O documento descreve um estudo que quantificou e identificou espécies de Candida na cavidade oral de crianças entre 2 e 4 anos. A Candida albicans foi a espécie predominante em todas as idades, representando 70% dos isolados em crianças de 2 anos, 70,44% em crianças de 3 anos e 95,15% em crianças de 4 anos. O estudo coletou amostras da cavidade oral de crianças e realizou testes para isolar e identificar espécies de Candida presentes.

1. UNIVERSIDADE REGIONAL INTEGRADA DO ALTO
URUGUAI E DAS MISSÕES
QUANTIFICAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE CANDIDA NA
CAVIDADE ORAL DE CRIANÇAS
Autores: Ellen D. Dal Vesco, Bruna Ricci, Géssica A. costa,
Iliane R.D. Lamonato, Nádia Oliveira e Sideney Onofre, 2011
Acadêmicas: Carla Bernardo Chagas, Lucieli Cibulski, Miriam Dartora,
Nessana Hollerwerger e Vanessa Sandri
Professora: Ms. Neiva Aparecida Grazziotin

2. Candida
O gênero Candida
compreende um grupo
de leveduras
encontrado em diversos
ecossistemas, inclusive
na microbiota residente
de humanos e animais.
Filo dos deuteromycota

3. Espécies de Candida
• Candida albicans
• Candida tropicalis
• Candida krusei
• Candida parapsilosis
• Candida glabrata
• Candida dubliniensis

4. • A microbiota bacteriana das
membranas mucosas no trato
geniturinário e na boca
geralmente ajuda a suprimir o
crescimento de fungos como a
Candida albicans.
• A morfologia desses
microrganismos não é sempre
leveduriforme, podendo apresentar
formações de pseudo-hífas, que
são células alongadas semelhantes
as hifas. Nessa forma, a Candida é
resistente à fagocitose, o que pode
ser um fator importante na sua
patogenicidade.

5. Patógenos Oportunistas
• Quando os antibióticos suprimem a microbiota normal, os
fungos podem ser capazes de crescer sobre o tecido
mucoso.
• Mudanças no pH normal das mucosas também geram um
efeito similar.
• Quando ocorre o crescimento exagerado de C. albicans,a
infecção é chamada de candidíase.
• Assim, sempre que há o enfraquecimento do nosso sistema
imunitário, a candida pode sair do seu estado latente e dar
origem a infecções oportunistas. Estas que se manifestam
clinicamente por lesões superficiais da pele e mucosas, ou,
mesmo, sobre determinadas circunstâncias, como
candidoses disseminadas, muitas vezes severas ou letais.

6. • Nas mulheres particularmente sensíveis, o uso de pílulas contraceptivas com
estrogênio e progesterona, é por vezes o suficiente para causar uma alteração da
flora bacteriana vaginal o que leva ao aparecimento da candidíase.
• Outras causas de candidíase podem ser atribuídas:
Uso de
medicamentos
corticoesteróides
de inalação
Quimioterapia
Alcoolismo
Tabaco
Stress
Poluição
Uso de
medicamentos
imunosupressores
Denças
autoimunes
Distúrbio
endócrinos
Deficiências
vitamínicas
Gravidez e
contraceptivos

8. • Pessoas imunossuprimidas, incluindo pacientes com
Aids, são propensas às infecções por Candida na pele e
nas membranas mucosas.
• Em pessoas obesas ou com diabetes, as áreas da pele
naturalmente mais úmidas tendem a se tornar
infectadas por esse fungo. As áreas infectadas tornam-se
de cor vermelho vivo, com lesões nas bordas
Transmissão
• A transmissão da candidíase se dá pelo contato com
secreções da boca, pele e vagina e dejetos de pessoas
contaminadas. Além disso, a mãe pode transmitir este
fungo para o bebê durante o parto.

9. Tipos de Candidíase
Basicamente são cinco:
1. Dermatoide
Ocorre na pele, em partes como a virilha, as axilas, os
dedos, ao redor do ânus, debaixo do seio, no umbigo e
no interior das coxas.
Sintomas: erupções, vermelhidão, descamação e
coceira.
2. Candidíase genital
Ocorre na vagina (candidíase vulvovaginal).
Sintomas: irritação, coceira intensa, vermelhidão,
micção frequente, dor e queimação ao urinar,
desconforto e dor durante a penetração, corrimento
coalhado e amarelo, irritação na vulva.
No caso dos homens, alguns não têm sintomas,
enquanto outros têm manchas vermelhas no pênis,
edema leve, lesões em forma de de pontos, coceira,
corrimento branco ou amarelado na uretra e um leve
incômodo após o ato sexual.

10. A candidíase, especialmente a candidíase vaginal, é uma das
causas mais frequentes de infecção genital.
É provável que os hormônios sejam um fator; pois a candida é
muito menos comum em meninas antes da puberdade ou em
mulheres após a menopausa
 Metade das mulheres universitárias terá tido pelo menos um
episódio diagnosticado até chegar aos 25 anos.
 Cerca de 75% das mulheres já vivenciaram um episódio
 As lesões podem estender-se pelo períneo, região perianal e
inguinal.
Não é uma doença de transmissão exclusivamente sexual .

11. • 3. Candidíase intestinal
Sintomas: cansaço constante, mudança
repentina de humor, irritação, prisão de ventre,
fezes inconsistentes, dor de cabeça, nos
músculos e no abdome e acne em adultos.
Como os sintomas são múltiplos, dificilmente
os médicos conseguem diagnosticar a doença.
• 4. Candidíase sanguínea ou interna
Se a candidíase se tornar sistêmica, o que
pode no caso de pacientes imunossuprimidos,
uma doença fulminante ( que surge súbita e
intensamente) e morte podem resultar. Comum
em UTIs e acomete vários órgãos.
• Candidíase é considerada a principal infecção
micótica em ambiente nosocomial.

12. 5. Candidíase oral (ou sapinho)
 Recém-nascidos, cuja microbiota
normal ainda não se estabeleceu,
frequentemente apresentam uma
camada esbranquiçada na
cavidade oral.
Em adultos, é um caso mais sério.
Aparece como placas
esbranquiçadas na boca, na língua
e às vezes no céu da boca.
Outra apresentação clínica é a
forma atrófica, que se apresenta
como placas vermelhas, lisas,
sobre o palato duro ou mole.

13. Diagnóstico e Tratamento
• Identificação microscópica do fungo em
raspados das lesões
• Isolamento do fungo em cultura
• Clotrimazol e miconazol
• Fluconazol ou outro antifúngico azólico
• Drogas antifúngicas da nova classe das
equinocadinas, como micafungina

14. QUANTIFICAÇÃO E IDENTIFICAÇÃO DE
CANDIDA NA CAVIDADE ORAL DE
CRIANÇAS
• Aproximadamente metade da população adulta
saudável abriga as espécies de Candida na
cavidade bucal, sendo a superfícies mucosas
consideradas o reservatório principal.
• Elas podem ser encontradas também no biofilme
dental ou coagregadas a espécies bacterianas ai
presentes, ou mesmo aderindo-se diretamente à
película salivar.
• Os biofilmes contendo C. albicans podem ser
importantes para manifestação de candidoses
mucosas e para o processo de colonização, tanto
de cavidades de caries como de bolsas
periodontais.

15. • Para diversos autores, a presença desses fungos
em áreas subgengivais pode contribuir para a
patogênese da doença periodontal, bem como
determinar o risco aumentado de candidose
sistêmica, em casos de depressão imune.
• A candidose é considerada a mais frequente
infecção fúngica bucal e C. albicans é a principal
espécie relacionada, embora outras espécies como
C. tropicalis, C.parapsilosis, C. glabrata, C. krusei e
C. dubliniensis, dentre outras, também ocorram.
• Para colonizar, infectar e evadir-se das defesas do
hospedeiro, C . albicans possui um repertório de
virulência, que inclui uma variedade de enzimas,
cujos principais representantes são as proteínas
aspartil secretadas (Saps) e as fosfolipases.

16. Identificação de Candida spp.
• Os métodos disponíveis para a identificação de espécies de Candida são
numerosos, e a escolha de um deles é determinada:
• pelo nível de identificação requerida;
• aspectos clínicos;
• numero total de amostras examinadas rotineiramente;
• e recursos disponíveis no laboratório.
Alem de identificação e caracterização, estes testes permitem avaliar o
potencial de virulência, de produção de enzimas e metabólitos.
 Pode ser realizada uma análise fenotípica dos caracteres morfológicos e
fisiológicos exibidos pelas cepas.
 Os meios cromogênicos, kits comerciais e caracterização dos fungos por
análise de DNA, tem permitido um aprimoramento na identificação e
caracterização desses microrganismos, auxiliando a esclarecer o papel
desempenhado por diferentes espécies e subespécies de Candida na
colonização de diferentes grupos populacionais , bem como fatores de
risco associados à manifestação de infecção.

17. •
• A maioria das leveduras cresce bem em
temperaturas entre 30⁰ e 37 ⁰C, quando
cultivadas em meios de cultura artificiais.
• Entre as espécies do gênero Candida, as
temperaturas de encubação que permitem
crescimento satisfatório podem variar entre
20 ⁰ e 38 ⁰C, sendo ideal entre 25 ⁰ e 28 ⁰C.
• A capacidade de crescimento em
temperaturas elevadas é características de
algumas espécies, sendo uma das provas
utilizadas para diferenciação entre a
Candida albicans e C. dubliniensis as quais
compartilham diversas características
morfológicas e fisiológicas, o que dificulta a
identificação diferencial entre estas duas
espécies.

18. • Devido ao relevante papel que as espécies
de Candida desempenham na ecologia da
cavidade bucal, e a importância de estudos
sobre a distribuição dessas leveduras em
diferentes grupos populacionais, faixas
etárias, na elaboração de estratégias para
prevenção de candidoses, é que o estudo
teve como objetivo isolar e identificar as
leveduras presentes na cavidade oral de
crianças entre 2 e 4 anos de idade.

19. Materiais e métodos
• Local de realização: laboratório de
microbiologia da Universidade Paranaense,
Campus de Francisco Beltrão.
• O artigo identificou Candida ssp. em material
coletado na cavidade oral de crianças com
idade de 2 a 4 anos, que frequentam a
Creche Municipal da Cidade de Francisco
Beltrão, PR.

20. Coleta das amostras
• Os grupos de levantamento para
cada idade, foram formados por 10
crianças, sendo as coletas
realizadas com o auxilio de swab
estéril, umedecidos em água
peptonada, os quais foram
friccionados na mucosa da cavidade
oral das crianças, dando ênfase a
região periodental. Posteriormente,
este material foi armazenado em
tubos estéreis e transportado ao
Laboratório de Microbiologia, para a
quantificação e identificação.

21. Isolamento
• O material foi semeado em placa contendo
meio de cultivo cromogênico, apropriado para
isolamento e identificação das leveduras do
gênero Candida, fornecido pela Himedia do
Brasil.
• A semeadura foi realizada através de
inoculação por esgotamento do swab na placa
de Petri contendo o meio de cultura.
• Posteriormente, essas placas foram
incubadas a 36°C por uma semana, avaliada
periodicamente após o terceiro dia.
• Após esse período de incubação foi realizada
a contagem das colônias levando-se em
consideração as características morfológicas
de cada uma delas.

22. Identificação das cepas de candida
• A leitura das placas e a interpretação dos
resultados foram realizados pela observação
da morfologia e da pigmentação das
colônias, sendo que a metodologia
preconizada indica que a espécie Candida
albicans apresenta coloração verde, a
espécie Candida tropicalis coloração azul, a
Candida krusei com coloração rosa e a
espécie de Candida glabrata aparece com
coloração violeta.

23. Resultado e discussão
As coletas foram realizadas em grupos com 10
crianças com 2, 3 e 4 anos, a cada vinte dias
era realizada uma nova coleta com esse
mesmo grupo até completar as três vezes
propostas.

24. Tabela de resultados:
Número de colônias de Candida sp.
Identificadas na cavidade bucal de crianças de
2 a 4 anos
Idade Dados C. albicans C. tropicalis C. glabrata C. krusei
2 anos Total 1.579±345aA 383±42bA 265±36bA 28±11cB
(%) 70,00aB 16,99bA 11,77bA 1,24cB
3 anos Total 932±213aB 183±45bB 66±22cB 142±26bA
(%) 70,44aB 13,85bA 4,98c 10,73bA
4 anos Total 962±321aB 47±21bC 2,00±5cC 00
(%) 95,15aA 4,65bB 0,20cC 00

25. Percebe-se na tabela que a espécie de
levedura que predominou foi a Candida
albicans em crianças de 2, 3 e 4 anos de
idade. Sendo em crianças de 2 anos um
índice de 70% de 1.579 colônias isoladas,
nas crianças com 3 anos observou-se a
presença de 70,44% das 932 colônias e
nas crianças de 4 anos das 962 colônias
isoladas foram identificadas como
Candida albicans 95,15%.

26. • A maior frequência da Candida albicans foi observada
em crianças de 2 anos de idade seguindo as de 4 e as
de 3 anos.
• As espécies de Candida tropicalis e Candida glabrata
foram mais frequentes nas crianças de 2 seguindo as de
3 e 4 anos de idade.
• A Candida krusei desenvolveu-se em menor quantidade
em relação as outras com maior frequência nas crianças
de 3 anos depois crianças de 2 anos e houve ausência
nas crianças de 4 anos de idade.
• Os resultados obtidos contribuem para o estudo da
candidose sugerindo que as espécies isoladas são as
responsáveis pelas infecções fúngicas na cavidade
bucal humana.

27. O meio cromogênico é muito útil na
constatação de leveduras em material
biológico contendo cultura mista de
Candidas, onde o ágar sabouraud não
permite a diferenciação,assim, esse
método pode ser utilizado para
diagnosticar infecções causadas por
leveduras de Candida favorecendo um
tratamento precoce e adequado.

28. Conclusão
Constatou-se que em 2.256 colônias
isoladas a Candida albicans foi a mais
frequente com 70%, 70,44% e 95,15%
seguido pela Candida tropicalis com
16,99%, 13,85% e 4,65% e Candida
glabrata com 11,77%, 4,98% e 0,20%
respectivamente para 2, 3 e 4 anos de
idade.

29. • Já a Candida krusei foi a de menor frequência
com 1,24% e 10,73% nas crianças de 2 e 3
anos, nas crianças de 4 anos não foi possível
verificar a presença dessa espécie.
• As crianças com 2 anos foram as que
apresentaram maior número de colônias de
Candidas e as de 4 anos foram as que menos
apresentaram esse microrganismo.

30. • Obrigada pela atenção!