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Microscopia de sementes e mudas
- 1. LFT 5770 - PATOLOGIA DE SEMENTES E MUDAS MICROSCOPIA Liliane De Diana Teixeira
- 2. Categorias de Microscópios LUMINOSO - Ondas luminosas - ESTEREOSCÓPICO: 10 a 35 / 50 x - ÓPTICO: 60 a 1.000 x ELETRÔNICO - Feixe de elétrons - VARREDURA: 20 a 100.000 x - TRASMISSÃO: 1.000 a 500.000 x UNIDADE DE MEDIDA LINEAR – ESCALA MICROSCÓPICA - Microm (µm): 10-3 mm; 10-4 cm - 0,2 µm: Menor objeto observado com nitidez M.O.
- 3. Partes do Microscópio Estereoscópico Ajuste do macrométrico Oculares Pinça para a fixação do material a ser observado Base de trabalho
- 4. Partes do Microscópio Óptico Oculares Aumento 10 x Revólver Objetivas Presilha do Charriot Mesa Diafragma Condensador Fonte de luz Macrométrico Charriot Micrométrico Base Aumento de 4 = faixa vermelha Aumento de 10 = faixa amarela Aumento de 40 = faixa azul Aumento de 100 = faixa branca (apenas para bactéria / com óleo imersão) CUIDADO!
- 5. CUIDADOS ESPECIAIS PARA INICIAR A ANÁLISE JAMAIS ARRASTE OU DÊ TRANCO NOS MICROSCÓPIOS! 1. Antes de ligar o microscópio à tomada, verificar se o potenciômetro da lâmpada está no mínimo (caso não esteja, poderá queimar a lâmpada); 2. Verificar se a lente objetiva posicionada para observação é a de menor aumento (4x – vermelha); caso não esteja, posicioná-la; 3. Baixar a mesa ao mínimo para evitar raspar a lente na lâmina colocada sobre ela; 4. Colocar a lâmina sobre a mesa e subir lentamente até encontrar o foco do objeto; 5. Para passar a lente objetiva para os próximos aumentos não há necessidade de alterar a altura da mesa, mas sim, acertar o foco após a mudança.
- 6. Focalização ao microscópio óptico Iniciar sempre com a objetiva de menor aumento (4 x) 1. Objeto no centro da mesa 2. Ajustar a iluminação (maior quantidade de luz através do objeto) 3. Elevar a mesa até a altura máxima utilizando o macrométrico 4. Iniciar o processo de focalização, com a menor objetiva (10x) abaixando vagarosamente a mesa com o macrométrico 5. Fazer a focalização fina – micrométrico 6. Mudar a objetiva para 40x e utilizar apenas o micrométrico para focalização final (Se necessário: 100 x apenas com oléo imersão) 7. Acertar a quantidade de luz 8. Condensador deve permanecer sempre em posição elevada
- 7. Ao finalizar a análise 1. Baixe a luz à menor intensidade pelo potenciômetro; 2. Antes de remover a lâmina, baixe a mesa e volte à lente objetiva de menor aumento; 3. Caso tenha utilizado óleo de imersão para observação na objetiva de 100X, limpar cuidadosamente com etanol; 4. Remover a lâmina e substituir; 5. No caso da finalização das análises, a luz deverá ser desligada e o microscópio guardado no devido local. 6. Vale lembrar novamente que o microscópio jamais deverá ser arrastado para mudança de local e devem ser evitados movimentos bruscos, que poderão danificar o núcleo óptico do aparelho.
- 10. Utilizando durex Principalmente para fungos sem corpos de frutificação fechados
- 14. Movimentar o revólver, colocando em posição a objetiva de menor aumento (4X). Fonte: Microscopia Óptica (Dulce Lins / Eduardo Alécio – CEFET PE)
- 15. Colocar a região que se quer observar bem no centro do campo visual da objetiva
- 16. Movimentar o revólver, colocando em posição a objetiva seguinte (10x)
- 17. Uma vez que se tenha obtido o foco com a objetiva de 4 x acertar o foco na objetiva de 10 x apenas com o botão micrométrico.
- 18. A objetiva de 100 x é chamada de imersão. Movimentar o revólver de forma que a objetiva de 100 x fique a meia distância da posição de encaixe. Colocar uma gota do óleo de imersão sobre a preparação
- 19. Movimentar o revólver de forma que a objetiva de 100 x encaixe corretamente. Ajustar o foco com o botão micrométrico
- 20. Finalizado a observação microscópica, desligar a lâmpada, girar o revólver de forma a encaixar a objetiva de 4 x, baixar a platina, retirar a lâmina e enxugar a objetiva de 100 x com papel fino (NÃO ESFREGAR A LENTE).