O documento discute técnicas de análise microbiológica, incluindo a nutrição microbiana, classificação de meios de cultura, e importância do metabolismo microbiano. Ele explica que microrganismos têm requisitos nutricionais diversos e compartilham necessidades básicas de carbono, nitrogênio e água. Também descreve como meios seletivos e diferenciais podem ser usados para cultivar e identificar microrganismos específicos.

1. Prof. Dr Manoel Garcia Jr.
Técnicas de análise
microbiológicas

2. Nutrição Microbiana
• Nutrição: Fornecimento de substâncias nutritivas para o
crescimento bacteriano (Energia e Matéria Plástica)
• Cultura: Propagação do microrganismo em condições
adequadas (Exigências Nutricionais e Ambientais)

3. Nutrição Microbiana
• De todos os organismos vivos, os microrganismos são os mais
versáteis e diversificados em suas exigências nutricionais.
• Alguns são tão exigentes quanto o homem e outros animais.
• Todos os organismos vivos compartilham algumas
necessidades nutricionais em comum:
o Carbono
o Nitrogênio
o Água

4. Classificação dos meios de Cultura
•Estado Físico
Líquido
(Turvação do meio)
Sólido
(1,5 a 2,0%) (Colônias)
Semi-Sólido (0,5%)
(Movimento)

5. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
Agar Sangue
Agar Chocolate
Lowenstein -Jensen

6. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
(Seletivos)
Agar MacConkey
Agar Manitol Sal
Agar Bacillus cereus

7. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
(Seletivos)
Eosin Methilen Blue (EMB)
Oxoid Chromogenic Listeria Agar (OCLA)

8. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
Agar Sangue Padrão de Hemólise Agar Sangue

9. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
(Seletivos)
Agar MacConkey
(Fermentação da Lactose) Agar Salmonella Shigella

10. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
Agar Tríplice Açucar Ferro (TSI) Agar Xilose Lisina Desoxicolato (XLD)

11. Classificação dos meios de Cultura
•Enriquecimento
Caldo Lactosado
Caldo Tetrationato

12. Preparo de meios de Cultura

13. Importância do Metabolismo
• Avaliar a diversidade e versatilidade bioquímica
• Relação microrganismos e doenças
• Papel dos microrganismos na natureza
• Explorar os microrganismos economicamente
• Cultivo, crescimento e controle dos meios.
• Controle dos processos de deterioração de materiais
• Reciclagem da matéria

14. Visão Geral do Metabolismo
Crescimento bacteriano

15. Alguns pesquisadores dividem a história da Microbiologia em Eras:
5000 a.C.
Era dos
MMR

16. A partir da Era do Cultivo, as primeiras culturas bacterianas eram
realizadas APENAS em meio SÓLIDO e, desde então, descrever a aparência das
colônias vem sendo uma importante ferramenta na microbiologia.

17. A morfologia é influenciada PELO TIPO DO MEIO E PELAS CONDIÇÕES
DE CRESCIMENTO, cuidados devem ser tomados antes de descrever os
parâmetros. Uma boa determinação da morfologia das colônias depende de
uma boa semeadura pois necessita-se que as colônias sejam bem separadas.

18. FORMA CIRCULAR
MARGEM INTEIRA
ELEVAÇÃO CONVEXA
Serratia marcescens Staphylococcus aureus

19. FORMA IRREGULAR
ELEVAÇÃO PLANA
MARGEM ONDULADA
FORMA FILAMENTOSA
ELEVAÇÃO PAPILADA
MARGEM FILAMENTOSA
Mycobacterium smegmatis Streptomyces albus

20. FORMA CIRCULAR
ELEVAÇÃO PAPILADA
MARGEM INTEIRA
FORMA IRREGULAR
ELEVAÇÃO PLANA
MARGEM LOBULADA
Pasteurella multocida Isolado desconhecido

21. FORMA RIZOIDE
ELEVAÇÃO PLANA
MARGEM FILAMENTOSA
FORMA CIRCULAR
ELEVAÇÃO PLANA
Nocardia asteroides Pseudomonas aeruginosa

22. FORMA CIRCULAR
ELEVAÇÃO CONVEXA
MARGEM INTEIRA
Streptococcus salivarius Streptomyces albus

23. R =(C x c x d)/r
• R = Resultado
• C = número de colônias contadas
• c = número de colônias confirmadas
• r = número de colônias repicadas
• d = diluição utilizada
Resultado final= Rt (colônias típicas) + Ra (colônias atípicas)

24. Diluição 10-2 = 30 colônias contadas, das quais 20 eram típicas e 10 atípicas.
• Para confirmação, foram repicadas 5 colônias de cada tipo.
• Quatro colônias típicas e duas atípicas apresentaram resultado positivo nos testes
confirmativos.
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias típicas:
• RT = ?
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias atípicas:
• RA = ?
• O resultado final será igual à soma das colônias típicas e atípicas confirmadas:
• Resultado final = RT + RA = ????????????? UFC/g ou mL.
Ex:

25. Diluição 10-2 = 30 colônias contadas, das quais 20 eram típicas e 10 atípicas.
• Para confirmação, foram repicadas 5 colônias de cada tipo.
• Quatro colônias típicas e duas atípicas apresentaram resultado positivo nos testes
confirmativos.
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias típicas:
• RT = 20 x 4 x 100/5 = 1.600
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias atípicas:
• RA = 10 x 2 x 100/5 = 400
• O resultado final será igual à soma das colônias típicas e atípicas confirmadas:
• Resultado final = RT + RA = 1600 + 400 = 2000 = 2,0 x 103 UFC/g ou mL.
Ex: