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Estrutura e Atividade
dos Ácidos Nucléicos
Ácidos Nucléicos – O Código
           da Vida

DNA e RNA
      
 Cadeia de polinucleotídeos
Composição dos Nucleotídeos
1) Açúcar (pentose)
    Ribose: -D-ribofuranose (RNA)
    Desoxirribose: -D-2´-desoxirribofuranose (DNA)

2) Base nitrogenada: ligado ao carbono 1 do açúcar
    Purinas: adenina, guanina
    Pirimidina: citosina, timina, uracila

3) Grupo Fosfato: ligado ao carbono 5 do açúcar

Obs: Nucleosídeo = açúcar + base nitrogenada
Pentoses

            5´                                   5´
HOH2C            O                   HOH2C              O       OH
                          OH
  4´                           1´      4´                                1´

       H H            H H                   H H                H H

       3´                 2´                3´                      2´
            OH        H                          OH            OH


            Desoxirribose                             Ribose
Bases Nitrogenadas
                      H                                                               H
                                               H                  H       N           N
              H       N            N           N
                                                                                              H
                                                    H                 N
 Purinas                  N                                                           N
                                               N                          N
                  H
                                O                                     H           H
                              Guanina                                     Adenina

                          H            H
                               N                           O                              O
                  H                                H3C                H       H                   H
Pirimidinas                            N                       N                              N


                  H                        O        H                 O    H                      O
                               N                           N                              N

                               H                           H                              H
                              Citosina                   Timina                       Uracila
Nucleotídeos
                                                     H
                               H           N         N
                                                      H
                                       N
     O        O      O                               N
                                           NH2               Adenina
-O   P    O   P     O P   O   CH           O
                               2
     O-       O-     O-
          Fosfato             H H                H H

                                   O             H
                                   H

                               Desoxirribose
Nucleotídeos



                                              Adenina
     O       O       O

-O   P   O   P   O   P   O   CH    O              Base
                              2               nitrogenada
     O       O       O

         Fosfato             H H       H H

                              OH       H


                              Desoxirribose
Nucleotídeos



                                              Guanina
     O       O       O

-O   P   O   P   O   P   O   CH    O              Base
                              2               nitrogenada
     O       O       O

         Fosfato             H H       H H

                              OH       H


                              Desoxirribose
Nucleotídeos



                                               Timina
     O       O       O

-O   P   O   P   O   P   O   CH    O              Base
                              2               nitrogenada
     O       O       O

         Fosfato             H H       H H

                              OH       H


                              Desoxirribose
Nucleotídeos


                                              Citosina

     O       O       O

-O   P   O   P   O   P   O   CH    O              Base
                              2               nitrogenada
     O       O       O

         Fosfato             H H       H H

                              OH       H


                              Desoxirribose
DNA
     Ácido Desoxirribonucléico
É o material genético da
quase totalidade dos
seres vivos.
DNA

 É grande e complexo e
  possui grande quantidade
  de informações.
 Cada gene é um segmento
  de DNA, que contém a
  informação para fabricar
  uma determinada proteína.
 Cada cromossomo é
  composto por uma série de
  genes.
DNA
 Cada gene transporta informação em sua banda de DNA.
 Por exemplo, um gene pode carregar informação para cor
  dos olhos e um outro, para o tipo de cabelo.
 Esse armazenamento de informação no gene é denominado
  informação genética.


                                 Centrômero




                          Telômero
DNA
 Pode se duplicar,
  gerando cópias perfeitas
  de si mesmo.
 Comanda a síntese de
  proteínas, controla o
  metabolismo e a
  arquitetura da célula.
DNA
 Uma das funções do DNA                                   Molécula de
  dos cromossomos é servir                                 DNA parental
  de molde para sua própria
  duplicação na fase S do
  ciclo celular, sendo as
  cópias distribuídas para as
  células-filhas.               Fita filha
 Outra função do DNA é a
  passagem da informação
  nele contida para as
  moléculas dos três tipos                    Molécula de
  de RNA: RNA                                DNA filha (dupla
                                                 hélice)
  transportador, RNA
  mensageiro e RNA
  ribossômico.
Duplicação ou Replicação do
             DNA
 A duplicação é                Origem da                   Origem da
                                replicação                  replicação
  semiconservadora.
 Origina-se em sítios
  específicos.
 Ocorre em ambas as             Origem da
  direções.                      replicação
                                               Fita parental

 Enzimas auxiliam o                           Fita filha
  processo.
 Graças à abertura da
  cadeia dupla inicial e
  à posição dos
  nucleotídeos
  correspondentes em
  cada semicadeia,
  formam-se duas
  cadeias, cópias                      Duas moléculas de DNA
  exatas da inicial.
                           Cadeias originais do DNA em azul; cadeias novas
                                              em laranja.
DNA
 O DNA é geralmente fita
  dupla.
 No DNA o número de
  Timinas (T) é igual ao
  número de Adeninas (A)
  e o número de Guanina
  (G) é igual ao de Citosina
  (C).
DNA
 O modelo de Watson e
  Crick (1953) mostra o
  DNA como uma fita
  retorcida (Dupla Hélice).
 As ligações na mesma
  fita são do tipo
  fosfodiéster.
DNA
 As interações entre as
  fitas são do tipo ligações
  (pontes) de hidrogênio
 Entre A e T são duas e
  entre C e G são três.
Pareamento de Bases

                               A=T
                               GC
Bases são complementares.
Pontes de hidrogênio são formadas entre as bases:
                   A = T  2 pontes de hidrogênio
                   G  C  3 pontes de hidrogênio


                       G  C É MAIS ESTÁVEL
Pareamento dos Nucleotídeos
                                                                     OH




                                                    H
                                                                          CH2




                                               N


                                                        N
                                                                 O
                 H       H
                     N




                                           O




                                                        N
                             Pontes de hidrogênio
             H
                                                                Guanina




                                                    N
                         N




                                                            H
                                                        N
                                                    H
           O H               O




                                                        H
H2C                  N


                     Citosina

      OH
Pareamento dos Nucleotídeos
                                                                OH




                                               H
                                          N


                                                   N
                                                            O        CH2




                                    H




                                                       N
                                        N
                   O


                                   H
             H3C           H                               Adenina




                                             N


                                                       H
                       N        Pontes de hidrogênio



H 2C        O H            O
                   N


                       Timina

       OH
5´           Polimerização
    O

O   P       O

    O                         O       O       O
        H2C          O
                                                      H2C        O
                          O   P   O   P   O   P   O

                              O       O       O


                O
                OH
                                                            OH
        O       P    O

                O




                    3´
OH
                      O
                                                              3´
                 O    P   O
                 5´   O                                  O    H2C
                          H2C       O                               O

Pareamento                                                    O     P    O


das Fitas de                    O
                                                                    O

                          O     P    O
    DNA                       O                                O        H2C
                                    H2C       O                               O
 Invertido e                                                           O     P    O
 Complementar
                                          O
                                                                              O

                                    O     P    O
                                          O                                       H2C
                                                                        O
                                                                                            5´
                                              H2C    O                                  O
                                                                                   O    P

                                          3´        OH
                                                                                        O
Como o DNA controla a Célula?
                                                                   DNA
 O DNA controla a célula
  pela transferência de               1 Síntese de
  informação codificada                 RNAm no
                                        núcleo             RNAm
  para o RNA.


 A informação no RNA é                  NÚCLEO
  usada para a síntese de
  proteínas.                                                      Citoplasma
                                      2 Movimento do     RNAm
                                        RNAm para o
                                        citoplasma via            Ribossomo
                                        poro nuclear



                                      3 Síntese de
                                        proteína
                                        no citoplasma.
                                                                Proteína
                        Figure 4.10
RNA
         Ácido Ribonucléico
 O RNA é geralmente fita
  simples.
 É menor que o DNA.
 É relacionado com a
  síntese protéica.
 Material genético de
  alguns vírus.
Principais Tipos de RNA
RNA mensageiro (RNAm)
 O número de nucleotídeos é
  diretamente proporcional ao
  tamanho da proteína que
  codifica.
 Carrega as informações do
  núcleo até o citoplasma.
Principais Tipos de RNA
RNA ribossômico (RNAr)
 É a maior molécula de RNA.
 É o mais abundante (80% do RNA celular).
 Constitui os ribossomos junto com as protéinas.
Ribossomos
                            Composto por RNAr + Proteínas
                            Formado por 2 subunidades
                            unidas por íons de Mg++

                            Pode ser encontrado:
                             Livre no hialoplasma (inativo)

    Preso ao RNAm:                                     Preso ao
     Síntese de proteínas                                Ergastoplasma:
     para consumo interno                                Síntese de proteínas
                                                         para a exportação
Principais Tipos de RNA
                                                          3
                                       Amino acid       A
RNA transportador (RNAt)               attachment site
                                                        C
                                                        C
                                                        A 5
 Menor molécula de RNA.                                C G
                                                        G C
                                                        C G
 Liga-se a um aminoácido para                          U G
                                                        U A
                                                        A U
    conduzi-lo até o local onde está    *
                                          U C
                                              C A C AG
                                                        A U
                                                           UA                A G *
                                                                     C U C
    ocorrendo a síntese protéica.      G
                                        C     G U G U *        C
                                                                *
                                                                     G A G        G
                                                                                   *
                                          * *      U C                       A G G
 Existe no mínimo um RNAt para                    * G AG C
                                                            *
                                                                     Hydrogen
  (a)                                                    G C
    cada tipo de aminoácido.                             U A         bonds
                                                         * G
                                                            A
                                                       A*      C
                                                      *        U
                                                       A      G
                                                          A
                                                         Anticodon
Principais Tipos de RNA
                             RNAm
                5’                  3’



            Aminoácid
RNAt            o
                  3´
       5´
                                         RNAr




                        Anticódon
Diferenças entre RNA e DNA
                     RNA               DNA
Açúcar            Ribose         Desoxirribose

                  Guanina (G)    Guanina (G)
                  Citosina (C)   Citosina (C)
Bases             Adenina (A)    Adenina (A)
nitrogenadas      Uracila (U)    Timina (T)


                  Geralmente
Número de fitas                  Dupla
                  simples

Termoestável?     Não            Sim
Atividade dos Ácidos Nucléicos
Duplicação ou Replicação
 Objetivo: Gerar cópias (Mitose ou meiose).
 É um processo Semiconservativo.
 Enzimas envolvidas:
    Helicase – Rompimento das pontes de Hidrogênio, ou
     seja, separação dos filamentos da dupla hélice que vai ser
     copiada).
    DNA polimerase – Encaixe de novos nucleotídeos
     obedecendo a correspondência: A e T, C e G.
    Topoisomerase – Desdobramento das voltas da hélice
     dupla (consome energia = ATP).

 Proteínas envolvidas:
    Proteínas SSP (Single Strand Proteins) – impedem que as
     pontes de Hidrogênio entre as bases se refaçam depois de
     desfeitas pela helicase.
Duplicação ou Replicação
 Os quatro desorribonucleotídeos trifosfato necessários a
  síntese de DNA são dATP, dCTP, dTTP, dGTP, contendo as
  bases adenina, citosina, timina e guanina.
 A DNA-polimerase não consegue iniciar a síntese de DNA
  sem o auxílio de um iniciador ou primer de RNA, porque ela
  só é capaz de adicionar nucleotídeos a um polinucleotídeo
  preexistente.
Duplicação ou Replicação
 Os dois filamentos da hélice
  dupla são antiparalelos, isto é,   Leading
  um deles tem direção 5’-3’ e o
  outro a direção 3’-5’.
 A replicação do DNA é
  extremamente precisa,              Lagging
  estimando-se que é cometido
  apenas um erro na replicação
  de 109 bases.
 Leading: filamento que é
  sintetizado inteiro.
 Lagging: filamento que é feito
  em pedaços que depois são
  soldados (cada pedaço começa
  por 5’ e termina em 3’).
Duplicação ou Replicação
 A replicação inicia-se,            Forquilha de
                                      Replicação
  simultaneamente em vários
  pontos do cromossomo.
 Uma vez iniciada a replicação
  em locais predeterminados
  situados ao longo dos
  cromossomos, os locais de
  iniciação, ele se propaga para
  os dois lados (replicação
  bidirecional), até encontrar a
  replicação do segmento vizinho.
 Cada segmento de DNA capaz
  de iniciar a replicação chama-se
  réplicon.
Transcrição
 Objetivo: Gerar o RNA.
 Ocorre no núcleo.
 Enzima envolvida:
    RNA polimerase.
 Forma as moléculas de RNA tendo como molde uma
  das fitas do DNA.
Transcrição
Transcrição
    A transcrição é feita por RNA-polimerases dependentes de
     DNA, que apresentam características comuns a todas elas:
1.   Só realizam a polimerização de ribonucleotídeos, para formar
     RNA, na presença de um modelo ou “template” de DNA, que
     pode ser um filamento simples de DNA ou uma dupla hélice.
2.   São necessários os quatro trifosfatos de ribonucleosídeos
     precursores do RNA, ou seja, ATP, CTP, GTP e UTP.
3.   As RNA-polimerases requerem os cátions Mn 2+ ou Mg2+ para
     exercerem atividade enzimática.
4.   A transcrição tem lugar apenas num filamento de DNA de
     determinado local da dupla hélice, tratando-se assim de uma
     transcrição assimétrica.
5.   As RNA-polimerases não dependem de um iniciador ou primer,
     ao contrário do que acontece com as DNA-polimerases.
Transcrição
                                 Nucleotídeos do
              RNA                RNA
              polimerase




RNA
recém
formado                          “Template”
                  Direção da    da fita de DNA
                  transcrição
Transcrição
 Nas células eucariontes, o RNA é transcrito como
  moléculas maiores que são reduzidas de tamanho por
  um processo intranuclear de acabamento.
 Nesse processo está incluído o splicing, que consiste
  na remoção e digestão de segmentos chamados íntrons
  e junção dos segmentos funcionais, os éxons, que vão
  constituir a molécula final de RNAm.
 O splicing, processo de acabamento do RNA, é muito
  complexo e preciso, porque a molécula de RNA
  inicialmente transcrita deve ser cortada em locais exatos,
  e as partes funcionais ou éxons devem ser emendadas
  também de maneira exata.
Transcrição - Processamento do RNAm
             DNA


        RNA
        transcrito
                              Transcrição




                                   Íntrons
                                   removidos

                                      Éxons
                     RNAm             unidos

                             Núcleo




                     Citoplasma
Transcrição
Durante a transcrição
   – O gene determina a seqüência de bases ao longo da molécula
     de RNAm.

              Molécula                     Gene 2
                de
               DNA
                                 Gene 1
                                                      Gene 3


              Fita de     3                                         5
              DNA (template) A C C A A A C C G A G T

                TRANSCRIÇÃO


                                 U G G U U U G G C U C A
               RNAm         5                                       3
                                  Codon
                 TRADUÇÃO


              Proteína           Trp      Phe       Gly        Ser
                             Aminoácido
Tradução
 Síntese Protéica         DNA
 Ocorre no citoplasma
 Personagens                    Transcrição

   –   RNAm                                     Núcleo
                                 RNA
   –   Ribossomos
   –   Aminoácidos
   –   RNAt
   –   Enzimas e ATP
 Códon                          Tradução      Citoplasma
 Anticódon
                                   Proteína
 Código genético
  universal
Códon e Anticódon
 TRANSCRIÇÃO       DNA

                  RNAm
                  Ribossomo
  TRADUÇÃO
               Polipeptídeo




                                                   Aminoácidos
             Polipeptídeo


                                                   RNAt com aminoácidos
                                                   aderidos
                                          Ribossomo

                                                   Gly


                                                   RNAt

                                                  Anticódon
                                    A A A
                              U G G U U U G G C


       5                       Códons                   3
               RNAm
O Código Genético
Um códon no RNAm
  – Serve tanto para a tradução em um aminoácido ou serve como um sinal
    para o término da tradução (códon de terminação).
                                                                Segunda base do RNAm
                                                          U           C          A             G
                                                      UUU        UCU         UAU           UGU          U
           Primeira base no RNAm (extremidade 5)



                                                                                   Tyr          Cys




                                                                                                            Terceira base no RNAm (extemidade 3)
                                                            Phe              UAC
                                                    U UUC        UCC                       UGC
                                                                        Ser UAATerminação UGATerminação
                                                                                                        C
                                                      UUA         UCA                                   A
                                                            Leu              UAGTerminação UGG Trp G
                                                      UUG         UCG
                                                      CUU         CCU           CAU        CGU     U
                                                                                    His
                                                      CUC         CCC           CAC        CGC     C
                                                    C         Leu CCA     Pro                  Arg
                                                      CUA                       CAA        CGA     A
                                                                                    Gln
                                                      CUG         CCG           CAG        CGG     G
                                                      AUU             ACU       AAU        AGU     U
                                                                                    Asn        Ser C
                                                      AUC lle         ACC       AAC        AGC
                                                    A                     Thr
                                                      AUA             ACA       AAA        AGA     A
                                                          Met                       Lys        Arg G
                                                      AUG Iniciação   ACG       AAG        AGG
                                                      GUU          GCU          GAU     GGU     U
                                                      GUC          GCC          GAC Asp GGC     C
                                                    G          Val        Ala               Gly
                                                      GUA          GCA          GAA     GGA     A
                                                                                    Glu
                                                      GUG          GCG          GAG     GGG     G
O Código Genético
   A tabela anterior mostra os códons para os 20 aminoácidos,verificando-se
    que 61 codificam aminoácidos e três servem para determinar que a
    molécula protéica deve ser terminada.
   São os códons de terminação UAA, UAG e UGA.
   O códon AUG, conhecido como códon de iniciação, é a parte do sinal
    para início da cadeia polipeptídica. Isso quando ele está localizado na
    extremidade do RNAm; qaundo está situado em outra posição na molécula
    do RNAm, codifica o aminoácido metionina.
   O exame da tabela anterior mostra que, com exceção dos códons para
    metionina e triptófano, todos os outros aminoácidos têm mais de um códon.
   Por outro lado, o código genético é universal, sendo o mesmo para todos
    os organismos procariontes e eucariontes.
Tradução
Primeira etapa é a ativação dos aminoácidos por ATP, com a formação de
aminoacil-adenilatos, seguida pela combinação do grupo carboxila do
aminoácido com o respectivo RNAt.

                                   Aminoácido                          Aminoacil- sintetase RNAt
                                                                       (enzima)
Tanto a formação dos
                                                                               1 Ativa os sítios de ligação do
aminoacil-adenilatos                 P P P Adenosina
                                                                               aminoácido e ATP.
                                      ATP
como a ligação destes
                                                                                2 ATP perde dois grupos P
com os RNAt são                                                                 e junta-se ao aminoácido como AMP.
catalisadas pela mesma Pirofosfato                   P
                                                               P   Adenosina

                                                          Pi

enzima chamada                                 Pi
                                                    Pi
aminoacil-sintetase             Fosfatos
                                                    RNAt                                        Cada aminoácido é
RNAt                  3 Ligação
                            covalente                                                           ativado por uma sintetase
                            do RNAt com
                            o aminoácido,                P Adenosina
                                                                                                que tem especificidade
                            liberando AMP.                     AMP                              dupla: para o aminoácido
                           4 O aminoácido ativado
                             é liberado pela enzima
                                                                                                e para os respectivos
                                                                                                RNAt.
                                             Aminoacilação
                                             do RNAt
Tradução
                                      Cadeia polipeptídica em crescimento



                                                    Aminoácido




                                                     RNAt


         RNAm                                                3


                                   Códons
             5

Depois da aminoacilação do RNAt, os eventos da síntese protéica passam a ter lugar nos
ribossomos. Os ribossomos oferecem locais onde os outros componentes da síntese protéica
(RNAm, aminoacil-RNAt, cadeia polipeptídica em formação, fatores protéicos solúveis,
moléculas de GTP) se colocam em posição que torna possível ao código genético contido no
RNAm ser traduzido corretamente. Cada ribossomo recebe duas moléculas de RNAt
simultaneamente. Os eventos que ocorrem nos ribossomos envolvem proteínas do citossol que
participam das diferentes etapas da síntese protéica.
Tradução
O início da tradução
― A síntese protéica se continua com a ligação do aminoacil-adenilato mais o RNAt
  iniciador à subunidade menor do ribossomo. Nas bactérias, mais bem estudadas do
  que as células eucariontes, o iniciador é sempre a N-formilmetionil RNAt (fMet RNAt).
  Em seguida, o RNAm junta-se ao complexo formado pela subunidade menor + fMet
  RNAt + GTP, de modo que o códon de iniciação, AUG, interage com o anticódon da
  fMet RNAt, formando assim o complexo de iniciação. Em seguida, a subunidade
  maior (50 S) do ribossomo junta-se ao complexo, formando o ribossomo completo com
  70 S (célula procarionte). É interessante notar que a fMet liga-se à subunidade
  ribossômica menor sem interferência do RNAm, que é adicionado posteriormente. Nas
  células eucariontes, o iniciador é a metionina não-formilada ligada ao seu RNAt.
                                                                                                     Subunidade
                                                                                                     maior do
                                                                       Sítio P                       ribossomo
                                             3 U A C 5
                                             5 A U G 3

                     RNAt
                   iniciador                               GTP   GDP
                                                                                  E        A
                          RNAm
                        5                          3                  5                           3
                               Códon de iniciação

                Sítio de ligação ao RNAm         Subunidade                  Complexo de iniciação
                                                   menor do
                                                  ribossomo

            1                                                    2
Tradução
O alongamento da               TRANSCRIÇÃO      DNA

                                                RNAm
                                                                    Polipeptídeo

cadeia polipeptídica
                                               Ribossomo
                                TRADUÇÃO
                                             Polipeptídeo




   – Como os ribossomos         Ribossomo pronto para
                                                                      mRNA                   3
                                                                                   P   A
     têm dois locais para a     receber o próximo
                                                                        5
                                Aminoacil-RNAt                                             2 GTP
     entrada dos aminoacil-                                                                  2 GDP
     RNAt, ocorre uma
     ligação peptídica entre
     os dois aminoácidos
     próximos e,                                            P   A                                    P   A

     imediatamente, o
                                                                      GDP
     deslocamento de um                                                   GTP
     deles para fora do
     ribossomo. Assim, fica
     um local vago no                                                                         – Sempre que sai um
                                                                                   P   A
     ribossomo para entrada                                                                     aminoácido, já inserido
     de novo aminoacil-                                                                         na nova cadeia
     RNAt, conforme códon                                                                       polipeptídica, há
     do RNAm.                                                                                   transferência do que ficou
                                                                                                no ribossomo para o sítio
                                                                                                de saída (sítio P), ficando
                                                                                                vazio o sítio de entrada
                                                                                                (sítio A).
Tradução
O término da tradução
  – O alongamento da cadeia polipeptídica se continua até o ribossomo encontrar
    no RNAm, um código ou um trio de terminação, o que determina a liberação do
    último aminoácido e a separação das duas subunidades ribossômicas, que
    podem ser usadas novamente para produzir outras novas cadeias
    polipeptídicas.


                                                Polipeptídeo
                                                livre

                                                     5
                         3                     3
                                                                      3
    5                             5
             Códon de terminação
             (UAG, UAA, or UGA)
Tradução
O polirribossomo se forma porque vários ribossomos
traduzem simultaneamente a mesma molécula de RNAm.
                                                                Polipeptídeo
                               Polipeptídeos em                 completo
                               crescimento
          Subunidades
          ribossômicas
          separadas
                         Extremidade                    Extremidade
                         5 do RNAm                     3 do RNAm

       (a) Um molécula de RNAm é geralmente traduzida simultaneamente por alguns
           ribossomos em conjunto, formando polirribossomos.



                                          Ribossomos
                                                        RNAm




                                                                      0.1 µm
       (b) Eletrofotomicrografia de transmissão mostrando um grande polirribossomo em
           célula procarionte.
Resumo da Tradução

Ribossomo                                         Ribossomo
                  Proteína:
                                       Início da síntese
                  início da síntese
                                          de proteína


                                      RNAm

                                                Polissomos ou polirribossomos

                                                 Ribossomo
                                             libera-se do RNAm    Proteína
                                                                  formada

  Término da síntese




                                                                    FIM

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Estrutura Atividade Ácidos Nucleicos

  • 1. Estrutura e Atividade dos Ácidos Nucléicos
  • 2. Ácidos Nucléicos – O Código da Vida DNA e RNA  Cadeia de polinucleotídeos
  • 3. Composição dos Nucleotídeos 1) Açúcar (pentose) Ribose: -D-ribofuranose (RNA) Desoxirribose: -D-2´-desoxirribofuranose (DNA) 2) Base nitrogenada: ligado ao carbono 1 do açúcar Purinas: adenina, guanina Pirimidina: citosina, timina, uracila 3) Grupo Fosfato: ligado ao carbono 5 do açúcar Obs: Nucleosídeo = açúcar + base nitrogenada
  • 4. Pentoses 5´ 5´ HOH2C O HOH2C O OH OH 4´ 1´ 4´ 1´ H H H H H H H H 3´ 2´ 3´ 2´ OH H OH OH Desoxirribose Ribose
  • 5. Bases Nitrogenadas H H H H N N H N N N H H N Purinas N N N N H O H H Guanina Adenina H H N O O H H3C H H H Pirimidinas N N N H O H O H O N N N H H H Citosina Timina Uracila
  • 6. Nucleotídeos H H N N    H N O O O N NH2 Adenina -O P O P O P O CH O 2 O- O- O- Fosfato H H H H O H H Desoxirribose
  • 7. Nucleotídeos Adenina O O O -O P O P O P O CH O Base 2 nitrogenada O O O Fosfato H H H H OH H Desoxirribose
  • 8. Nucleotídeos Guanina O O O -O P O P O P O CH O Base 2 nitrogenada O O O Fosfato H H H H OH H Desoxirribose
  • 9. Nucleotídeos Timina O O O -O P O P O P O CH O Base 2 nitrogenada O O O Fosfato H H H H OH H Desoxirribose
  • 10. Nucleotídeos Citosina O O O -O P O P O P O CH O Base 2 nitrogenada O O O Fosfato H H H H OH H Desoxirribose
  • 11. DNA Ácido Desoxirribonucléico É o material genético da quase totalidade dos seres vivos.
  • 12. DNA  É grande e complexo e possui grande quantidade de informações.  Cada gene é um segmento de DNA, que contém a informação para fabricar uma determinada proteína.  Cada cromossomo é composto por uma série de genes.
  • 13. DNA  Cada gene transporta informação em sua banda de DNA.  Por exemplo, um gene pode carregar informação para cor dos olhos e um outro, para o tipo de cabelo.  Esse armazenamento de informação no gene é denominado informação genética. Centrômero Telômero
  • 14. DNA  Pode se duplicar, gerando cópias perfeitas de si mesmo.  Comanda a síntese de proteínas, controla o metabolismo e a arquitetura da célula.
  • 15. DNA  Uma das funções do DNA Molécula de dos cromossomos é servir DNA parental de molde para sua própria duplicação na fase S do ciclo celular, sendo as cópias distribuídas para as células-filhas. Fita filha  Outra função do DNA é a passagem da informação nele contida para as moléculas dos três tipos Molécula de de RNA: RNA DNA filha (dupla hélice) transportador, RNA mensageiro e RNA ribossômico.
  • 16. Duplicação ou Replicação do DNA  A duplicação é Origem da Origem da replicação replicação semiconservadora.  Origina-se em sítios específicos.  Ocorre em ambas as Origem da direções. replicação Fita parental  Enzimas auxiliam o Fita filha processo.  Graças à abertura da cadeia dupla inicial e à posição dos nucleotídeos correspondentes em cada semicadeia, formam-se duas cadeias, cópias Duas moléculas de DNA exatas da inicial. Cadeias originais do DNA em azul; cadeias novas em laranja.
  • 17. DNA  O DNA é geralmente fita dupla.  No DNA o número de Timinas (T) é igual ao número de Adeninas (A) e o número de Guanina (G) é igual ao de Citosina (C).
  • 18. DNA  O modelo de Watson e Crick (1953) mostra o DNA como uma fita retorcida (Dupla Hélice).  As ligações na mesma fita são do tipo fosfodiéster.
  • 19. DNA  As interações entre as fitas são do tipo ligações (pontes) de hidrogênio  Entre A e T são duas e entre C e G são três.
  • 20. Pareamento de Bases A=T GC Bases são complementares. Pontes de hidrogênio são formadas entre as bases: A = T  2 pontes de hidrogênio G  C  3 pontes de hidrogênio G  C É MAIS ESTÁVEL
  • 21. Pareamento dos Nucleotídeos OH H CH2 N N O H H N O N Pontes de hidrogênio H Guanina N N H N H O H O H H2C N Citosina OH
  • 22. Pareamento dos Nucleotídeos OH H N N O CH2 H N N O H H3C H Adenina N H N Pontes de hidrogênio H 2C O H O N Timina OH
  • 23. Polimerização O O P O O O O O H2C O H2C O O P O P O P O O O O O OH OH O P O O 3´
  • 24. OH O 3´ O P O 5´ O O H2C H2C O O Pareamento O P O das Fitas de O O O P O DNA O O H2C H2C O O  Invertido e O P O  Complementar O O O P O O H2C O 5´ H2C O O O P 3´ OH O
  • 25. Como o DNA controla a Célula? DNA  O DNA controla a célula pela transferência de 1 Síntese de informação codificada RNAm no núcleo RNAm para o RNA.  A informação no RNA é NÚCLEO usada para a síntese de proteínas. Citoplasma 2 Movimento do RNAm RNAm para o citoplasma via Ribossomo poro nuclear 3 Síntese de proteína no citoplasma. Proteína Figure 4.10
  • 26. RNA Ácido Ribonucléico  O RNA é geralmente fita simples.  É menor que o DNA.  É relacionado com a síntese protéica.  Material genético de alguns vírus.
  • 27. Principais Tipos de RNA RNA mensageiro (RNAm)  O número de nucleotídeos é diretamente proporcional ao tamanho da proteína que codifica.  Carrega as informações do núcleo até o citoplasma.
  • 28. Principais Tipos de RNA RNA ribossômico (RNAr)  É a maior molécula de RNA.  É o mais abundante (80% do RNA celular).  Constitui os ribossomos junto com as protéinas.
  • 29. Ribossomos Composto por RNAr + Proteínas Formado por 2 subunidades unidas por íons de Mg++ Pode ser encontrado:  Livre no hialoplasma (inativo)  Preso ao RNAm:  Preso ao Síntese de proteínas Ergastoplasma: para consumo interno Síntese de proteínas para a exportação
  • 30. Principais Tipos de RNA 3 Amino acid A RNA transportador (RNAt) attachment site C C A 5  Menor molécula de RNA. C G G C C G  Liga-se a um aminoácido para U G U A A U conduzi-lo até o local onde está * U C C A C AG A U UA A G * C U C ocorrendo a síntese protéica. G C G U G U * C * G A G G * * * U C A G G  Existe no mínimo um RNAt para * G AG C * Hydrogen (a) G C cada tipo de aminoácido. U A bonds * G A A* C * U A G A Anticodon
  • 31. Principais Tipos de RNA RNAm 5’ 3’ Aminoácid RNAt o 3´ 5´ RNAr Anticódon
  • 32. Diferenças entre RNA e DNA RNA DNA Açúcar Ribose Desoxirribose Guanina (G) Guanina (G) Citosina (C) Citosina (C) Bases Adenina (A) Adenina (A) nitrogenadas Uracila (U) Timina (T) Geralmente Número de fitas Dupla simples Termoestável? Não Sim
  • 33. Atividade dos Ácidos Nucléicos
  • 34. Duplicação ou Replicação  Objetivo: Gerar cópias (Mitose ou meiose).  É um processo Semiconservativo.  Enzimas envolvidas:  Helicase – Rompimento das pontes de Hidrogênio, ou seja, separação dos filamentos da dupla hélice que vai ser copiada).  DNA polimerase – Encaixe de novos nucleotídeos obedecendo a correspondência: A e T, C e G.  Topoisomerase – Desdobramento das voltas da hélice dupla (consome energia = ATP).  Proteínas envolvidas:  Proteínas SSP (Single Strand Proteins) – impedem que as pontes de Hidrogênio entre as bases se refaçam depois de desfeitas pela helicase.
  • 35. Duplicação ou Replicação  Os quatro desorribonucleotídeos trifosfato necessários a síntese de DNA são dATP, dCTP, dTTP, dGTP, contendo as bases adenina, citosina, timina e guanina.  A DNA-polimerase não consegue iniciar a síntese de DNA sem o auxílio de um iniciador ou primer de RNA, porque ela só é capaz de adicionar nucleotídeos a um polinucleotídeo preexistente.
  • 36. Duplicação ou Replicação  Os dois filamentos da hélice dupla são antiparalelos, isto é, Leading um deles tem direção 5’-3’ e o outro a direção 3’-5’.  A replicação do DNA é extremamente precisa, Lagging estimando-se que é cometido apenas um erro na replicação de 109 bases.  Leading: filamento que é sintetizado inteiro.  Lagging: filamento que é feito em pedaços que depois são soldados (cada pedaço começa por 5’ e termina em 3’).
  • 37. Duplicação ou Replicação  A replicação inicia-se, Forquilha de Replicação simultaneamente em vários pontos do cromossomo.  Uma vez iniciada a replicação em locais predeterminados situados ao longo dos cromossomos, os locais de iniciação, ele se propaga para os dois lados (replicação bidirecional), até encontrar a replicação do segmento vizinho.  Cada segmento de DNA capaz de iniciar a replicação chama-se réplicon.
  • 38. Transcrição  Objetivo: Gerar o RNA.  Ocorre no núcleo.  Enzima envolvida:  RNA polimerase.  Forma as moléculas de RNA tendo como molde uma das fitas do DNA.
  • 40. Transcrição  A transcrição é feita por RNA-polimerases dependentes de DNA, que apresentam características comuns a todas elas: 1. Só realizam a polimerização de ribonucleotídeos, para formar RNA, na presença de um modelo ou “template” de DNA, que pode ser um filamento simples de DNA ou uma dupla hélice. 2. São necessários os quatro trifosfatos de ribonucleosídeos precursores do RNA, ou seja, ATP, CTP, GTP e UTP. 3. As RNA-polimerases requerem os cátions Mn 2+ ou Mg2+ para exercerem atividade enzimática. 4. A transcrição tem lugar apenas num filamento de DNA de determinado local da dupla hélice, tratando-se assim de uma transcrição assimétrica. 5. As RNA-polimerases não dependem de um iniciador ou primer, ao contrário do que acontece com as DNA-polimerases.
  • 41. Transcrição Nucleotídeos do RNA RNA polimerase RNA recém formado “Template” Direção da da fita de DNA transcrição
  • 42. Transcrição  Nas células eucariontes, o RNA é transcrito como moléculas maiores que são reduzidas de tamanho por um processo intranuclear de acabamento.  Nesse processo está incluído o splicing, que consiste na remoção e digestão de segmentos chamados íntrons e junção dos segmentos funcionais, os éxons, que vão constituir a molécula final de RNAm.  O splicing, processo de acabamento do RNA, é muito complexo e preciso, porque a molécula de RNA inicialmente transcrita deve ser cortada em locais exatos, e as partes funcionais ou éxons devem ser emendadas também de maneira exata.
  • 43. Transcrição - Processamento do RNAm DNA RNA transcrito Transcrição Íntrons removidos Éxons RNAm unidos Núcleo Citoplasma
  • 44. Transcrição Durante a transcrição – O gene determina a seqüência de bases ao longo da molécula de RNAm. Molécula Gene 2 de DNA Gene 1 Gene 3 Fita de 3 5 DNA (template) A C C A A A C C G A G T TRANSCRIÇÃO U G G U U U G G C U C A RNAm 5 3 Codon TRADUÇÃO Proteína Trp Phe Gly Ser Aminoácido
  • 45. Tradução  Síntese Protéica DNA  Ocorre no citoplasma  Personagens Transcrição – RNAm Núcleo RNA – Ribossomos – Aminoácidos – RNAt – Enzimas e ATP  Códon Tradução Citoplasma  Anticódon Proteína  Código genético universal
  • 46. Códon e Anticódon TRANSCRIÇÃO DNA RNAm Ribossomo TRADUÇÃO Polipeptídeo Aminoácidos Polipeptídeo RNAt com aminoácidos aderidos Ribossomo Gly RNAt Anticódon A A A U G G U U U G G C 5 Códons 3 RNAm
  • 47. O Código Genético Um códon no RNAm – Serve tanto para a tradução em um aminoácido ou serve como um sinal para o término da tradução (códon de terminação). Segunda base do RNAm U C A G UUU UCU UAU UGU U Primeira base no RNAm (extremidade 5) Tyr Cys Terceira base no RNAm (extemidade 3) Phe UAC U UUC UCC UGC Ser UAATerminação UGATerminação C UUA UCA A Leu UAGTerminação UGG Trp G UUG UCG CUU CCU CAU CGU U His CUC CCC CAC CGC C C Leu CCA Pro Arg CUA CAA CGA A Gln CUG CCG CAG CGG G AUU ACU AAU AGU U Asn Ser C AUC lle ACC AAC AGC A Thr AUA ACA AAA AGA A Met Lys Arg G AUG Iniciação ACG AAG AGG GUU GCU GAU GGU U GUC GCC GAC Asp GGC C G Val Ala Gly GUA GCA GAA GGA A Glu GUG GCG GAG GGG G
  • 48. O Código Genético  A tabela anterior mostra os códons para os 20 aminoácidos,verificando-se que 61 codificam aminoácidos e três servem para determinar que a molécula protéica deve ser terminada.  São os códons de terminação UAA, UAG e UGA.  O códon AUG, conhecido como códon de iniciação, é a parte do sinal para início da cadeia polipeptídica. Isso quando ele está localizado na extremidade do RNAm; qaundo está situado em outra posição na molécula do RNAm, codifica o aminoácido metionina.  O exame da tabela anterior mostra que, com exceção dos códons para metionina e triptófano, todos os outros aminoácidos têm mais de um códon.  Por outro lado, o código genético é universal, sendo o mesmo para todos os organismos procariontes e eucariontes.
  • 49. Tradução Primeira etapa é a ativação dos aminoácidos por ATP, com a formação de aminoacil-adenilatos, seguida pela combinação do grupo carboxila do aminoácido com o respectivo RNAt. Aminoácido Aminoacil- sintetase RNAt (enzima) Tanto a formação dos 1 Ativa os sítios de ligação do aminoacil-adenilatos P P P Adenosina aminoácido e ATP. ATP como a ligação destes 2 ATP perde dois grupos P com os RNAt são e junta-se ao aminoácido como AMP. catalisadas pela mesma Pirofosfato P P Adenosina Pi enzima chamada Pi Pi aminoacil-sintetase Fosfatos RNAt Cada aminoácido é RNAt 3 Ligação covalente ativado por uma sintetase do RNAt com o aminoácido, P Adenosina que tem especificidade liberando AMP. AMP dupla: para o aminoácido 4 O aminoácido ativado é liberado pela enzima e para os respectivos RNAt. Aminoacilação do RNAt
  • 50. Tradução Cadeia polipeptídica em crescimento Aminoácido RNAt RNAm 3 Códons 5 Depois da aminoacilação do RNAt, os eventos da síntese protéica passam a ter lugar nos ribossomos. Os ribossomos oferecem locais onde os outros componentes da síntese protéica (RNAm, aminoacil-RNAt, cadeia polipeptídica em formação, fatores protéicos solúveis, moléculas de GTP) se colocam em posição que torna possível ao código genético contido no RNAm ser traduzido corretamente. Cada ribossomo recebe duas moléculas de RNAt simultaneamente. Os eventos que ocorrem nos ribossomos envolvem proteínas do citossol que participam das diferentes etapas da síntese protéica.
  • 51. Tradução O início da tradução ― A síntese protéica se continua com a ligação do aminoacil-adenilato mais o RNAt iniciador à subunidade menor do ribossomo. Nas bactérias, mais bem estudadas do que as células eucariontes, o iniciador é sempre a N-formilmetionil RNAt (fMet RNAt). Em seguida, o RNAm junta-se ao complexo formado pela subunidade menor + fMet RNAt + GTP, de modo que o códon de iniciação, AUG, interage com o anticódon da fMet RNAt, formando assim o complexo de iniciação. Em seguida, a subunidade maior (50 S) do ribossomo junta-se ao complexo, formando o ribossomo completo com 70 S (célula procarionte). É interessante notar que a fMet liga-se à subunidade ribossômica menor sem interferência do RNAm, que é adicionado posteriormente. Nas células eucariontes, o iniciador é a metionina não-formilada ligada ao seu RNAt. Subunidade maior do Sítio P ribossomo 3 U A C 5 5 A U G 3 RNAt iniciador GTP GDP E A RNAm 5 3 5 3 Códon de iniciação Sítio de ligação ao RNAm Subunidade Complexo de iniciação menor do ribossomo 1 2
  • 52. Tradução O alongamento da TRANSCRIÇÃO DNA RNAm Polipeptídeo cadeia polipeptídica Ribossomo TRADUÇÃO Polipeptídeo – Como os ribossomos Ribossomo pronto para mRNA 3 P A têm dois locais para a receber o próximo 5 Aminoacil-RNAt 2 GTP entrada dos aminoacil- 2 GDP RNAt, ocorre uma ligação peptídica entre os dois aminoácidos próximos e, P A P A imediatamente, o GDP deslocamento de um GTP deles para fora do ribossomo. Assim, fica um local vago no – Sempre que sai um P A ribossomo para entrada aminoácido, já inserido de novo aminoacil- na nova cadeia RNAt, conforme códon polipeptídica, há do RNAm. transferência do que ficou no ribossomo para o sítio de saída (sítio P), ficando vazio o sítio de entrada (sítio A).
  • 53. Tradução O término da tradução – O alongamento da cadeia polipeptídica se continua até o ribossomo encontrar no RNAm, um código ou um trio de terminação, o que determina a liberação do último aminoácido e a separação das duas subunidades ribossômicas, que podem ser usadas novamente para produzir outras novas cadeias polipeptídicas. Polipeptídeo livre 5 3 3 3 5 5 Códon de terminação (UAG, UAA, or UGA)
  • 54. Tradução O polirribossomo se forma porque vários ribossomos traduzem simultaneamente a mesma molécula de RNAm. Polipeptídeo Polipeptídeos em completo crescimento Subunidades ribossômicas separadas Extremidade Extremidade 5 do RNAm 3 do RNAm (a) Um molécula de RNAm é geralmente traduzida simultaneamente por alguns ribossomos em conjunto, formando polirribossomos. Ribossomos RNAm 0.1 µm (b) Eletrofotomicrografia de transmissão mostrando um grande polirribossomo em célula procarionte.
  • 55. Resumo da Tradução Ribossomo Ribossomo Proteína: Início da síntese início da síntese de proteína RNAm Polissomos ou polirribossomos Ribossomo libera-se do RNAm Proteína formada Término da síntese FIM