses sobre o que acontecerá na sua placa/frasco.
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
Etapa 5 – Observação do crescimento dos microorganismos.
1) Houve crescimento na sua placa? Descreva as colônias que apareceram (cor,tamanho,quantidade,aspecto).
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
2) O meio de cultura estava inicialmente lilás e turvo. Depois do crescimento dos microorganismos a cor mudou?
Explique.
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
3) O que aconteceu ao redor do disco com antibiótico? Explique.
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
4) Por que meios de cultura propiciam o crescimento de microrganismos? Qual o papel da batata e do repolho roxo
no meio?
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________
_______________________________________________________________________