O documento descreve uma pesquisa sobre o potencial antimicrobiano e antioxidante de extratos de fungos isolados de sedimentos de manguezais em São Luís, Maranhão. Os objetivos foram explorar a diversidade fúngica dos manguezais, caracterizar os fungos em relação às atividades biológicas de seus extratos, e verificar a atividade antimicrobiana e antioxidante dos extratos contra bactérias e leveduras patogênicas. Os resultados mostraram que os extratos de alguns fungos apresentaram atividade antimicro

1. POTENCIALANTIMICROBIANO E ANTIOXIDANTE DE EXTRATOS DE
CULTURA DE FUNGOS PROVENIENTES DE SEDIMENTO DE MANGUE
Orientadora: Cristina de Andrade Monteiro, Professora Doutora do
IFMA Campus Monte Castelo.
Bolsista: Rubem Crisney Salgado da Silva: Licenciando do Curso de
Biologia pelo IFMA Campus Monte Castelo.
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2. INTRODUÇÃO
 Os manguezais apresentam condições ambientais hostis de sobrevivência tais
como temperatura, alta salinidade, baixa oxigenação, influência de maré
(Alappatt, 2018).
 Os fungos se destacam nestes ambientes produzindo metabólitos secundários
exclusivos e diversificados que podem apresentar propriedades eficazes no
tratamento de diversas doenças ou condições de morbidade (Rodrigues et al.,
2020; Mohammed et al., 2021).
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3. INTRODUÇÃO
 A Organização Mundial de Saúde declara que a resistência às drogas
está entre os dez principais problemas de saúde pública (OMS, 2010).
 Resistência aos antimicrobianos compromete as opções terapêuticas dos
tratamento das doenças fúngicas e bacterianas (Mack; Bielicki, 2019)
 Nesse sentido, destacamos que o Maranhão é detentor de um dos maiores
ecossistemas de manguezais do país. Mesmo apresentando significante
relevância, não há estudos dos manguezais que explorem a análise
biotecnológica dos metabólitos fúngicos.
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4. FONTE: Autor (2022)
Figura 1. Área de manguezal poluída
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5. 5
Figura 2. Área de manguezal com muito lixo
Figura 3. Área de manguezal afetada diretamente
por atividade humana
FONTE: Autor (2022)

6. OBJETIVOS
Geral
 Explorar a diversidade fúngica de manguezais em São Luís-MA caracterizando-os com relação às
atividades biológicas de seus extratos.
Específicos
 Produzir extratos a partir de culturas líquidas de fungos promissores;
 Verificar a atividade antimicrobiana dos extratos fúngicos, determinando as concentrações inibitórias
mínimas e as ações bactericidas e fungicidas;
 Determinar a atividade antioxidante dos extratos;
 Explorar os constituintes metabólitos dos extratos promissores por meio de ensaios cromatográficos
(CCDC, CLAE).
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7. METODOLOGIA
BACTÉRIA ATCC
Staphylococcus aureus 25923
Enterococcus faecalis 29212
Klebsiella pneumonia
Escherichia coli 25922
Pseudomonas aeruginosa 27853
LEVEDURA
C. albicans 90028
C. krusei 6258
C. parapsilosis 22019
 As linhagens teste que estão sendo usadas são as de referência:
Tabela 1. Patógenos utilizados em testes.
 Todas da Coleção de Culturas do Laboratório de Biologia do Instituto Federal do
Maranhão.
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8.  Os fungos dos manguezais foram isolados
em Ágar Batata Dextrose (BDA) a partir
de amostras de sedimentos (total 10, 5 por
período seco/chuvoso).
 Coletados do manguezal do bairro Ipase
(2º32’10”S e 44º15’40”W) e o manguezal
do bairro Bacanga (2º32’48”S e
44º18’12”W).
METODOLOGIA
Figura 4. Localização do ponto de coleta bairro Ipase
Figura 5. Localização do ponto de coleta bairro
Bacanga
FONTE: Autor (2022)
FONTE: Autor (2022)
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9. FONTE: Autor (2022)
Figura 6. Pesquisadores demarcando localização dos pontos de coleta.
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10. FONTE: Autor (2022)
Figura 7. Pesquisador em coleta de solo de mangue.
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11. 11
Figura 8. Pesquisadores em coleta de solo de mangue.
FONTE: Autor (2022)

12. Figura 9. Diversidade e identificação de fungos do sedimento de manguezal
por microcultivo.
Fonte: Autor (2023)
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13. • Preparação dos sobrenadantes de cultura e dos extratos fúngicos
 (De acordo com Hamzah et al, 2018, com adaptações desta pesquisa). Fungos foram
inoculados em meio caldo batata (MCB) e crescidos sob agitação por 2, 4 e 7 dias.
Sobrenadantes foram recolhidos por centrifugação (10 000 rpm, 10 min) e testados por
Microdiluição para verificar o potencial antimicrobiano e determinar a Concentração
Inibitória Mínima (CIM).
METODOLOGIA
Figura 10. Preparação de sobrenadantes
Fonte: Autor (2023)
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14. METODOLOGIA
 Preparação dos extratos fúngicos para os testes de ágar difusão e microdiluição
(CLSI, 2019)
Figura 11. Sobrenadantes sob liofilização Figura 12. Extratos prontos para teste.
14
Fonte: Autor (2023)

15. 15
Figura 13. Aluna e alunos pesquisadores em bancada
Fonte: Autor (2023)
METODOLOGIA

16. 16
 O gênero Candida constitui o principal grupo de leveduras que causam infecções oportunistas
em seres humanos e, uma vez que a exposição aos fármacos têm diminuído a sensibilidade
das cepas, há falha na terapia antifúngica.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Figura 14. Infecções por Candida
Fonte: Internet

17. RESULTADOS E DISCUSSÃO
17
 Nossos resultados ratificam que os fungos se destacam pela elevada capacidade de produzir
metabólitos secundários (Chen; Hu, 2021; Poleto et. al., 2021).
P 107
Figura 15. Extrato do P107 com halo de inibição de raio de 16 mm
contra C. albicans.
P601
P115
Figura 16. Extratos de leveduras de mangue P115 e P601
apresentando halo de inibição contra C. albicans de raio de 6mm e
15mm, respectivamente.
Fonte: Autor (2023)

18. 18
Figura 17. Extrato do P107 com halo de inibição de raio de
8 mm contra C. krusei.
Figura 18. Extrato do P203 com halo de inibição de raio de
16 mm contra C. albicans.
P 107
Fonte: Autor (2023)
RESULTADOS E DISCUSSÃO

19. 19
Cabeça aspergilar
Conidióforo
Figura 19. Fotomicrografia do fungo P 107 (400x).
P 107
Fonte: Autor (2023)

20. 20
RESULTADOS E DISCUSSÃO
As bactérias parecem estar adaptadas às Unidades de Terapia Intensiva (UTIs) dos
hospitais, ambiente que deveria ser praticamente livre de agentes infecciosos por causa
da gravidade da saúde de seus pacientes.
Conclusão de um levantamento feito por pesquisadores do Hospital das Clínicas (HC) da
Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (FMRP-USP).
(Pesquisa FAPESP)
Figura 20. Foliculite por Pseudomonas aeruginosa
Figura 21. Ectima causada por S. aureus
Fonte: Grupo de Patologia Infecciosa AEpap

21. 21
Neste sentido, os resultados desta pesquisa apontam para uma alternativa biotecnológica a partir
da atividade antimicrobiana dos extratos de fungo de mangue tanto contra patógenos do gênero
Candida quanto para bactérias.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
P404
P601
P107
P905
P805
Figura 23. Extratos dos fungos P404, P601 e P107 com halos
de 3mm, 3mm e 6mm, respectivamente.
Figura 22. Ação inibitória dos extratos dos fungos P905 e P805
com halos de 7mm e 6mm, respectivamente.
Fonte: Autor (2023)

22. 22
P203 P601 P404 P203 P601 P404
S. aureus E. Coli
CIP
+S.a +E.coli C- CIP P203 P601 P404
Figura 24. Teste de microdiluição dos extratos P203, P
601 e P 404 contra Escherichia coli e Staphylococus
aureus. A ciprofloxacina (CIP) é o antibiótico padrão.
Os resultados anteriores foram confirmados em microdiluição. Foi possível verificar que
o extrato da linhagem P203 apresentou CIM de 250 ug/mL inibindo o crescimento da
bactéria
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Figura 25

23. 23
RESULTADOS E DISCUSSÃO
No teste abaixo, obtivemos a confirmação da ação antimicrobiana a partir do sobrenadante
liofilizado do fungo P805, que apresenta uma CIM de 12,5 ug/mL para Escherichia coli e 100
ug/mL para Staphylococus aureus
Figura 26 Figura 27

24.  Manguezais dos bairros Ipase e Bacanga apresentam alta diversidade fúngica:
Aproximadamente: 55 fungos tipo levedura e 82 tipo filamentoso, total das duas coletas(.
 Fungos avaliados produziram extratos dotados de atividade antimicrobiana contra leveduras e
bactérias de interesse clínico
 As CIMs dos extratos contra os isolados testados foram extremamente baixas com valores entre
12,5 - 250 ug/mL
 Extratos provavelmente contem metabólitos que precisams ser isolados
 Metábolitos poderão ser utilizadas como alternativa à produção de formulações naturais e
sustentáveis que sejam efetivas contra os micro-organismos resistentes
 Estapas futuras: análises química para o isolamento e identificação dos metabólitos presentes nos
potenciais extratos bem como a identificação molecular das linhagens envolvidas.
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CONCLUSÃO

25. • ALAPPATT JP. Structure and species diversity of mangrove ecosystem. In: Sivaperuman C, Velmurugan A, Singh
A, Jaisankar I, editors. Biodiversity and climate change adaptation in tropical islands. London: Elsevier; 2018. p.
127–144
• CLSI. CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS INSTITUTE. Reference method for broth dilution
antifungal susceptibility testing of yeasts. Approved standardM27-A3, 3rd ed. Clinical and Laboratory Standards
Institute, Wayne, PA. 2008. CLSI. Perfomance standards for antimicrobial susceptibility testing (Supplement
M100), 29th ed., Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne, PA, 2019.
• CHENG, Z., PAN, J., TANG, W., CHEN, Q., AND LIN, Y. Biodiversity and biotechnological potential of
mangrove-associated fungi. J. For. Res. 20, 63–71. 2009. doi: 10.1007/s11676-009-0012-4
• Fioravanti, C. (n.d.). Bactérias em UTI. Fapesp.br. Retrieved October 6, 2023, from
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• HAMZAH T, LEE S, HIDAYAT A, TERHEM R, FARIDAH-HANUM I, MOHAMED R. Diversity and
Characterization of Endophytic Fungi Isolated From the Tropical Mangrove Species, Rhizophora mucronata, and
Identifification of Potential Antagonists Against the Soil-Borne Fungus, Fusarium solani. Front. Microbiol.
9:1707. 2018. doi: 10.3389/fmicb.2018.01707
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BIBLIOGRAFIA

26. AGRADECIMENTOS
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