biologia

1. ESTRUTURA DOS ÁCIDOS
NUCLÉICOS
- Base nitrogenada – Anel heterocíclico de átomos de carbono e nitrogênio
- Pentose – Açúcar com cinco carbonos
- Grupo fosfato – Molécula com um átomo de fósforo cercado por 4 oxigênios.

2. ESTRUTURA DE UM GENE
DE EUCARIOTO

3. CÓDIGO GENÉTICO
A correspondência do
alfabeto de 4 letras de
nucleotídeos do DNA
e as 20 letras do
alfabeto de
aminoácidos das
proteínas formam o
Código genético.

4. EXPRESSÃO GÊNICA
▪ A expressão gênica é a leitura do código genético de acordo
com as necessidades metabólicas das células pela qual se dá a
produção de proteínas.

5. ESTRUTURA DO RNA
▪ O açúcar é uma ribose;
▪ É formado geralmente por uma fita simples
que pode enrolar-se;
▪ Não existe a base pirimídica Timina, no
seu lugar encontra-se a Uracila;
▪ Os pareamentos por complementariedade de
bases seguem a ordem:

6. RIBOSE E DESORRIBOSE
▪ Diferem uma da outra pela presença ou ausência do grupo
hidroxila no carbono C 2’ da pentose

7. MARCADORES MOLECULARES
⮚ Tecnologias de análise molecular da variabilidade
do DNA que permitem determinar pontos de
referência nos cromossomos, são tecnicamente
denominados
“marcadores moleculares”
marcadores
Cromossomo

8. MARCADORES MOLECULARES DETECÇÃO
DE POLIMORFISMOS

9. MARCADORES MOLECULARES

10. POLIMORFISMOS MOLECULARES

11. MARCADORES MOLECULARES
▪ RAPD

12. MARCADORES MOLECULARES
▪ RAPD

13. MARCADORES MOLECULARES
▪ AFLP

14. MARCADORES MOLECULARES
▪ AFLP

15. MARCADORES MOLECULARES
▪ AFLP

16. AFLP

17. RFLP

18. MARCADORES MOLECULARES
▪ Microssatélite (SSR)

19. MARCADORES MOLECULARES
▪ Microssatélite (SSR)

20. MARCADORES MOLECULARES
▪ SNPs
Há diversas maneiras de se avaliar a variação:
• Alinhamento e comparação de sequências
• Métodos baseados em géis
• Métodos baseados em chips
• Sequenciamento de 2ª geração, etc.

21. MARCADORES MOLECULARES
Abundante no
genoma humano
▪ SNPs

22. ▪ Existem um total de 27 métodos para a análise de expressão gênica em
larga escala (Shimkets et al. 2004).
a) Hibridização de
fitas de cDNA
b) Sequenciamento e contagem
de transcritos
-EST’s (Expressed Sequence Tags)
-SAGE (Serial Analyses of Gene
Expression)
-MPSS (Massively Parallel
Signature Sequencing)
-Southern blotting
-Northern blotting
-Microarranjo (microarray)
MARCADORES EM TRANSCRITOMA

23. MARCADORES EM TRANSCRITOMA
▪ EST’s
▪ Correspondem a pedaços de genes expressos derivados de
mRNAs, representados em cDNA.
Figura 1. Produção de ESTs e
3’- Encontra
ancorado ao
▪ ESTs
poli-A.
▪ EST 5’ – Seu conteúdo varia
dependendo do tamanho do RNA,
do inserto clonado e do splicing do
gene.

24. MARCADORES EM TRANSCRITOMA
SAGE
O método de SAGE consiste na quantificação em larga escala de
mRNA de genoma eucarioto
Três princípios básicos:
• As tags são fixadas a uma pequena distância, próximas da cauda poli-A do
transcrito.
• Concatenação dessas tags lado a lado.
• O nível de expressão de um transcrito é quantificado pelo número de vezes
que uma tag é detectada.
Comparado com o EST’s, o SAGE apresenta maior rendimento
e menor custo