A amostra foi submetida a choque térmico para destruir células vegetativas e ativar esporos. A amostra foi diluída em 10-1, 10-2 e 10-3 e homogeneizada. Placas de Petri com meio seletivo para Clostridium perfringens foram inoculadas com 0,1 mL das diluições 10-2 e 10-3. As placas foram incubadas em anaerobiose a 35°C por 5-7 dias para contagem de colônias.

1. MATERIAIS E MÉTODOS
1. Amostra (“Lagoa dos Macacos”)
2. Pipetas
3. Pipetadores
Inicialmente a amostra foi submetida a choque térmico em temperatura
de 75°C por 10 minutos, de modo que as células vegetativas fossem destruídas
e os esporos ativados.
Para o experimento foi utilizado amostra do Zoológico da UFMT, mais
precisamente da “Lagoa dos Macacos”. Foi necessário fazer a diluição da
amostra, pois ela se tratava de um zoológico onde os animais excretam, logo
há uma grande carga microbiana. A diluição foi feita pra 10-1, 10-2 e 10-3, sendo
que após cada diluição, houve a homogeneização. Em seguida fez-se o
Plaqueamento em Superfície (Spread plate), com o meio seletivo para
Clostidium perfringens,logoinoculou-se 0,1 mL da amostra nas placas de Petri
em duplicata para as diluições 10-2 e 10-3.
Em seguida, adicionou-se 20 mL de água destilada no Gerador de
Anaerobiose, que éacompanhado de uma fita de papel indicadora, esse
gerador é colocado em cima da Jarra de Anaerobiose para indicar a presença
ou ausência de oxigênio.
Na Jarra de Anaerobiose, as placas foram incubadas em estufa a 35°C
por 5 a 7 dias, na posição invertida, de modo a evitar que a condensação da
água atrapalhe o crescimento microbiano.