Microrganismos e
indústria alimentar
Biologia
Processos de transformação de
alimentos por microrganismos
Atualmente, as transformações dos
produtos alimentares em grandes
quantidades é feita nos
biorreatores.
1.1 Fermentação e atividade enzimática
1.2 Fatores que afetam a atividade enzimática
1.3 Inibição enzimática
1.4 Controle de vias metabólicas
1.5 Fermentações
Pode a biotecnologia resolver os problemas de produção e de conservação de alimentos?
De que forma os microrganismos transformam os alimentos?
Como se caracteriza a atividade enzimática?
História da humanidade: processos com objetivo de produzir e transformar alimentos
Importância dos microrganismos: Pasteur provou que na fermentação alcoólica intervêm
microrganismos (1857)
No presente: A biotecnologia permite métodos mais sofisticados do que nas técnicas tradicionais
Aumento da produtividade
Estabilização da qualidade dos alimentos obtidos
Alimentos produzidos ou transformados por microrganismos.
Fermentação e atividade enzimática
Metabolismo: conjunto de todos os processos químicos realizados por um organismo
Processos fermentativos resultam do metabolismo dos microrganismos
Reações celulares com transferências de
energia:
Metabolismo.
Anabolismo- síntese de moléculas complexas
a partir de moléculas simples, com consumo
de energia
Catabolismo- degradação de moléculas
complexas, formando-se moléculas simples,
com libertação de energia
Metabolismo
Fermentação e atividade enzimática
Energia de ativação.
Ligações químicas: quebra e formação requerem energia (cinética)
Geralmente, necessário fornecer energia ao sistema, para desencadear a reação – energia de ativação
Reação exergónica ou exoenergética- os produtos possuem
maior quantidade de energia do que os reagentes
Reação endergónica ou endoenergética- os produtos possuem
menor quantidade de energia do que os reagentes
Fermentação e atividade enzimática
Enzimas- são catalisadores biológicos/biocatalisadores, diminuem a energia de ativação necessária para
o início de uma reação química
Enzimas- aceleram reações químicas a nível celular
Permitem o metabolismo sem alterar condições de
temperatura
As enzimas diminuem a energia de ativação.
Fermentação e atividade enzimática
Especificidade de enzimas: cada enzima catalisa apenas um tipo de reação, e grande parte atua apenas
sobre um determinado substrato
Especificidade absoluta- enzima atua apenas sobre um tipo de substrato (ex. amílase)
Especificidade relativa- enzima atua sobre um grupo de substratos, quimicamente semelhantes
Centro ativo- região da enzima de ligação ao
substrato
Complexo enzima-substrato- ligação entre
substrato e centro ativo
Formação do complexo enzima-substrato.
Produto- resulta da transformação do substrato
Atuação enzimática.
Fermentação e atividade enzimática
Algumas enzimas exclusivamente de natureza proteica
Formação do complexo enzima-substrato.
Algumas enzimas apenas se tornam ativas quando ligadas a outras substâncias - cofatores
Apoenzima- molécula de natureza proteica
Cofator- substância de natureza não proteica
Holoenzima- enzima ativa, resultante da ligação apoenzima-cofator
Ex. iões metálicos (magnésio (Mg2+), cálcio (Ca2+), ferro (Fe2+), cobre (Cu2+);
coenzimas (compostos de natureza não proteica, como vitaminas)
Fatores que afetam atividade enzimática
Fermentação e atividade enzimática
Temperatura: baixa ou elevada, inativação de enzimas como a catalase
Inativação reversível Inativação irreversível
Estrutura globular das proteínas é afetada pela temperatura
Desnaturação: sujeitas a temperaturas elevadas, as proteínas perdem atividade
biológica por modificação do centro ativo
Compactação: sujeitas a temperaturas baixas, as ligações com o substrato são dificultadas, mas a situação é reversível
Desnaturação de uma enzima.
Fatores que afetam atividade enzimática
pH: pode alterar a distribuição de cargas elétricas; interfere com conformação do centro ativo
Fermentação e atividade enzimática
Fatores que condicionam a atividade enzimática.
Temperatura, pH, concentração da enzima e concentração do substrato
Inibição enzimática
Fermentação e atividade enzimática
Inibidores- moléculas que inibem as enzimas, de forma reversível ou irreversível
Inibição reversível Inibição irreversível
- Ligação temporária dos inibidores à enzima
- Após dissociação a enzima permanece funcional
- Ligações fracas entre enzima e inibidor
- Ligação permanente dos inibidores à enzima
- Inativação ou destruição da enzima
- Por exemplo: venenos
Inibição competitiva ou não competitiva
Inibição enzimática
Fermentação e atividade enzimática
Inibição competitiva Inibição não competitiva
- Inibidor competete com substrato normal
- Inibidor estruturalmente idêntico ao substrato
- Ocupa temporariamente o centro ativo, depende da
relação entre concentração do inibidor e concentração
do substrato
- Inibidor liga-se à enzima num local que não o centro ativo
- Inibidor estruturalmente diferente do substrato
- Inativação da enzima por alteração da conformação do
centro ativo
Controle de vias metabólicas
Fermentação e atividade enzimática
Uma célula > Diversas enzimas > Diversas reações
Reações ocorrem de forma sequencial e não isolada
Via metabólica: cadeia de reação, catalisada por
uma sequência de enzimas, em que o produto de
uma reação é usado como substrato da seguinte
Regulada por substâncias que se ligam à enzima –
centro alostérico – e modificando a sua
conformação
Esquema simplificado de uma via metabólica.
Fermentação: processo metabólico realizado por alguns microrganismos com objetivo de obter energia
a partir de nutrientes (processo catabólico)
Fermentação e atividade enzimática
Conjunto de reações de oxidação-redução, catalisadas por enzimas, na ausência de oxigénio
Compostos orgânicos como dadores e aceitadores de eletrões, produção de ATP por fosforilação do substrato
Glicólise (via de Embden-Meyerhof): via metabólica que conduz à fermentação da glicose (presença ou ausência de
O2)
Na ausência de O2:
1. Formação de gliceraldeído-3-fosfato: formação de 2 moléculas de gliceraldeído-3-fosfato (sem síntese ATP)
2. Formação de ácido pirúvico: reações de oxidação e de redução, formação de 2 moléculas de ácido pirúvico
(com síntese de moléculas de ATP)
3. Redução do ácido pirúvico: reações de oxidação e de redução, formação de produtos de fermentação
(etanol, dióxido de carbono, ácido láctico, ácido acético, etc.)
Via metabólica de degradação da glicose
(glicólise) e formação de produtos de
fermentação.
Biologia
Biologia
Realizada por leveduras,
com produção de etanol
e dióxido de carbono.
Produção de alimentos
Fermentação
Alcoólica Lática
Realizada por bactérias
láticas, com produção
de ácido lático.
Glicose
(C6H12O6)
Ácido
pirúvico
(3C)
Ácido
pirúvico
(3C)
Ácido lático
(C3H8OH)
NAD
2 NAD+ 2 ADP + 2P
2 NADH 2 ATP
Bactéria do
ácido lático
NADH2
NAD
NADH2
Ácido lático
(C3H8OH)
Glicose
(C6H12O6)
Ácido
pirúvico
(3C)
Ácido
pirúvico
(3C)
Etanol
(C3H8OH)
Etanol
(C3H8OH)
CO2 CO2
2 NAD+ 2 ADP + 2P
2 NADH 2 ATP
Levedura
NAD
NADH2
NAD
NADH2
Diversos tipos de fermentação: alguns responsáveis por produtos alimentares humanos
Fermentação e atividade enzimática
Diversidade de produtos > Diversidade de reações de redução do ácido pirúvico
Diversidade de enzimas + Diversidade de condições ambientais
dependentes
Tipos de fermentação mais relevantes: láctica e alcoólica (acética, mas não é verdadeira fermentação)
Fermentação láctica: envolvimento de bactérias e formação de ácido láctico
Fermentação e atividade enzimática
Fermentação homoláctica: produção de grandes quantidades de ácido láctico, o principal
produto obtido; fabrico de iogurtes e queijos, bactérias Lactobacillus sp. e Streptococcus sp.
Fermentação heteroláctica: formação de ácidos láctico e outros produtos, como ácido
acético, etanol e dióxido de carbono, fabrico de certos queijos e leites fermentados
Fermentação alcoólica: envolvimento de leveduras (na ausência de O2), em particular
Saccharomyces cerevisae, produção de etanol e dióxido de carbono
Fermentação e atividade enzimática
Produção de:
Bebidas alcoólicas- obtenção do etanol, evaporando-se o CO2,
por ação de leveduras
Pão- obtenção do dióxido de carbono, que forma bolhas que
ficam aprisionadas na massa, e evaporação do álcool
“Fermentação” acética: produção de vinagre por alteração do vinho, por ação de bactérias acéticas
Fermentação e atividade enzimática
Bactérias do género Acetobacter e Gluconobacter, crescem na superfície do vinho ou outras bebidas alcoólicas
“Fermentação” no sentido clássico- alteração de um composto orgânico por ação de microrganismos
Bactérias promovem oxidação do etanol com formação de ácido acético
Alimentos produzidos ou transformados por microrganismos.
Um exemplo de reação anabólica poderá ser
a) a hidrólise do ATP.
b) a desaminação no ciclo de Krebs.
c) a lise da glicose.
d) a fosforilação de ADP em ATP.
Numa reação endoenergética
a) a energia de ativação é inferior à energia acumulada nos produtos.
b) a energia acumulada nos produtos é inferior à energia de ativação.
c) não é requerida energia de ativação.
d) apenas está envolvida energia de ativação.
As RNA polimerases atuam sobre genes, ao nível da transcriação.
Classifica estas enzimas quanto à sua especificidade.
As RNA polimerases apresentam especificidade relativa (atuam sobre um grupo de
substratos de natureza idêntica).
Indica qual das situações representadas na imagem, (a) ou (b), poderá corresponder a inibição enzimática.
Situação (b).
Representação da ação enzimática (imagem retirada de https://wikiciencias.casadasciencias.org/
Refere qual o tipo de inibição enzimática representada.
Inibição enzimática competitiva.
Faz corresponder um algarismo da coluna II a cada um dos conceitos da coluna I.
A- 6 B- 1 C- 2 D- 7 E- 4
Coluna I Coluna II
A. Centro ativo.
B. Ligação do substrato à enzima.
C. Libertação de produtos da reação.
D. Inibidor enzimático.
E. Inibidor compete com o substrato.
1. Etapa (1)
2. Etapa (2)
3. Etapa (3)
4. Etapa (4)
5. Elemento S
6. Elemento A
7. Elemento I
Representação da ação enzimática (imagem retirada de https://wikiciencias.casadasciencias.org/
Explica por que razão a velocidade de uma reação enzimática não aumenta indefinidamente com o aumento da
concentração de substrato.
A reação enzimática implica a ligação da enzima ao substrato (formação do complexo
enzima-substrato): apenas quando é libertado o produto da reação, a enzima volta a
ficar livre para nova ligação ao substrato, pelo que o aumento da concentração deste
não é acompanhado, de forma indefinida, por um aumento da velocidade da reação
enzimática.
Relaciona os processos fermentativos com a conservação de produtos alimentares, indicando o(s) fator(es) que
afeta(m) a atividade enzimática dos microrganismos que provocam oxidação dos alimentos.
Durante alguns processos fermentativos podem formar-se ácidos, que alteram o pH
da mistura. A diminuição do pH poderá inibir a atividade enzimática de
microrganismos que causam a oxidação de alimentos, conservando assim os
mesmos/aumentando o seu prazo de validade.
Microrganismos e indústria alimentar.pdf

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    Biologia Processos de transformaçãode alimentos por microrganismos Atualmente, as transformações dos produtos alimentares em grandes quantidades é feita nos biorreatores.
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    1.1 Fermentação eatividade enzimática 1.2 Fatores que afetam a atividade enzimática 1.3 Inibição enzimática 1.4 Controle de vias metabólicas 1.5 Fermentações
  • 5.
    Pode a biotecnologiaresolver os problemas de produção e de conservação de alimentos? De que forma os microrganismos transformam os alimentos? Como se caracteriza a atividade enzimática?
  • 6.
    História da humanidade:processos com objetivo de produzir e transformar alimentos Importância dos microrganismos: Pasteur provou que na fermentação alcoólica intervêm microrganismos (1857) No presente: A biotecnologia permite métodos mais sofisticados do que nas técnicas tradicionais Aumento da produtividade Estabilização da qualidade dos alimentos obtidos Alimentos produzidos ou transformados por microrganismos.
  • 7.
    Fermentação e atividadeenzimática Metabolismo: conjunto de todos os processos químicos realizados por um organismo Processos fermentativos resultam do metabolismo dos microrganismos Reações celulares com transferências de energia: Metabolismo. Anabolismo- síntese de moléculas complexas a partir de moléculas simples, com consumo de energia Catabolismo- degradação de moléculas complexas, formando-se moléculas simples, com libertação de energia Metabolismo
  • 8.
    Fermentação e atividadeenzimática Energia de ativação. Ligações químicas: quebra e formação requerem energia (cinética) Geralmente, necessário fornecer energia ao sistema, para desencadear a reação – energia de ativação Reação exergónica ou exoenergética- os produtos possuem maior quantidade de energia do que os reagentes Reação endergónica ou endoenergética- os produtos possuem menor quantidade de energia do que os reagentes
  • 9.
    Fermentação e atividadeenzimática Enzimas- são catalisadores biológicos/biocatalisadores, diminuem a energia de ativação necessária para o início de uma reação química Enzimas- aceleram reações químicas a nível celular Permitem o metabolismo sem alterar condições de temperatura As enzimas diminuem a energia de ativação.
  • 10.
    Fermentação e atividadeenzimática Especificidade de enzimas: cada enzima catalisa apenas um tipo de reação, e grande parte atua apenas sobre um determinado substrato Especificidade absoluta- enzima atua apenas sobre um tipo de substrato (ex. amílase) Especificidade relativa- enzima atua sobre um grupo de substratos, quimicamente semelhantes Centro ativo- região da enzima de ligação ao substrato Complexo enzima-substrato- ligação entre substrato e centro ativo Formação do complexo enzima-substrato. Produto- resulta da transformação do substrato
  • 11.
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    Fermentação e atividadeenzimática Algumas enzimas exclusivamente de natureza proteica Formação do complexo enzima-substrato. Algumas enzimas apenas se tornam ativas quando ligadas a outras substâncias - cofatores Apoenzima- molécula de natureza proteica Cofator- substância de natureza não proteica Holoenzima- enzima ativa, resultante da ligação apoenzima-cofator Ex. iões metálicos (magnésio (Mg2+), cálcio (Ca2+), ferro (Fe2+), cobre (Cu2+); coenzimas (compostos de natureza não proteica, como vitaminas)
  • 13.
    Fatores que afetamatividade enzimática Fermentação e atividade enzimática Temperatura: baixa ou elevada, inativação de enzimas como a catalase Inativação reversível Inativação irreversível Estrutura globular das proteínas é afetada pela temperatura Desnaturação: sujeitas a temperaturas elevadas, as proteínas perdem atividade biológica por modificação do centro ativo Compactação: sujeitas a temperaturas baixas, as ligações com o substrato são dificultadas, mas a situação é reversível Desnaturação de uma enzima.
  • 14.
    Fatores que afetamatividade enzimática pH: pode alterar a distribuição de cargas elétricas; interfere com conformação do centro ativo Fermentação e atividade enzimática Fatores que condicionam a atividade enzimática. Temperatura, pH, concentração da enzima e concentração do substrato
  • 15.
    Inibição enzimática Fermentação eatividade enzimática Inibidores- moléculas que inibem as enzimas, de forma reversível ou irreversível Inibição reversível Inibição irreversível - Ligação temporária dos inibidores à enzima - Após dissociação a enzima permanece funcional - Ligações fracas entre enzima e inibidor - Ligação permanente dos inibidores à enzima - Inativação ou destruição da enzima - Por exemplo: venenos Inibição competitiva ou não competitiva
  • 16.
    Inibição enzimática Fermentação eatividade enzimática Inibição competitiva Inibição não competitiva - Inibidor competete com substrato normal - Inibidor estruturalmente idêntico ao substrato - Ocupa temporariamente o centro ativo, depende da relação entre concentração do inibidor e concentração do substrato - Inibidor liga-se à enzima num local que não o centro ativo - Inibidor estruturalmente diferente do substrato - Inativação da enzima por alteração da conformação do centro ativo
  • 17.
    Controle de viasmetabólicas Fermentação e atividade enzimática Uma célula > Diversas enzimas > Diversas reações Reações ocorrem de forma sequencial e não isolada Via metabólica: cadeia de reação, catalisada por uma sequência de enzimas, em que o produto de uma reação é usado como substrato da seguinte Regulada por substâncias que se ligam à enzima – centro alostérico – e modificando a sua conformação Esquema simplificado de uma via metabólica.
  • 18.
    Fermentação: processo metabólicorealizado por alguns microrganismos com objetivo de obter energia a partir de nutrientes (processo catabólico) Fermentação e atividade enzimática Conjunto de reações de oxidação-redução, catalisadas por enzimas, na ausência de oxigénio Compostos orgânicos como dadores e aceitadores de eletrões, produção de ATP por fosforilação do substrato Glicólise (via de Embden-Meyerhof): via metabólica que conduz à fermentação da glicose (presença ou ausência de O2) Na ausência de O2: 1. Formação de gliceraldeído-3-fosfato: formação de 2 moléculas de gliceraldeído-3-fosfato (sem síntese ATP) 2. Formação de ácido pirúvico: reações de oxidação e de redução, formação de 2 moléculas de ácido pirúvico (com síntese de moléculas de ATP) 3. Redução do ácido pirúvico: reações de oxidação e de redução, formação de produtos de fermentação (etanol, dióxido de carbono, ácido láctico, ácido acético, etc.)
  • 19.
    Via metabólica dedegradação da glicose (glicólise) e formação de produtos de fermentação.
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    Biologia Biologia Realizada por leveduras, comprodução de etanol e dióxido de carbono. Produção de alimentos Fermentação Alcoólica Lática Realizada por bactérias láticas, com produção de ácido lático. Glicose (C6H12O6) Ácido pirúvico (3C) Ácido pirúvico (3C) Ácido lático (C3H8OH) NAD 2 NAD+ 2 ADP + 2P 2 NADH 2 ATP Bactéria do ácido lático NADH2 NAD NADH2 Ácido lático (C3H8OH) Glicose (C6H12O6) Ácido pirúvico (3C) Ácido pirúvico (3C) Etanol (C3H8OH) Etanol (C3H8OH) CO2 CO2 2 NAD+ 2 ADP + 2P 2 NADH 2 ATP Levedura NAD NADH2 NAD NADH2
  • 21.
    Diversos tipos defermentação: alguns responsáveis por produtos alimentares humanos Fermentação e atividade enzimática Diversidade de produtos > Diversidade de reações de redução do ácido pirúvico Diversidade de enzimas + Diversidade de condições ambientais dependentes Tipos de fermentação mais relevantes: láctica e alcoólica (acética, mas não é verdadeira fermentação)
  • 22.
    Fermentação láctica: envolvimentode bactérias e formação de ácido láctico Fermentação e atividade enzimática Fermentação homoláctica: produção de grandes quantidades de ácido láctico, o principal produto obtido; fabrico de iogurtes e queijos, bactérias Lactobacillus sp. e Streptococcus sp. Fermentação heteroláctica: formação de ácidos láctico e outros produtos, como ácido acético, etanol e dióxido de carbono, fabrico de certos queijos e leites fermentados
  • 23.
    Fermentação alcoólica: envolvimentode leveduras (na ausência de O2), em particular Saccharomyces cerevisae, produção de etanol e dióxido de carbono Fermentação e atividade enzimática Produção de: Bebidas alcoólicas- obtenção do etanol, evaporando-se o CO2, por ação de leveduras Pão- obtenção do dióxido de carbono, que forma bolhas que ficam aprisionadas na massa, e evaporação do álcool
  • 24.
    “Fermentação” acética: produçãode vinagre por alteração do vinho, por ação de bactérias acéticas Fermentação e atividade enzimática Bactérias do género Acetobacter e Gluconobacter, crescem na superfície do vinho ou outras bebidas alcoólicas “Fermentação” no sentido clássico- alteração de um composto orgânico por ação de microrganismos Bactérias promovem oxidação do etanol com formação de ácido acético Alimentos produzidos ou transformados por microrganismos.
  • 25.
    Um exemplo dereação anabólica poderá ser a) a hidrólise do ATP. b) a desaminação no ciclo de Krebs. c) a lise da glicose. d) a fosforilação de ADP em ATP. Numa reação endoenergética a) a energia de ativação é inferior à energia acumulada nos produtos. b) a energia acumulada nos produtos é inferior à energia de ativação. c) não é requerida energia de ativação. d) apenas está envolvida energia de ativação.
  • 26.
    As RNA polimerasesatuam sobre genes, ao nível da transcriação. Classifica estas enzimas quanto à sua especificidade. As RNA polimerases apresentam especificidade relativa (atuam sobre um grupo de substratos de natureza idêntica).
  • 27.
    Indica qual dassituações representadas na imagem, (a) ou (b), poderá corresponder a inibição enzimática. Situação (b). Representação da ação enzimática (imagem retirada de https://wikiciencias.casadasciencias.org/ Refere qual o tipo de inibição enzimática representada. Inibição enzimática competitiva.
  • 28.
    Faz corresponder umalgarismo da coluna II a cada um dos conceitos da coluna I. A- 6 B- 1 C- 2 D- 7 E- 4 Coluna I Coluna II A. Centro ativo. B. Ligação do substrato à enzima. C. Libertação de produtos da reação. D. Inibidor enzimático. E. Inibidor compete com o substrato. 1. Etapa (1) 2. Etapa (2) 3. Etapa (3) 4. Etapa (4) 5. Elemento S 6. Elemento A 7. Elemento I Representação da ação enzimática (imagem retirada de https://wikiciencias.casadasciencias.org/
  • 29.
    Explica por querazão a velocidade de uma reação enzimática não aumenta indefinidamente com o aumento da concentração de substrato. A reação enzimática implica a ligação da enzima ao substrato (formação do complexo enzima-substrato): apenas quando é libertado o produto da reação, a enzima volta a ficar livre para nova ligação ao substrato, pelo que o aumento da concentração deste não é acompanhado, de forma indefinida, por um aumento da velocidade da reação enzimática.
  • 30.
    Relaciona os processosfermentativos com a conservação de produtos alimentares, indicando o(s) fator(es) que afeta(m) a atividade enzimática dos microrganismos que provocam oxidação dos alimentos. Durante alguns processos fermentativos podem formar-se ácidos, que alteram o pH da mistura. A diminuição do pH poderá inibir a atividade enzimática de microrganismos que causam a oxidação de alimentos, conservando assim os mesmos/aumentando o seu prazo de validade.