provas bacteriana

1. Prova de Catalase:
• A catalase protege as bactérias dos ataques
com superoxidantes produzido como
defesa pelos leucócitos.
• A catalase transforma o peróxido de
hidrogênio em água e oxigênio inofensivo
• Peróxido de Hidrogênio é encontrado na
“água oxigenada” que é usada como
asséptico
Como fazer a prova de catalase?
1- Em duas lâminas colocamos as amostradas
da bactéria isolada
2- Pinga sobre a amostra uma gota de
peróxido de hidrogênio 3%
3- Observar a produção da liberação de O2
com formação de bolhas
4- Se apresentar bolhas é positivo para
Staphylococcus sp.
Prova de Coagulase:
• A coagulase é uma enzima exclusiva da
Staphylococcus aureos
• É uma enzima que possui a capacidade de
coagular o plasma sanguíneo.
Como é feito:
1- Em dois tubos de ensaio colocamos o
plasma junto com um caldo BHI com a
bactéria já crescida
2- Verificamos se há formação de coagulo
3- Caso apresente coagulo é positivo para
Staphylococcus aureos
Prova da DNAse:
• É um teste utilizado para a
diferenciação de microrganismo com
base na atividade da desorribonuclease
(DNAse)
• É um teste que duas espécies de
bactéria positiva: Staphylococcus
aureos e Streptococcus pyogenes
Como é feito:
1- semear uma colônia da bactéria em ágar
DNAse e incubar a 35° por 24H
2- no momento da leitura adicionamos HCL
sobre a placa
3- 30seg. após observamos a formação de um
halo claro ao redor da colônia
4- Se criou o halo positivo para
Staphylococcus aureos ou Streptococcus
pyogenes, então para saber qual é devemos
fazer a prova de coagulase.
Prova PYR test.:
• É um teste que determina a atividade
da enzima pyrrolidonil arilamidase que
é produzida pela S. pyogenes
Como é feita:
1- Pegamos um disco de PYR, umedecemos
com água destilada estéril
2- Colocamos esse disco em cima da lâmina
com a bactéria recém isolada ou então na
placa de petri
3- Aguardamos 5 mint. e colocamos uma gota
do reagente PYR
4- PYR positivo: aparece uma cor vermelho-
cereja, positivando para S. pyogenes
PYR negativo: aparece uma cor amarela ou
alaranjada
Teste da Bacitracina:
• O teste tem finalidade de diferenciar S.
pyogenes de outras cepas
Como é feito:
1- Um disco de bacitracina é aplicado em uma
placa com ágar sangue, com colônias puras
de Streptococcus spp.
2- A presença de qualquer halo de inibição ao
redor do disco é interpretada como
sensibilidade a bacitracina e positivo para
pyogenes.
3- Se não aparecer o halo é resistente a
bacitracina indicando S. agalactie.
Provas Bioquímicas
Bacteriologia Clínica

2. Prova CAMP:
• O teste visa a identificação de cepas de
S. agalactie
• No teste CAMP o S. agalactie só reage
com a presença do S. aureos.
Como é feito:
1- Semeia a Staphylococcus aureos
ATCC25923 de uma ponta a outra da placa
de ágar sangue
2- Semear a colônia de Streptococcus B-
hemolítico sem que haja o contato com
estria de S. aureos
3- Se houver uma seta ou uma meia lua indica
que o teste é positivo e indica S. agalactie
4- Se não apresentar seta ou meia lua o teste
é negativo para S. agalactie
Prova Bili Esculina:
A prova Bili esculina baseia-se na hidrólise de
esculina em presença de bili por determinadas
bactérias.
Como é feita:
1- Prepara um inóculo da bactéria a ser
testada no meio de bili esculina para
observar a hidrólise do ágar.
2- Se o meio não ficar escuro, significa que
não houve crescimento e dessa forma
confirma o S. agalactie.
3- Se houver o crescimento o meio se torna
escuro então é indicativo de enterococcus
ou de outra espécie de Streptococcus.
Prova de Optoquina:
• É um teste para observar a
sensibilidade das bactérias
Como é feita:
1- Adiciona discos de Optoquina na placa com
ágar sangue semeado com a bactéria que
queremos identificar
2- Se apresentar um halo significa positivo
para S. pneumoniae, pois esse tipo de
bactéria é sensível a Optoquina
Prova NaCl:
Capacidade do microrganismo crescer em altas
concentrações de sal
Como é feita:
1- Inocula a colônia a ser testada de caldo BHI
suplementado com NaCl
2- Faz a inoculação
3- Observa se a turvação ou mudança de cor,
se houver é indicativo o crescimento de
enterococcus.