Este documento discute técnicas espectrofotométricas ultravioleta-visíveis para análise de amostras. Ele explica que os comprimentos de onda no ultravioleta são de 200-400nm e no visível são de 400-750nm. Também descreve como grupos funcionais podem deslocar as bandas de absorção para comprimentos de onda mais longos e como a cor aparente de uma solução depende da cor absorvida.

1. A técnica espectrofotométrica ultravioleta-visivel refere-se aos métodos analíticos
fundamentados na medida de energia radiante transmitida pelas soluções.
A faixa do espectro ultravioleta corresponde as radiações de cerca de 200 a 400 mm ou
nm,enquanto que faixas do visível compreende as radiações de cerca de 400 a 750 mm
ou nm.
A cor aparente da solução é sempre o componente da cor absorvida. Desta forma, uma
solução que absorver na região azul (465 a 480 nm) parecera amarelo. Quando nos
referimos a cor estamos no estudo da região visível. Compostos totalmente saturados
não apresentam absorção seletiva na região do visível e ultravioleta. Quanto mais
extenso for um sistema conjugados mais longos serão os comprimentos de onda.
Os comprimentos de onda de absorção máxima de um composto fornecem um meio de
identificar o cromóforo que ele contem.
O sistema conjugado completo em uma molécula é chamado de seu cromóforo.
Quando, em geral, os espectros são modificados por um ou vários grupos atômicos, pela
substituição dos hidrogênios nos carbonos do sistema cromóforo, tais grupos possuem o
efeito de deslocar as bandas de absorção para comprimentos de onda mais longos e
mudam, portanto, seus valores de absorbância.
Os grupos que produzem esses deslocamentos são chamados de auxócromos. Em
compostos aromáticos o anel benzênico é o cromóforo mais simples.
A absortividade é uma propriedade da substancia, enquanto que a absorbância é uma
propriedade de uma determinada amostra e que sofrera variação de acordo com a
concentração e a espessura do recipiente.
A lei de Beer indica que a absortividade é uma constante independente da
concentração,comprimentos do percurso e intensidade da radiação incidente.
O biológico-revista do instituto biológico volume 61 numero 2 jul/dez 1999