1. Prof. Dr Manoel Garcia Jr.
Técnicas de análise
microbiológicas
2. Nutrição Microbiana
• Nutrição: Fornecimento de substâncias nutritivas para o
crescimento bacteriano (Energia e Matéria Plástica)
• Cultura: Propagação do microrganismo em condições
adequadas (Exigências Nutricionais e Ambientais)
3. Nutrição Microbiana
• De todos os organismos vivos, os microrganismos são os mais
versáteis e diversificados em suas exigências nutricionais.
• Alguns são tão exigentes quanto o homem e outros animais.
• Todos os organismos vivos compartilham algumas
necessidades nutricionais em comum:
o Carbono
o Nitrogênio
o Água
4. Classificação dos meios de Cultura
•Estado Físico
Líquido
(Turvação do meio)
Sólido
(1,5 a 2,0%) (Colônias)
Semi-Sólido (0,5%)
(Movimento)
5. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
Agar Sangue
Agar Chocolate
Lowenstein -Jensen
6. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
(Seletivos)
Agar MacConkey
Agar Manitol Sal
Agar Bacillus cereus
7. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
(Seletivos)
Eosin Methilen Blue (EMB)
Oxoid Chromogenic Listeria Agar (OCLA)
8. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
Agar Sangue Padrão de Hemólise Agar Sangue
9. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
(Seletivos)
Agar MacConkey
(Fermentação da Lactose) Agar Salmonella Shigella
10. Classificação dos meios de Cultura
•Poder Seletivo e Diferencial
Agar Tríplice Açucar Ferro (TSI) Agar Xilose Lisina Desoxicolato (XLD)
13. Importância do Metabolismo
• Avaliar a diversidade e versatilidade bioquímica
• Relação microrganismos e doenças
• Papel dos microrganismos na natureza
• Explorar os microrganismos economicamente
• Cultivo, crescimento e controle dos meios.
• Controle dos processos de deterioração de materiais
• Reciclagem da matéria
16. A partir da Era do Cultivo, as primeiras culturas bacterianas eram
realizadas APENAS em meio SÓLIDO e, desde então, descrever a aparência das
colônias vem sendo uma importante ferramenta na microbiologia.
17. A morfologia é influenciada PELO TIPO DO MEIO E PELAS CONDIÇÕES
DE CRESCIMENTO, cuidados devem ser tomados antes de descrever os
parâmetros. Uma boa determinação da morfologia das colônias depende de
uma boa semeadura pois necessita-se que as colônias sejam bem separadas.
23. R =(C x c x d)/r
• R = Resultado
• C = número de colônias contadas
• c = número de colônias confirmadas
• r = número de colônias repicadas
• d = diluição utilizada
Resultado final= Rt (colônias típicas) + Ra (colônias atípicas)
24. Diluição 10-2 = 30 colônias contadas, das quais 20 eram típicas e 10 atípicas.
• Para confirmação, foram repicadas 5 colônias de cada tipo.
• Quatro colônias típicas e duas atípicas apresentaram resultado positivo nos testes
confirmativos.
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias típicas:
• RT = ?
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias atípicas:
• RA = ?
• O resultado final será igual à soma das colônias típicas e atípicas confirmadas:
• Resultado final = RT + RA = ????????????? UFC/g ou mL.
Ex:
25. Diluição 10-2 = 30 colônias contadas, das quais 20 eram típicas e 10 atípicas.
• Para confirmação, foram repicadas 5 colônias de cada tipo.
• Quatro colônias típicas e duas atípicas apresentaram resultado positivo nos testes
confirmativos.
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias típicas:
• RT = 20 x 4 x 100/5 = 1.600
• Aplicando-se a fórmula, teremos para colônias atípicas:
• RA = 10 x 2 x 100/5 = 400
• O resultado final será igual à soma das colônias típicas e atípicas confirmadas:
• Resultado final = RT + RA = 1600 + 400 = 2000 = 2,0 x 103 UFC/g ou mL.
Ex: