apresentação sobre testes laboratoriais aplicados a imnologia

1. TÉCNICAS SOROLÓGICAS
Princípios de imunodiagnóstico e
Prof.Kaylanne Alves

3. TUBOS DE COLETA

4. SORO X PLASMA
Soro
É a parte líquida do sangue que permanece após a coagulação, não contém
fibrinogênio e nem outras proteínas que fazem parte do processo de
coagulação. Na imunologia é utilizado para identificar presença de
anticorpos ou antígenos específicos.
Plasma
É a parte líquida do sangue com todos os seus componentes, incluindo os de
coagulação. É usado para analisar proteínas, ccarga viral, albumina e outros
exames bioquímicos.

6. AMOSTRAS PARA TESTES IMUNOLÓGICOS
Amostras para diagnósticos imunológicos não exige jejum prolongado,
mas é recomendado um jejum de três a quatro horas para evitar a lipemia
da amostra.
Lipemia: presença de lipídeos ou gordura em grandes quantidades no
sangue.
Hemólise: lise das hemácias (destruição ou desintegração) liberando a
hemoglobina no soro ou plasma.
Hiperbilirrubenemia:a bilirrubina é um pigmento amarelo gerado no fígado,
proveniente da hemoglobina pós destruição das hemácias.

8. JANELA IMUNOLÓGICA
É o intervalo entre a infecção e a
produção detectável de anticorpos.
Definição Durante esse período, testes que
detectam anticorpos podem acusar
um falso negativo, pois o corpo ainda
não produziu anticorpos suficiente.
HIV: a janela pode durar entre 2 a
12 semanas.
COVID-19: pode durar 5 a 14 dias
após o início dos sintomas.
Evitar falsos negativos.
Escolher o momento certo para o
teste.
Prevenir transmissão.

9. TESTE DE AGLUTINAÇÃO
Nos testes de aglutinação, partículas muito pequenas são
acrescentadas a um antígeno ou anticorpo reagente.
O complexo resultante é misturado à amostra se o
anticorpo ou antígeno-alvo estiver presente na amostra,
liga-se às partículas, produzindo aglutinação.
Aglutinação Direta
1.
- Ocorre quando partículas naturais, como hemácias ou
bactérias, se agrupam devido à interação com anticorpos
específicos (Ex: ABO e RH).
2.Aglutinação Passiva (Indireta)
- Utiliza partículas inertes (como látex ou hemácias tratadas)
revestidas com antígenos ou anticorpos para detectar a
presença do elemento complementar na amostra.

10. IMUNOCROMATOGRAFIA
São testes rápidos e qualitativos usados para diagnóstico e triagem de
doenças infeciosas.
Baseado na detecção antígeno e anticorpo na difusão cromotográfica.
Conjugado: resultado do complexo AG/AC com partículas de ouro/prata
coloidal.
Membrana nitrocelulose: possui reagentes de captura nas áreas T e C.

11. IMUNOCROMATOGRAFIA
Solução tampão: mantém o PH estável da reação.
Vantagens: pequeno volume de amostra, teste rápido, com boa sensibilidade
e especificidade

13. IMUNOFLUORESCÊNCIA
Definição
- Diagnóstico clínico: Detecção de patógenos, doenças autoimunes e câncer.
- Pesquisa biomédica: Investigação da resposta imune em doenças autoimunes,
permite identificar onde e quanto uma proteína específica está sendo expressa
em uma célula ou tecido.
- Oncologia: Identificação de marcadores tumorais ( PSA, p53, etc).
É ma técnica laboratorial utilizada para detectar e visualizar proteínas ou outros
antígenos em células e tecidos, utilizando anticorpos conjugados a fluoróforos
(moléculas fluorescentes).
Finalidades

14. IMUNOFLUORESCÊNCIA
1. Imunofluorescência Direta (IFD)
- Utiliza um anticorpo primário diretamente conjugado a um fluoróforo.
- Simples e rápida, mas menos sensível que a indireta.
- Exemplo: Diagnóstico de infecções virais como herpes e sífilis.
2. Imunofluorescência Indireta (IFI)
- Usa um anticorpo primário específico para o antígeno e um anticorpo
secundário conjugado a um fluoróforo.
- Maior sensibilidade, pois múltiplos anticorpos secundários podem se ligar ao
primário, amplificando o sinal.
- Exemplo: Diagnóstico de doenças autoimunes.
Métodos

15. A principal diferença entre a IFD e
a IFI é quena direta o fluoróforo é
conjugado ao anticorpo que
confirma a ligação do
alvo/antígeno (anticorpo primário)
e, na indireta, o anticorpo
conjugado ao fluoróforo
(anticorpo secundário) confirma o
anticorpo primário.

16. ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO
(ELISA)
É um teste que se baseia na reação AG/AC
através de reações enzimáticas que geram sinal,
geralmente uma mudança de cor.
Teste imunoenzimático, sensível, heterogênea
(mais de uma fase) para quantificação de
antígenos ou anticorpos.
Um dos reagentes é imobilizado na fase sólida
enquanto outro fica livre para se ligar a enzima.

17. ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO (ELISA)
ELISA Direto
- O antígeno é fixado na placa e um *anticorpo conjugado com enzima* é usado para
detecção.
- Rápido, mas com menor sensibilidade.
ELISA Indireto
- Um anticorpo primário específico se liga ao antígeno e um *anticorpo secundário conjugado
com enzima* amplifica o sinal.
- Mais sensível que o direto.

18. ENSAIO IMUNOENZIMÁTICO (ELISA)
ELISA Sanduíche
- Utiliza *dois anticorpos*: um para capturar o antígeno na placa e outro para a detecção.
- Alta especificidade, ideal para detectar proteínas específicas.
ELISA Competitivo
- Mede a competição entre o antígeno da amostra e um antígeno marcado.
- Usado para detectar pequenas moléculas como hormônios e toxinas.

20. 1. Sobre as amostras utilizadas em testes imunológicos, qual é a principal
diferença entre soro e plasma?
a) O soro contém fatores de coagulação, enquanto o plasma não.
b) O plasma contém fatores de coagulação, enquanto o soro não.
c) O soro contém mais proteínas do que o plasma.
d) O plasma é utilizado apenas para testes de glicemia.
2. O que é a janela imunológica e por que ela é importante no diagnóstico de
doenças infecciosas?
a) É o período entre a infecção e a produção detectável de anticorpos, podendo
causar falsos negativos se o teste for realizado precocemente.
b) É o intervalo de tempo que um vírus sobrevive no organismo antes de causar
sintomas.
c) Representa a fase em que a infecção já está curada, mas os anticorpos
ainda podem ser detectados.
d) É o tempo necessário para a produção de antígenos após a infecção.

21. 3. No teste de imunofluorescência, qual é a principal diferença entre a
imunofluorescência direta (IFD) e a indireta (IFI)?
a) Na IFD, o fluoróforo está conjugado ao anticorpo secundário, enquanto na IFI
ele está no anticorpo primário.
b) Na IFD, o fluoróforo está conjugado ao anticorpo primário, enquanto na IFI ele
está no anticorpo secundário.
c) A IFI é menos sensível do que a IFD.
d) A IFD é utilizada apenas para diagnóstico de doenças autoimunes.
4. Qual das opções a seguir NÃO é uma vantagem dos testes de
imunocromatografia?
a) Pequeno volume de amostra necessário.
b) Resultados rápidos e de fácil interpretação.
c) Alta precisão para quantificação de proteínas em amostras biológicas.
d) Boa sensibilidade e especificidade.