Crescimento celular no Meio Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM
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O documento descreve o Meio Essencial Mínimo (MEM), que possui maior concentração de aminoácidos do que o Meio Basal Eagle para atender às necessidades nutricionais de diferentes tipos de células. O MEM da HiMedia promoveu melhor crescimento celular do que o concorrente para vários tipos de linhagens celulares quando suplementado com soro fetal bovino.
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Crescimento celular no Meio Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM
- 1. Meio Eagle Modificado por Dulbecco OMeio de Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) é um dos meios modificados por Eagle mais utilizados. O Meio DMEM é uma modificação do Meio Basal Eagle (BME) que contém quatro vezes a concentração de aminoácidos e vitaminas. Adicionalmente, a formulação também inclui glicina, serina e nitrato férrico. A fórmula original contém 1000mg/L e foi originalmente usada para cultura de células embrionárias de ratos. O meio DMEM com alta glicose é uma modificação do meio original e contém 4500mg/L de glicose. A glicose adicional foi testada para ser utilizada na cultura de vários tipos celulares incluindo células primárias de ratos e galináceos assim como outras células comuns. Adequação do DMEM para cultura de múltiplos tipos de células HiMedia Concorrente 1 Concorrente 2 Númerodecélulasemmilhões/mL Linhagens Celulares Figura 1.1 Desempenho do meio DMEM em diferentes linhagens de células entre a HiMedia e os concorrente. Meio DMEM HiMEDIA alta glicose suplementado com FBS (Soro Fetal Bovino) 10% foi comparado com o meio DMEM de alta glicose do concorrente para promover o teste de crescimento para vários tipos celulares. As densidades cultivadas dependem do tipo celular. As células foram cultivadas triplamente em microplacas de 24 poços e incubadas a 37°C com 5% CO2 E 95% de ar ao longo de 4 dias. Foram coletadas amostras diariamente e avaliado a densidade das células e morfologia. Os dados representados no gráfico mostram a média obtida durante os 4 dias de cultivo. Aplicações: • O DMEM com baixa glicose é usado para o cultivo de células embrionárias de ratos e células de fígado de rato. • Cultivo de uma variedade de células incluindo linhagens primárias. • Recomeda-se o uso com 5-10% de Soro Fetal Bovino.
- 2. HiMedia Concorrente 1 Concorrente 2 HiMedia Concorrente 1 Concorrente 2 HiMedia Concorrente 1 As células Vero foram cultivadas a 6 X 104 células/mL triplamente em microplacas de 24 poços e incubada a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. As amostras foram coletadas diariamente após 2 dias de cultivo e foram avaliadas quanto a densidade e morfologia. Foram comparados o crescimento celular e a morfologia das células entre o meio da HiMedia e dos concorrentes. As células MDCK foram cultivadas em 6 X 104 triplamente em microplacas de 24 poços e incubadas a 37°C com 5% CO2 e 95% de ar. As amostras foram coletadas diariamente após dois dias e foram avaliadas quanto a densidade e morofologia. Foram comparados o crescimento celular e a morfologia das células entre o meio da HiMedia e dos concorrentes. As células BHK-21 foram cultiva em 4 x 104 células/mL e incubadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. Após 24 horas as células foram avaliadas quanto a densidade e morfologia. Foram comparados o crescimento celular e a morfologia das células entre o meio da HiMedia e do concorrente. CélulasVero(milhões/mL) CélulasMDCK(milhões/mL) CélulasBHK-21(milhões/mL) N° de dias N° de dias N° de dias Figura 1.2 Curva de crescimento para linhagem celular Vero. Figura 1.3 Curva de crescimento para linhagem de células MDCK. Figura 1.4 Subcultura seriada de células BHK-21.
- 3. DMEM DMEM, Baixa glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose (Modificado por Autoclavagem) DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose SEM L-Glutamina, vermelho fenol, glicose, piruvato de sódio e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina e piruvato de sódio / SEM Glicose e bicarbonato de sódio. COM L-Glutamina, 1g/L de glicose e piruvato de sódio / SEM bicarbonato de sódio COM 1g/L de glicose e piruvato de sódio / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, 1g/L de glicose e piruvato de sódio / SEM Ácido fólico e bicarbonato de sódio COM 1g/L de glicose e piruvato de sódio / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM 1g/L de Glicose, L-Glutamina, tampão HEPES 25 mM e piruvato de sódio / SEM bicarbonato de sódio COM 1g/L de glicose, L-Glutamina e piruvato de sódio / SEM bicarbonato de sódio e vermelho fenol COM 1g/L de glicose e piruvato de sódio / SEM L-Glutamina, vermelho fenol e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, 4.5g/L de Glicose e Piruvato de Sódio / SEM Bicarbonato de Sódio COM 4.5g/L de Glicose e Piruvato de sódio / SEM L-Glutamina e Bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, 4.5g/L de Glicose e Piruvato de sódio / SEM Ácido fólico e Bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, 4.5g/L de Glicose e Piruvato de Sódio / SEM Bicarbonato de Sódio e Vermelho Fenol COM 4.5 g/L de Glicose e L-Glutamina / SEM Bicarbonato de sódio e Piruvato de sódio COM 4.5 g/L de Glicose / SEM L-Glutamina, Piruvato de Sódio e Bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, 4.5 g/L de Glicose e tampão HEPES 25mM / SEM Bicarbonato de sódio e Piruvato de Sódio COM 4.5 g/L de Glicose e L-Glutamina / SEM Bicarbonato de sódio, Fosfato de sódio e Piruvato de sódio COM 4.5 g/L de Glicose, L-Glutamina, tampão HEPES 25mM e Piruvato de sódio / SEM Bicarbonato de sódio COM 4.5g/L de glicose L-Glutamina / SEM vermelho fenol, bicarbonato de sódio e piruvato de sódio. COM 4.5g/L de Glicose / SEM L-Glutamina, Vermelho fenol, Bicarbonato de sódio e Piruvato de Sódio COM 4.5 g/L de Glicose, tampão HEPES 25mM, L-Glutamina e Piruvato de Sódio / SEM Bicarbonato de sódio e Vermelho Fenol AT063A AT186 AT006 AT006A AT006F AT065A AT149 AT183 AT183A AT007 AT007A AT007F AT190 AT066 AT066A AT067 AT068 AT151 AT170 AT170A AT187 Especificações dos Meios Ref. Modelo
- 4. DMEM DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Baixa glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose DMEM, Alta glicose HiGlutaXL™ Meio Eagle Modificado por Dulbecco, Alta Glicose HiGlutaXL™ Meio Eagle Modificado por Dulbecco, Alta Glicose LoSera™ Meio Eagle Modificado por Dulbecco, Alta Glicose LoSera™ Meio Eagle Modificado por Dulbecco, Alta Glicose LoSeraMeio Eagle Modificado por Dulbecco/ Nutrient Mixture F-12 Ham (1:1) LoSera Meio Eagle Modificado por Dulbecco/ Nutrient Mixture F-12 Ham (1:1) LoSera Meio Eagle Modificado por Dulbecco/ Nutrient Mixture F-12 Ham (1:1) COM L-Glutamina, Piruvato de sódio e bicarbonato de sódio / SEM Glicose COM 1g/L de Glicose, Piruvato de sódio e Bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM 1g/L de Glicose, L-Glutamina, Piruvato de Sódio e Bicarbonato de Sódio COM L-Glutamina, 1g/L de Glicose, Piruvato de Sódio e Bicarbonato de sódio / SEM Ácido fólico COM 1g/L de L-Glutamina, tampão HEPES 25mM, Piruvato de sódio e Bicarbonato de sódio COM 1g/L de L-Glutamina, Piruvato de Sódio e Bicarbonato de sódio / SEM Vermelho Fenol COM 1g/L de Glicose, Piruvato de Sódio e Bicarbonato de Sódio / SEM L-Glutamina e Vermelho fenol. COM 4.5g/L de Glicose, Piruvato de Sódio e Bicarbonato de Sódio / SEM L-Glutamina COM L-Glutamina, 4.5g/L de glicose, Piruvato de sódio e 3.7 g/L de Bicarbonato de sódio COM L-Glutamina 4mM, 4.5 g/L de Glicose, Piruvato de Sódio 1mM e 1.5g/L de Bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, 4.5 g/L de Glicose, Piruvato de sódio e Bicarbonato de Sódio / SEM Ácido fólico COM 4.5g/L de Glicose e Bicarbonato de Sódio / SEM L-Glutamina e Piruvato de sódio COM L-Glutamina, 4.5 g/L de Glicose e Bicarbonato de sódio / SEM Piruvato de sódio COM 4.5gm/L de Glicose e Bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina e Piruvato de sódio - Teste Hibridoma COM 4.5g/L de Glicose, Piruvato de sódio e Bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina e Vermelho Fenol COM L-Glutamina, 4.5g/L de Glicose, tampão HEPES 25mM e Bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, 4.5g/L de Glicose e Bicarbonato de sódio / SEM Piruvato de sódio e Fosfato de sódio COM 4.5g/L de Glicose, L-Glutamina, Piruvato de sódio, tampão HEPES 25mM e Bicarbonato de sódio COM 4.5g/L de Glicose e Bicarbonato de Sódio / SEM L-Glutamina, Piruvato de Sódio e Vermelho Fenol COM L-Glutamina, 4.5g/L de Glicose e Bicarbonato de sódio / SEM Piruvato de sódio e Vermelho Fenol COM L-Alanil-L-Glutamina, Bicarbonato de de sódio e Piruvato de sódio COM 4.5g/L de Glicose, L-Alanil-L-Glutamina e Bicarbonato de sódio / SEM Piruvato de sódio COM Bicarbonato de sódio e Piruvato de sódio / SEM L-Glutamina COM L-Alanil-L-Glutamina, Piruvato de sódio e Bicarbonato de sódio COM Oligoelementos e Bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina e tampão HEPES COM tampão HEPES, Bicarbonato de sódio e Oligoelementos / SEM L-Glutamina COM L-Alanil-L-Glutamina, tampão HEPES, Bicarbonato de sódio e Oligoelementos AL186A AL006 AL006A AL006F AL149A AL183A AL183 AL007 AL007A AL007S* AL007F AL066 AL066A AL111 AL101 AL067A AL068A AL151A AL170 AL170A AL007G AL066G RSL003 RSL003G RSL005 RSL006 RSL006G Especificações dos Meios Ref. Modelo
- 5. Meio Essencial Mínimo OMeio Essencial Mínimo é uma modificação do Meio Basal Eagle (BME). Este meio foi desenvolvido por Harry Eagle para atender os requisitos nutricionais específicos para certos subtipos de células Hela e fibroblastos normais de mamíferos. O MEM possui uma concentração de aminoácidos mais elevada para que se aproxime da composição de proteínas das células de mamíferos cultivadas. O MEM também pode ser utilizado com sais de Earle e de Hank e pode ser suplementado com aminoácidos não essenciais (NEAA). A modificação pode ser alterada eliminando o cálcio a fim de facilitar o crescimento de células em suspensão. Adequação do MEM para cultura de múltiplos tipos de célula HiMedia Concorrente Númerodecélulasemmilhões/mL Linhagens Celulares Figura 1. Comparação do desempenho entre o MEM da HiMedia e do concorrente para diferentes tipos celulares. O MEM da HiMedia suplementado com 10% de FBS (Soro Fetal Bovino) foi comparado com o MEM do concorrente para promover o crescimento de vários tipos celulares. A densidade de semeadura varia de acordo com o tipo da célula. As células são cultivadas triplamente em microplacas de 24 poços as quais são incubadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar com ciclo de 4 dias. As amostras foram coletadas diariamente e foram avaliados a densidade e morfologia das células. Os dados apresentados no gráfico representam a média de contagem obtida no dia 4 da terceira passagem. Aplicações: • Cultivo de várias células de mamíferos. • Recomenda-se o uso com 5-10% de FBS.
- 6. CélulasCHO(milhões/mL) CélulasVero(milhões/mL) N° de dias N° de dias HiMedia Concorrente HiMedia Concorrente Figura 2. Curva de crescimento celular de células CHO. Figura 3. Curva de crescimento das células Vero. As células CHO foram semeadas a 0.012 X 106 células/mL triplamente em microplacas de 24 poços as quais são incubadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. As amostras foram coletadas a cada 24 horas e foram avaliadas a densidade e morfologia celular. Foram comparados o crescimento e a morfologia das células que utilizaram o meio da HiMedia com o do concorrente. As células Vero foram semeadas a 0.1 X 106 células/mL triplamente em uma microplaca de 24 poços e incubada a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. As amostras foram coletadas diariamente após 2 dias e foram avaliados a densidade celular e a morfologia. Foram comparados o crescimento celular e a morfologia das células entre o meio da HiMedia e do concorrente.
- 7. ContagemdecélulasBHK-21(milhões/mL) N° de dias Figura 4. Cultura seriada de células BHK-21. HiMedia Concorrente As células BHK-21 foram semeadas a 0.04 X 106 e incubadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. Após 24 horas as células foram avaliadas quanto à densidade e morfologia. Foram comparados o crescimento celular e a morfologia das células entre o meio da HiMedia e do concorrente. Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) (Modificado por Autoclavagem) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) (Modificado por Autoclavagem) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) (Modificado por Autoclavagem) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) COM sais de Earle e L-Glutamina / SEM Bicarbonato de Sódio e NEAA COM sais de Earle, NEAA e L-Glutamina / SEM Bicarbonato de Sódio COM sais de Earle e NEAA / SEM L-Glutamina e Bicarbonato de Sódio COM sais de Earle, NEAA e L-Glutamina / SEM Bicarbonato de Sódio e Vermelho Fenol COM sais de Earle e NEAA / SEM L-Glutamina e Bicarbonato de Sódio e Vermehlo Fenol COM sais de Earle, L-Glutamina, e tampão HEPES 25mM / SEM Bicarbonato de Sódio COM sais de Earle, NEAA, L-Glutamina e tampão HEPES 25mM / SEM Bicarbonato de Sódio COM sais de Earle, NEAA, Piruvato de Sódio e L-Glutamina / SEM bicarbonato de sódio COM sais de Earle e L-Glutamina / SEM bicarbonato de sódio, NEAA e Vermelho Fenol COM sais de Earle, L-Glutamina, NEAA,piruvato de sódio e tampão HEPES 15mM / SEM Bicarbonato de sódio COM sais de Hank e L-Glutamina / SEM bicarbonato de sódio COM sais de Hank/ SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM Sair de Hank, L-Glutamina e NEAA / SEM Bicarbonato de Sódio COM sais de Hank, L-Glutamina e tampão HEPES 25mM/ SEM bicarbonato de sódio COM sais de Earle e NEAA / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM sais de Earle / SEM L-Glutamina, NEAA e bicarbonato de sódio COM sais de Hank e NEAA / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina / SEM Cloreto de cálcio e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, Ribonucleosídeos e Desoxiribonucleosídeos / SEM bicarbonato de sódio COM Ribonucleosídeos e Deoxiribonucleosídeos / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio SEM L-Glutamina, Ribonucleosídeos, deoxiribonucleosídeos e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina / SEM Ribonucleosídeos, deoxiribonucleosídeos e bicarbonato de sódio AT020 AT047 AT047A AT046 AT046A AT074 AT153 AT154 AT159 AT182 AT056 AT056A AT048 AT075 AT017A AT077A AT045A AT079 AT080 AT080A AT081A AT081 Especificações dos Meios Ref. Modelo
- 8. Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) HiGlutaXL Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) HiGlutaXL Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) HiGlutaXL Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) HiGlutaXL Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) HiGlutaXL Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) LoSera Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) LoSera Meio Essencial Mínimo Eagle (MEM) COM sais de Earle e bicarbonato de sódio / SEM NEAA e L-Glutamina COM sais de Earle, L-Glutamina, e 2.2gm/L de bicarbonato de sódio / SEM NEAA COM sais de Earle, NEAA e bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM sais de Earle, L-Glutamina, NEAA e 2.2 gm/L de bicarbonato de sódio COM sais de Earle, NEAA e L-Glutamina e bicarbonato de sódio, Testado para Hibridoma COM sais de Earle, NEAA, L-Glutamina 2mM, piruvato de sódio 1mM E 1.5 g/L de bicarbonato de sódio COM sais de Earle, L-Glutamina, piruvato de sódio e bicarbonato de sódio COM sais de Earle, NEAA, L-Glutamina e bicarbonato de sódio / SEM Vermelho Fenol COM sais de Earle, L-Glutamina, NEAA, tampão HEPES 15mM, piruvato de sódio e bicarbonato de sódio COM sais de Earle, tampão de HEPES 25 mM e bicarbonato de sódio / SEM NEAA e L-Glutamina COM sais de Hank e bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM sais de Hank, L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM sais de HANK, L-Glutamina, tamão HEPES 25mM e bicarbonato de sódio COM sais de Spinner e bicarbonato de sódio COM bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina, Ribonucleosídeos e Deoxiribonucleosídeos COM L-Glutamina e bicarbonato de sódio / SEM Deoxiribonucleosídeos e Ribonucleosídeos COM Ribonucleosídeos, deoxiribonucleosídeos e bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM Ribonucleosídeos, deoxiribonucleosídeos, L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM sais de Earle e NEAA / SEM bicarbonato de sódio e L-Glutamina COM sais de Hank / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM sais de Earle / SEM NEAA, L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM L-Alanil-L-Glutamina, sais de Earle e bicarbonato de sódio / SEM NEAA COM L-Alanil-L-Glutamina, sais de Earle, NEAA e bicarbonato de sódio COM L-Alanil-L-Glutamina, sais de Hank e bicarbonato de sódio COM L-Alanil-L-Glutamina, deoxiribonucleosídeos e ribonucleosídeos e bicarbonato de sódio COM L-Alanil-L-Glutamina e bicarbonato de sódio / SEM deoxiribonucleosídeos e ribonucleosídeos COM sais de Earle e 1.5 g/L de bicarbonato de sódio / SEM NEAA e L-Glutamina COM sais de Earle, NEAA e Bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM sais de Earle, L-Alanil-L-Glutamina, NEAA e bicarbonato de sódio AL020 AL020A AL047 AL047A AL047H AL047S AL154A AL178A AL182A AL194 AL056 AL056A AL75A AL019 AL079 AL081 AL081A AL080 AL080A AL104 AL190 AL191 AL020G AL047G AL056G AL080G AL081G AL020S RSL008 RSL008G Especificações dos Meios Ref. Modelo
- 9. Meio RPMI-1640 OMeio Roswell Park Memorial Institute (RPMI) faz parte de uma série de meios desenvolvidos por Moore et al para cultura in vitro de células humanas e neoplásicas. O meio RPMI-1640 é uma modificação do meio McCoy 5A e foi desenvolvido especificamente para auxiliar no crescimento de linfoblastos humanos cultivados em suspensão. Este meio é muito utilizado para linhagens celulares dependentes. Este meio necessita de suplementação com 5-20% de soro fetal bovino. O meio também pode ser utilizado para o crescimento de células quando há ausência de soro. Adequação do meio RMPI-1640 para cultura de múltiplos tipos celulares HiMedia Concorrente Contagemdecélulas(milhões/mL) Linhagens Celulares Figura 1.1 Comparação do desempenho do meio RPMI-1640 da HiMedia e do concorrente em diferentes tipos celulares. O meio RPMI-1640 foi suplementado com FBS (Soro Fetal Bovino) 10% e comparado com o meio do fornecedor para promover o crescimento em vários tipos celulares. Aplicações: • Cultivo de células sanguíneas mononucleares periféricas e outras células primárias. • Cultivo de linhagens celulares dependentes de ancoragem.
- 10. CélulasJurkat(milhões/mL) N° de dias Figura 1.2 Curva de crescimento para linhagem celular de Jurkat HiMedia Concorrente HiMedia Concorrente As células Jurkat foram semeadas em 0.1 X 106 células/mL triplamente em microplacas de 24 poços e incubados a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. As amostras foram coletadas diariamente após dois dias e foram avaliadas quanto a morfologia e a densidade das células. Foram comparadas a morfologia e o crescimento celular entre as células cultivadas com o meio da HiMedia e do concorrente. As células Daudi foram semeadas em 0.1 X 106 triplamente em microplacas de 24 poços e incubadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. As amostras foram coletadas diariamente após dois dias e foram avaliadas a densidade e morfologia das células. Foram comparados o crescimento e a morfologia das células que utilizaram o meio da HiMedia com o do concorrente. CélulasDaudi(milhões/mL) N° de dias Figura 1.3 Curva de crescimento para linhagem celular Daudi.
- 11. As células BHK-21 foram semeadas em 0.04 X 106 células/mL e incubadas a 37°C com 5% de CO2 e 95% de ar. As células foram monitoradas e avaliadas quanto a densidade e morfologia. Foram comparadas a morofologia e o crescimento celular entre as células cultivadas com o meio da HiMedia e do concorrente. CélulasBHK-21(milhões/mL) N° de dias Figura 1.4 Série de subculturas de células BHK-21. RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 COM L-Glutamina / SEM bicarbonato de sódio SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina / SEM ácido fólico e bicarbonato de sódio SEM L-Glutamina, Vermelho fenol e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina / SEM Vermelho fenol e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina e tampão HEPES 25mM / SEM bicarbonato de sódio COM tampão HEPES 25mM / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina / SEM Glicose e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, Vermelho fenol, 0.2% de Glicose e 0.165 mols por litro de tampão MOPS / SEM bicarbonato de sódio COM L-Glutamina e tampão HEPES 25mM / SEM L-Arginina e bicarbonato de sódio COM tampão HEPES 25mM / SEM L-Glutamina, Vermelho fenol e bicarbonato de sódio SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio (Modificado por autoclavagem) SEM ácido fólico, L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM tampão HEPES 25mM e piruvato de sódio / SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina, piruvato de sódio, 4.5 gm/L de Glicose e tampão HEPES 10mM / SEM bicarbonato de sódio COM L-Glutamina 2 mM, piruvato de sódio 1mM, 4,5g/l de glicose,tampão HEPES 10mM / SEM vermelho fenol e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina / SEM Ácido fólico, Vermelho fenol e bicarbonato de sódio AT028 AT028A AT028F AT112A AT120 AT060 AT060A AT150 AT180 AT129 AT113A AT126A AT161A AT157A AT162 AT171 AT181 Especificações dos Meios Ref. Modelo HiMedia Concorrente
- 12. RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 COM bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina, Teste de Hibridoma COM bicarbonato de sódio / SEM ácido fólico e L-Glutamina COM tampão HEPES 25mM e bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM L-Glutamina, tampão HEPES 25mM e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina e bicarbonato de sódio / SEM Vermelho fenol COM piruvato de sódio 1mM, L-Glutamina 2mM, 4.5 gm/L de Glicose, tampão HEPES 10mM e 2gm/L bicarbonato de sódio COM piruvato de sódio 1mM, L-Glutamina 2mM, 4.5gm/L de glicose, tampão HEPES 10mM e 1.5gm/L de bicarbonato de sódio COM tampão HEPES 25mM, bicarbonato de sódio e piruvato de sódio / SEM L-Glutamina COM piruvato de sódio 1mM, L-Glutamina 2mM, 4.5gm/L de Glicose, tampão HEPES 10mM e bicarbonato de sódio / SEM vermelho fenol COM L-Glutamina, 2 gm/L de glicose, Tampão MOPS 0.165mols/L e bicarbonato de sódio SEM L-Glutamina e bicarbonato de sódio COM L-Glutamina e bicarbonato de sódio / SEM Ácido fólico e Vermelho fenol COM L-Glutamina e tampão HEPES 20mM / SEM bicarbonato de sódio COM Tampão HEPES 20mM e 1gm/L de bicarbonato de sódio / SEM L-Glutamina COM L-Glutamina, 2mg/L de Glicose, 0.165 mols/L de tampão MOPS / SEM bicarbonato de sódio COM Piruvato de sódio 1mM, L-Glutamina 2mM, 4.5gm/L de Glicose e 1.5gm/L de Bicarboato de Sódio / SEM tampão HEPES COM tampão HEPES 25mM, L-Glutamina e 2.2gm/L de Bicarbonato de sódio AL028 AL028A AL028B AL028F AL060 AL060A AL120A AL162A AL162S* AL157 AL171A AL180A AL102 AL181A AL197A AL198 AL200A AL199S AL201A RPMI-1640 HikaryoXL™ COM L-Glutamina, FBS, PHA-M, Penicilina, streptomicina e bicarbonato de sódio. 1x Meio líquido Karyotyping AL165A RPMI-1640 HikaryoXL™ COM L-Glutamina, FBS, PHA-M, Penicilina, streptomicina e bicarnonato de sódio / SEM PHA-M 1x Meio líquido Karyotyping AL173A RPMI-1640 HikaryoXL™ COM L-alanina-L-Glutamina e bicarnonato de sódio AL028G RPMI-1640 HikaryoXL™ COM L-alanina-L-Glutamina e bicarnonato de sódio, tampão HEPES, 60g/L de penicilina, 100g/L de estreptomicina, 15% FBS e bicarnonato de sódio. AL751G RPMI-1640 HikaryoXL™ COM L-alanina-l-glutamina, 25mM de tampão HEPES e bicarbonato de sódio. AL060G RPMI-1640 LoSera™ COM Bicarbonato de sódio / SEM L-glutamina RSL011 RPMI-1640 LoSera™ COM L-alanina-l-glutamina e bicarbonato de sódio RSL011G RPMI-1640 LoSera™ COM Tampão HEPES e bicarbonato de sódio / SEM L-glutamina RSL012 Especificações dos Meios Ref. Modelo Meio Líquido