Processos Fermentativos Industriais
•Etanol
•Ácido cítrico
•Antibióticos
•Enzimas
•Fermento biológico
1- ETANOL
1.1 Microrganismos
- Saccharomyces cerevisiae (levedura)
- Zymomonas mobilis (bactéria)
Processos industriais: Saccharomyces cerevisiae
1- ETANOL
1.2 Matérias-primas
Matérias açucaradas
-Cana de açúcar
-Beterraba açucareira
-Sorgo sacarino
-Melaços, mel de abelhas e frutas
Matérias amiláceas e feculentas
-Grãos amiláceos
-Raízes e tubérculos feculentos
Matérias celulósicas
-Palhas
-Madeiras
-Resíduos agrícolas
-Resíduos sulfíticos de fábrica de
papel
1- ETANOL
Necessário obter:
do Amido  glicose
do melaço e caldo de cana  mistura de sacarose, glicose e frutose
1.2.1 Preparo do mosto
1.2.1.1 Mostos de melaços e de caldo de cana
-Melaços diluídos entre 15 e 25º Brix
-Meio rico em sacarose e açúcares redutores
1.2.1.2 Mostos de materiais amiláceos
-Necessário sacarificar (sacarificação)
-Método químico, biológico ou por ação direta de enzimas
Nutrientes necessários: Nitrogênio na forma amoniacal, fósforo,
enxofre na forma de sulfatos, sulfitos ou tiossulfato, potássio, magnésio,
cálcio, sódio e outros elementos em quantidades diminutas
1.3 Condições de Processo
-Inóculo: 10% volume total
-Temperatura: Faixa de 26 a 35 ºC
-pH: Mostos industriais na faixa de 4,5 a 5,5
-Concentração de açúcares: 15 a 25 ºBrix
-Controle de contaminantes: Antibióticos
-Tempo de fermentação: 10 a 12 horas em processos
descontínuos utilizando levedura Saccharomyces cerevisiae
linhagem catanduva1
1- ETANOL
1.4 Sistemas de fermentação
– Fermentação alcoólica descontínua (cortes, reaproveitamento de inóculo (“pé
de cuba”), cultura pura, reciclo de leveduras)
– Fermentação alcoólica contínua
1- ETANOL
1.5 Recuperação do produto
– Destilação contínua
2- ÁCIDO CÍTRICO
2.1 Microrganismo
- Aspergillus niger (fungo filamentoso)
2.2 Matéria-prima
- Depende do processo e utiliza-se: Farelo de trigo, bagaço de laranja, amido
de batata, melaço de beterraba e xarope de cana com 30-35% de açúcar
invertido (mistura de glicose e frutose)
2.3 Sistemas de fermentação
2.3.1 Processo Koji
- Substrato sólido (farelos)
- pH entre 4-5
- Umidade do farelo 70-80%
- Temperatura de 28º C
- O Farelo é distribuído em bandejas com profundidade de 3 a 5 cm
- Tempo de fermentação de 5 a 8 dias
2- ÁCIDO CÍTRICO
2.3.2 Processo em superfície
- Utilizam-se Substratos solúveis (sacarose, melaços de
cana e de beterraba)
- Temperatura de 30 ºC
- pH inicial entre 5 e 6
- O mosto é distribuído em bandejas rasas de alumínio
com alto teor e pureza
- O micélio desenvolve-se sobre a superfície do líquido e
é mantido flutuando durante todo o processo.
- Ar úmido é soprado sobre a superfície do mosto por 5-6
dias passando depois a utilizar ar seco até o final da
fermentação (8-10 dias).
- No final do processo o mosto é drenado e substituído
por outro novo.
2- ÁCIDO CÍTRICO
2.3.2 Processo submerso (mais utilizado)
Exemplo - empresa Cargill
- Utilizam-se Substratos solúveis (melaço de cana)
- Temperatura de 30º C
- pH inicial 4
- O mosto é esterilizado previamente
- Aeração contínua na taxa de 0,5 a 1,15 vvm sem
agitação mecânica
- Tempo de fermentação de 5 a 7 dias
- Sistema descontínuo.
2- ÁCIDO CÍTRICO
2.4 Processo de separação
- Em todos os processos o meio é filtrado previamente
- Precipitação com adição de hidróxido de cálcio
- Citrato é filtrado e tratado com ácido sulfúrico para
precipitar sulfato de cálcio
- O sobrenadante que contém o ácido cítrico é tratado
com carvão ativado
- O ácido cítrico é desmineralizado por diversas vezes
através de colunas com resinas de troca iônica.
- E finalmente é cristalizado por evaporação
2- ÁCIDO CÍTRICO
3.1 Microrganismos
- Bactérias (diferentes de actinomicetos)
Ex. Bacillus brevis – antibiótico a tirotricina; gramicidina
- Actinomicetos (Grupo de bactérias Gram positivas que
apresentam como características em comum a
produção de filamentos ou hifas vegetativas) Ex. Gênero
Streptomyces – antibiótico a estreptomicina
- Fungos
Ex. fungos Penicillium chrysogenum e Penicillium
notatum – Antibiótico a Penicilina e Penicillium
chrysogenum – Antibiótico a ampicilina
3- ANTIBIÓTICOS
3.2 – Métodos de produção
Meio de cultivo: Depende da cepa e geralmente consiste de:
Água de milho, farinha de soja, extrato de levedura ou soro de
leite. Utiliza-se também Glicose ou melaço
- Penicilina G e penicilina V são produzidas por processos
submersos
- Reatores de 40 a 200 m3
- Dificuldade de aeração não permite tanques maiores
- Aeração na faixa de 0,5 a 1,0 vvm
- São usados agitadores tipo turbina na faixa de 120 e 150 rpm
- Temperatura ótima de 25-27 ºC
- pH constante em 6,5
- Inóculo se inicia utilizando esporos liofilizados
- Tempo de fermentação entre 120 e 160 horas
Extração : Utiliza-se um solvente orgânico altamente
hidrofóbico, como o acetato de amila, para separação do
antibiótico do meio de cultivo
3- ANTIBIÓTICOS
4.1 – Microrganismos
- Aplicação comercial: bactérias, fungos filamentosos e leveduras
- Escolha do microrganismo: Produtor da enzima de interesse em
grande quantidade, Estável; Não-patogênico e de Fácil manipulação
Ex. Produção de enzimas extracelulares industriais: Bacillus e
Aspergillus (80-85% do mercado de enzimas extracelulares)
4- ENZIMAS MICROBIANAS
4.2 – Processos de produção
- Tempo de fermentação: 30 a 150 horas - depende do processo utilizado.
- Sistemas de Cultivo:
a) Superfície
- Dificuldades de controle operacional;
- Severos problemas de contaminação
- Vantagens importantes em relação a transferência de oxigênio e
recuperação do produto.
A principal tecnologia de fermentação em superficie é a fermentação em
estado sólido. E é empregada para produzir, em escala comercial,
celulases, amilases fúngicas, pectinases, proteases fúngicas e lipases.
Microrganismo: fungos filamentosos do gênero Aspergillus.
4- ENZIMAS MICROBIANAS
b) Submerso: Descontínuo
- O sistema mais empregado na produção de enzimas.
- Algumas enzimas são relativamente instáveis depois da etapa de
produção.
-Efeito das variáveis operacionais mais relevantes: pH e temperatura
(compromisso entre os valores ótimos para produção e crescimento)
Ex.: Produção de celulase de Trichoderma reesei em meio celulósico
onde o pH ótimo de crescimento é 4,8, enquanto que o ótimo de
produção é 3,5.
Solução: valores intermediários ou alterações programadas de pH
4- ENZIMAS MICROBIANAS
c) Submerso: Descontínuo alimentado
- Fase descontínua seguida de alimentação de forma contínua
ou intermitente até alcançar o volume final de operação
dentro do reator.
-Vantagens: Controlar a velocidade específica de crescimento
do microrganismo; controlar a produção de metabólitos
secundários, metabólitos sujeitos à inibição por alta
concentração de substrato e metabólitos sujeitos a repressão
catabólica por substratos altamente metabolizáveis
Esta situação é aplicável à maioria das enzimas de interesse
comercial.
4- ENZIMAS MICROBIANAS
4.3 – Recuperação do produto
Etapas envolvidas na recuperação e processamento pós fermentação.
4- ENZIMAS MICROBIANAS
4.3 – Recuperação do produto
Etapas de separação e purificação
Finalidade: Remover substâncias tóxicas
OBS.: Para a obtenção de preparação enzimática de uso farmacêutico,
processos mais sofisticados de purificação, como as separações
cromatográficas, são utilizados.
- O caldo é resfriado a 5 ºC com o objetivo de assegurar condições de
estabilidade do produto e evitar crescimento de contaminantes;
- pH ajustado para valor ótimo da atuação da enzima produzida.
Separação das células:
Pode ser feita: centrifugação;filtração.
Fungos – centrifugação;
Bactérias e leveduras – prévia floculação (cloreto de sódio); eficiente; baixo
custo.
- A filtração, como alternativa a centrifugação – utilização de filtros prensa,
filtros rotativos á vácuo
Solução concentrada final – filtração em meio filtrante de celulose –
preparado enzimático líquido – diluído e acondicionado com estabilizantes
da atividade enzimática – embalado para comercialização.
4- ENZIMAS MICROBIANAS
5.1 – Microrganismos
O que é fermento biológico?
Fermento biológico ou levedura de panificação é um microorganismo
vivo cuja denominação científica é Saccharomyces cerevisiae
5- FERMENTO BIOLÓGICO
O fermento biológico promove o
crescimento das massas de pães,
bolos, etc., através da fermentação
que ocorre antes do forneamento. A
levedura “ingere” os nutrientes da
massa e, como consequência, libera
gases e substâncias aromáticas,
responsáveis pelo volume, textura,
aroma e sabor característicos dos
produtos alimentícios.
5.2 – Processo de produção
- Melaço de cana é o substrato usado atualmente nos processos
modernos
- Sistema descontínuo alimentado: Evita-se a repressão catabólica
cultivando a levedura com baixas concentrações de glicose.
- Produção de leveduras para panificação ocorre entre 3 a 4 horas.
- Biotina é necessário quando na presença de oxigênio (suplemento)
- pH inicial 4,5
- Temperatura de 30 ºC
- Aeração controlada
Produção de 50 g de levedura seca para cada 100 g de
sacarose
5- FERMENTO BIOLÓGICO

curso de açucar e alcool Fermentação.ppt

  • 1.
    Processos Fermentativos Industriais •Etanol •Ácidocítrico •Antibióticos •Enzimas •Fermento biológico
  • 2.
    1- ETANOL 1.1 Microrganismos -Saccharomyces cerevisiae (levedura) - Zymomonas mobilis (bactéria) Processos industriais: Saccharomyces cerevisiae
  • 3.
    1- ETANOL 1.2 Matérias-primas Matériasaçucaradas -Cana de açúcar -Beterraba açucareira -Sorgo sacarino -Melaços, mel de abelhas e frutas Matérias amiláceas e feculentas -Grãos amiláceos -Raízes e tubérculos feculentos Matérias celulósicas -Palhas -Madeiras -Resíduos agrícolas -Resíduos sulfíticos de fábrica de papel
  • 4.
    1- ETANOL Necessário obter: doAmido  glicose do melaço e caldo de cana  mistura de sacarose, glicose e frutose 1.2.1 Preparo do mosto 1.2.1.1 Mostos de melaços e de caldo de cana -Melaços diluídos entre 15 e 25º Brix -Meio rico em sacarose e açúcares redutores 1.2.1.2 Mostos de materiais amiláceos -Necessário sacarificar (sacarificação) -Método químico, biológico ou por ação direta de enzimas Nutrientes necessários: Nitrogênio na forma amoniacal, fósforo, enxofre na forma de sulfatos, sulfitos ou tiossulfato, potássio, magnésio, cálcio, sódio e outros elementos em quantidades diminutas
  • 5.
    1.3 Condições deProcesso -Inóculo: 10% volume total -Temperatura: Faixa de 26 a 35 ºC -pH: Mostos industriais na faixa de 4,5 a 5,5 -Concentração de açúcares: 15 a 25 ºBrix -Controle de contaminantes: Antibióticos -Tempo de fermentação: 10 a 12 horas em processos descontínuos utilizando levedura Saccharomyces cerevisiae linhagem catanduva1 1- ETANOL
  • 6.
    1.4 Sistemas defermentação – Fermentação alcoólica descontínua (cortes, reaproveitamento de inóculo (“pé de cuba”), cultura pura, reciclo de leveduras) – Fermentação alcoólica contínua 1- ETANOL 1.5 Recuperação do produto – Destilação contínua
  • 7.
    2- ÁCIDO CÍTRICO 2.1Microrganismo - Aspergillus niger (fungo filamentoso) 2.2 Matéria-prima - Depende do processo e utiliza-se: Farelo de trigo, bagaço de laranja, amido de batata, melaço de beterraba e xarope de cana com 30-35% de açúcar invertido (mistura de glicose e frutose)
  • 8.
    2.3 Sistemas defermentação 2.3.1 Processo Koji - Substrato sólido (farelos) - pH entre 4-5 - Umidade do farelo 70-80% - Temperatura de 28º C - O Farelo é distribuído em bandejas com profundidade de 3 a 5 cm - Tempo de fermentação de 5 a 8 dias 2- ÁCIDO CÍTRICO
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    2.3.2 Processo emsuperfície - Utilizam-se Substratos solúveis (sacarose, melaços de cana e de beterraba) - Temperatura de 30 ºC - pH inicial entre 5 e 6 - O mosto é distribuído em bandejas rasas de alumínio com alto teor e pureza - O micélio desenvolve-se sobre a superfície do líquido e é mantido flutuando durante todo o processo. - Ar úmido é soprado sobre a superfície do mosto por 5-6 dias passando depois a utilizar ar seco até o final da fermentação (8-10 dias). - No final do processo o mosto é drenado e substituído por outro novo. 2- ÁCIDO CÍTRICO
  • 10.
    2.3.2 Processo submerso(mais utilizado) Exemplo - empresa Cargill - Utilizam-se Substratos solúveis (melaço de cana) - Temperatura de 30º C - pH inicial 4 - O mosto é esterilizado previamente - Aeração contínua na taxa de 0,5 a 1,15 vvm sem agitação mecânica - Tempo de fermentação de 5 a 7 dias - Sistema descontínuo. 2- ÁCIDO CÍTRICO
  • 11.
    2.4 Processo deseparação - Em todos os processos o meio é filtrado previamente - Precipitação com adição de hidróxido de cálcio - Citrato é filtrado e tratado com ácido sulfúrico para precipitar sulfato de cálcio - O sobrenadante que contém o ácido cítrico é tratado com carvão ativado - O ácido cítrico é desmineralizado por diversas vezes através de colunas com resinas de troca iônica. - E finalmente é cristalizado por evaporação 2- ÁCIDO CÍTRICO
  • 12.
    3.1 Microrganismos - Bactérias(diferentes de actinomicetos) Ex. Bacillus brevis – antibiótico a tirotricina; gramicidina - Actinomicetos (Grupo de bactérias Gram positivas que apresentam como características em comum a produção de filamentos ou hifas vegetativas) Ex. Gênero Streptomyces – antibiótico a estreptomicina - Fungos Ex. fungos Penicillium chrysogenum e Penicillium notatum – Antibiótico a Penicilina e Penicillium chrysogenum – Antibiótico a ampicilina 3- ANTIBIÓTICOS
  • 13.
    3.2 – Métodosde produção Meio de cultivo: Depende da cepa e geralmente consiste de: Água de milho, farinha de soja, extrato de levedura ou soro de leite. Utiliza-se também Glicose ou melaço - Penicilina G e penicilina V são produzidas por processos submersos - Reatores de 40 a 200 m3 - Dificuldade de aeração não permite tanques maiores - Aeração na faixa de 0,5 a 1,0 vvm - São usados agitadores tipo turbina na faixa de 120 e 150 rpm - Temperatura ótima de 25-27 ºC - pH constante em 6,5 - Inóculo se inicia utilizando esporos liofilizados - Tempo de fermentação entre 120 e 160 horas Extração : Utiliza-se um solvente orgânico altamente hidrofóbico, como o acetato de amila, para separação do antibiótico do meio de cultivo 3- ANTIBIÓTICOS
  • 14.
    4.1 – Microrganismos -Aplicação comercial: bactérias, fungos filamentosos e leveduras - Escolha do microrganismo: Produtor da enzima de interesse em grande quantidade, Estável; Não-patogênico e de Fácil manipulação Ex. Produção de enzimas extracelulares industriais: Bacillus e Aspergillus (80-85% do mercado de enzimas extracelulares) 4- ENZIMAS MICROBIANAS
  • 15.
    4.2 – Processosde produção - Tempo de fermentação: 30 a 150 horas - depende do processo utilizado. - Sistemas de Cultivo: a) Superfície - Dificuldades de controle operacional; - Severos problemas de contaminação - Vantagens importantes em relação a transferência de oxigênio e recuperação do produto. A principal tecnologia de fermentação em superficie é a fermentação em estado sólido. E é empregada para produzir, em escala comercial, celulases, amilases fúngicas, pectinases, proteases fúngicas e lipases. Microrganismo: fungos filamentosos do gênero Aspergillus. 4- ENZIMAS MICROBIANAS
  • 16.
    b) Submerso: Descontínuo -O sistema mais empregado na produção de enzimas. - Algumas enzimas são relativamente instáveis depois da etapa de produção. -Efeito das variáveis operacionais mais relevantes: pH e temperatura (compromisso entre os valores ótimos para produção e crescimento) Ex.: Produção de celulase de Trichoderma reesei em meio celulósico onde o pH ótimo de crescimento é 4,8, enquanto que o ótimo de produção é 3,5. Solução: valores intermediários ou alterações programadas de pH 4- ENZIMAS MICROBIANAS
  • 17.
    c) Submerso: Descontínuoalimentado - Fase descontínua seguida de alimentação de forma contínua ou intermitente até alcançar o volume final de operação dentro do reator. -Vantagens: Controlar a velocidade específica de crescimento do microrganismo; controlar a produção de metabólitos secundários, metabólitos sujeitos à inibição por alta concentração de substrato e metabólitos sujeitos a repressão catabólica por substratos altamente metabolizáveis Esta situação é aplicável à maioria das enzimas de interesse comercial. 4- ENZIMAS MICROBIANAS
  • 18.
    4.3 – Recuperaçãodo produto Etapas envolvidas na recuperação e processamento pós fermentação. 4- ENZIMAS MICROBIANAS
  • 19.
    4.3 – Recuperaçãodo produto Etapas de separação e purificação Finalidade: Remover substâncias tóxicas OBS.: Para a obtenção de preparação enzimática de uso farmacêutico, processos mais sofisticados de purificação, como as separações cromatográficas, são utilizados. - O caldo é resfriado a 5 ºC com o objetivo de assegurar condições de estabilidade do produto e evitar crescimento de contaminantes; - pH ajustado para valor ótimo da atuação da enzima produzida. Separação das células: Pode ser feita: centrifugação;filtração. Fungos – centrifugação; Bactérias e leveduras – prévia floculação (cloreto de sódio); eficiente; baixo custo. - A filtração, como alternativa a centrifugação – utilização de filtros prensa, filtros rotativos á vácuo Solução concentrada final – filtração em meio filtrante de celulose – preparado enzimático líquido – diluído e acondicionado com estabilizantes da atividade enzimática – embalado para comercialização. 4- ENZIMAS MICROBIANAS
  • 20.
    5.1 – Microrganismos Oque é fermento biológico? Fermento biológico ou levedura de panificação é um microorganismo vivo cuja denominação científica é Saccharomyces cerevisiae 5- FERMENTO BIOLÓGICO O fermento biológico promove o crescimento das massas de pães, bolos, etc., através da fermentação que ocorre antes do forneamento. A levedura “ingere” os nutrientes da massa e, como consequência, libera gases e substâncias aromáticas, responsáveis pelo volume, textura, aroma e sabor característicos dos produtos alimentícios.
  • 21.
    5.2 – Processode produção - Melaço de cana é o substrato usado atualmente nos processos modernos - Sistema descontínuo alimentado: Evita-se a repressão catabólica cultivando a levedura com baixas concentrações de glicose. - Produção de leveduras para panificação ocorre entre 3 a 4 horas. - Biotina é necessário quando na presença de oxigênio (suplemento) - pH inicial 4,5 - Temperatura de 30 ºC - Aeração controlada Produção de 50 g de levedura seca para cada 100 g de sacarose 5- FERMENTO BIOLÓGICO