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APRESENTAÇÃOSEMINARIOINFLAMAÇÃO .pptx
- 1. INHALATION OF THE PRODRUGPI3K INHIBITOR CL27C IMPROVES LUNG FUNCTION IN ASTHMA AND FIBROSIS UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ FACULDADE DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E FARMACOLOGIA PROGRAMA DE PÓS GRADUAÇÃO EM FARMACOLOGIA FABRICIO DE LAMARE KHETYMA MOREIRA TALYSSON SILVA
- 2. INHALATION OF THE PRODRUGPI3K INHIBITOR CL27C IMPROVES LUNG FUNCTION IN ASTHMA AND FIBROSIS UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ FACULDADE DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E FARMACOLOGIA PROGRAMA DE PÓS GRADUAÇÃO EM FARMACOLOGIA FABRICIO DE LAMARE KHETYMA MOREIRA TALYSSON SILVA
- 3. INALAÇÃO DE PRO-FARMACO INIBIDOR DEPI3K CL27C MELHORA FUNÇÃO PULMONAR EM ASMA E FIBROSE UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ FACULDADE DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E FARMACOLOGIA PROGRAMA DE PÓS GRADUAÇÃO EM FARMACOLOGIA FABRICIO DE LAMARE KHETYMA MOREIRA TALYSSON SILVA
- 4. ASMA Inflamação persistente e recorrente dotrato respiratório
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- 8. ASMA Corticoides: 10% asma severa eresistente
- 9. ASMA Inflamação crônica na asmapode desencadear potencial para fibrose das vias aéreas: Fibrose pulmonar idiopática
- 10. ASMA Via Fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K) Ativaçãodos fibroblastos pulmonares Alvo farmacológico
- 11. PI3K Via Fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K) Familiade quinases 3 classes Classe I: 4 enzimas PI3Kα PI3Kβ PI3Kγ PI3Kδ
- 12. PI3K Via Fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K) 3classes Classe I: 4 enzimas Enzimas que estão envolvidas na complexa cascata da sinalização intra celular deAKT (Proteína quinase específicaSerina e Treonina) Vários estudos funcionais mostram a relação da PI3K como chave para a regulação da inflamação e
- 13. Enzimas que estãoenvolvidas na complexa cascata da sinalização intra celular de AKT (Proteína quinase específica Serina e Treonina) Vários estudos funcionais mostram a relação da PI3K como chave para a regulação da inflamação e fibrose PI3K Via Fosfoinositídeo 3-quinase (PI3K) 3 classes Classe I: 4 enzimas
- 14. Modelo Via Inalatória Evitarefeitos colaterais Animal Asma Asma severa Fibrose pulmonar
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- 23. ROS Inibe a produção deoxigênio ativo reagente CL27C
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- 25. CL27C Análise CL27c estudado paratraçar Absorção distribuição Metabolismo excreção também parâmetros farmacocinéticos VO / IV
- 26. CL27C Altas concentrações na dosealta das duas formas Quase indetectável no plasma Baixa absorção sistêmica Análise inalação
- 27. CL27C Absorção sistêmica causa hiperglicemiae resistência a insulina Insulina
- 28. CL27C CL27c Inalado (2 mg/mlsuspension/ 30 min exposure) previne insulino-dependência (1 UI/kg in PBS i.p.) pAkt ativado nos pulmões Não ativado coração ou figado
- 29. Reduz inflamação CL27C modelo deasma Modelo de asma aguda CL27c (0,2, 2 e 20 mg / ml) Resultados inconstantes (solubilidade) Sem eficácia
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- 31. Reduz inflamação CL27C modelo deasma Imunoistoquímica para pAkt473 em pulmão animais controle e animais tratados com OVA ou em combinação com CL27c
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- 33. Reduz inflamação CL27C modelo deasma IL-5 IL-13 regulam a obstrução, a hiper- reatividade e o remodelamento das vias aéreas
- 34. Reduz inflamação CL27C modelo deasma CD18+ infiltrado leucocitário (brown cells)
- 35. Imuno Histoquímica Corte histológico (fixação, inclusão,microtomia...)
- 36. Imuno Histoquímica Corte histológico (fixação, inclusão,microtomia...) Reação imuno-histoquímica Contra-coloração Hematoxilina de Harrys
- 37. Imuno Histoquímica Corte histológico (fixação, inclusão,microtomia...) Reação imuno-histoquímica Contra-coloração Hematoxilina de Harrys Finalização (Desidratação , clarificação, montagem)
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- 47. Melhora função pulmonar CL27C Asma crônica/TH2 CL27cnão foi capaz de modificar a hiper-responsividade das vias aéreas induzida pela metacolina Indica que CL27c melhora a função pulmonar, reduzindo a inflamação mediada porTh2
- 48. Melhora função pulmonar CL27C Asma crônica/TH2 CL27cnão foi capaz de modificar a hiper-responsividade das vias aéreas induzida pela metacolina Indica que CL27c melhora a função pulmonar, reduzindo a inflamação mediada porTh2
- 49. Eficaz na asma CL27C Resistenteaos GCC 10% da população asmática desenvolve uma forma grave de doença marcada por inflamação neutrofílica que é relativamente ou completamente refratária aos glicocorticóides
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- 54. Eficaz na asma CL27C Resistenteaos GCC Restauração da complacência sem alteração na hiper- reatividade ou resistência pulmonar
- 55. Eficaz na asma CL27C Resistenteaos GCC Redução da inflamação independente da abundancia de citocinas
- 56. Eficaz na asma CL27C Resistenteaos GCC A ação local do CL27c não poderia bloquear a produção sistêmica desses mediadores em um modelo de asma resistente a glicocorticoides
- 57. Atenua fibrose pulmonar CL27C Induzida porbleomicina A sinalização de PI3K é importante não apenas na asma Remodelamento das vias áreas e na fibrose pulmonar CL27c inalado foram estudados no modelo in vivo de fibrose
- 58. Atenua fibrose pulmonar CL27C Induzida porbleomicina A sinalização de PI3K é importante não apenas na asma Remodelamento das vias áreas e na fibrose pulmonar CL27c inalado foram estudados no modelo in vivo de fibrose pulmonar induzida por bleomicina
- 59. Atenua fibrose pulmonar CL27C Induzida porbleomicina Remodelamento das vias áreas e na fibrose pulmonar CL27c inalado foram estudados no modelo in vivo de fibrose pulmonar induzida por bleomicina
- 60. Lesão pulmonar Induzida porbleomicina e fibrose 8 a 10 semanas 2 ou 3,75 mg/kg de Sulfato de Bleomicina 21 22º dia Eutanásia
- 61. Lesão pulmonar Induzida porbleomicina e fibrose(contagem de células) Coleta do LBA Lavado 3X 500µl de PBS 600Xg por 10 min 4 ºC Amostras Coradas com Diff Quick Contagem de Celulas
- 62. Fig 11. CL27cinalado diminui a inflamação e fibrose em um modelo fibrose pulmonar grave induzida por bleomicina
- 63. Reduced inflammation andexpression of fibrotic markers after CL27c inhalation in a moderate protol of bleomycin- induced lung fibrosis HTAB ( pH=6), 1ml para cada 50 mg da amostra + + O-Dionisidina e H2O2 em solução aquosa 4500 RPM por 20 minutos Atividade de Mieloperoxidase
- 64. Fig 6.Inflamação eexpressão reduzidas de marcadores fibróticos após a inalação de CL27c em um protocolo moderado de fibrose pulmonar induzida por bleomicina
- 65. CL27c atenua os processos inflamatóriose fibróticos fibrose pulmonar/Bleomicina
- 66. CL27c atenua os processos inflamatóriose fibróticos fibrose pulmonar/Bleomicina
- 67. CL27c atenua os processos inflamatóriose fibróticos fibrose pulmonar/Bleomicina
- 68. Figura 13: Efeitosdo CL27c nos fibroblastos pulmonares saudáveis e na FPI humana Foi utilizada bleomicina (3,75 mg / kg) para induzir fibrose pulmonar em camundongos
- 69. Figura 13: Efeitosdo CL27c nos fibroblastos pulmonares saudáveis e na FPI humana Foi utilizada bleomicina (3,75 mg / kg) para induzir fibrose pulmonar em camundongos
- 70. Figura 13: Efeitosdo CL27c nos fibroblastos pulmonares saudáveis e na FPI humana Foi utilizada bleomicina (3,75 mg / kg) para induzir fibrose pulmonar em camundongos Legenda:(D) Sobrevivência de fibroblastos pulmonares primários humanos (HLF) e HLF imortalizado cultivado com TFG-β (10 ng / ml) e mantido por 48 horas na ausência ou presença de CL27c (1 µM ou 10 µM).
- 71. Curva pressão-volume achatada edeslocada para baixo, correspondendo a uma doença pulmonar restritiva. CL27c restaura a função pulmonar normal . Legenda:(A)Análise da curva pressão-volume em camundongos controle (n = 14) e em camundongos que desenvolveram disfunção pulmonar induzida por bleomicina após tratamento com veículo (n = 12) ou CL27c (n = 12; 2 mg / ml).
- 72. CL27c restaura a função pulmonarnormal O tratamento com CL27c restaura a função pulmonar normal e melhora a sobrevida em um modelo de fibrose e disfunção pulmonar induzida por Bleomicina. Legenda:(b) Análise da capacidade pulmonar total (CPT) como em A (da esquerda para a direita n = 4, 4, 5 experimentos independentes, respectivamente); c) Análise da capacidade inspiratória (CI) como em (a) (da esquerda para a direita n = 5, 4, 6 experimentos independentes, respectivamente); d) Medição da capacidade vital forçada (CVF) como como em (a) (da esquerda para a direita n = 5, 4, 6; e)Analise do volume expiratório forçado a 50 milissegundos (FEV50) como como em (a) (da esquerda para a direita n = 5, 4, 6.
- 73. CL27c restaura a função pulmonarnormal Analise da resistência pulmonar , Complacência dinâmica e curva de sobrevivência Legenda:(f) Quantificação da resistência pulmonar (RL) como em A (da esquerda para a direita n = 4, 4, 5 experimentos independentes, respectivamente); g) Medição da conformidade dinâmica (Cdyn) como em (a) (da esquerda para a direita n = 5, 4, 6 experimentos independentes, respectivamente); h) Curvas de sobrevivência de camundongos tratados com solução salina (círculos brancos;n=8) ou Bleomicina na presença (triângulos pretos;n=10)ou ausência (círculos pretos;n=10) de CL27c.
- 74. CL27c Reduz fibrose persistente Analise dograu de fibrose no tecido pulmonar por meio da escala de Aschcrotf Legenda:(A) Quantificação de fibrose em camundongos controle e animais tratados com Bleomicina isoladamente ou na presença de CL27c e B) Quantificação da fibrose na área pulmonar usando a escala deAshcroft.
- 75. CL27c Reduz fibrose persistente Analise dograu de fibrose no tecido pulmonar por meio da escala de Aschcrotf Legenda: C) Analise da curva de Volume Pressão em camundongos controle e em camundongos que desenvolveram disfunção pulmonar induzida por Bleomicina; D) Curvas de sobrevivência de camundongos tratados com salina ou Bleomicina (triangulo preto) ou ausência (círculos pretos).
- 76. CL27c Reduz fibrose persistente Analise dograu de fibrose no tecido pulmonar por meio da escala de Aschcrotf Legenda: C) Analise da curva de Volume Pressão em camundongos controle e em camundongos que desenvolveram disfunção pulmonar induzida por Bleomicina; D) Curvas de sobrevivência de camundongos tratados com salina ou Bleomicina (triangulo preto) ou ausência (círculos pretos).
- 77. Estudos com fibroblastosprimário (derivados de pacientes) indicam que o direcionamento para a sinalização PI3K diminui a expansão de fibroblastos e a remodelação fibrótica CL27c diminui os níveis de mRNA de Tgfb1,Ctgf,Colla1,Mmp2 (modulação dos processos
- 78. Estudos com fibroblastosprimário (derivados de pacientes) indicam que o direcionamento para a sinalização PI3K diminui a expansão de fibroblastos e a remodelação fibrótica CL27c diminui os níveis de mRNA de Tgfb1,Ctgf,Colla1,Mmp2 (modulação dos processos subjacentes a resposta fibrótica) Foi capaz de reduzir os danos nos pulmões e prevenir a mortalidade animal
- 79. CL27c diminui osníveis de mRNA de Tgfb1,Ctgf,Colla1,Mmp2 (modulação dos processos subjacentes a resposta fibrótica) Foi capaz de reduzir os danos nos pulmões e prevenir a mortalidade animal
- 80. UNIVERSIDADE FEDERAL DOCEARÁ FACULDADE DE MEDICINA DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA E FARMACOLOGIA PROGRAMA DE PÓS GRADUAÇÃO EM FARMACOLOGIA FABRICIO DE LAMARE KHETYMA MOREIRA TALYSSON SILVA INHALATION OF THE PRODRUG PI3K INHIBITOR CL27C IMPROVES LUNG FUNCTION IN ASTHMA AND FIBROSIS