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P . João R
 rof      icardo Alves Costa
Fígado de peixe ( Alfac – HE )
Vesícula Biliar de peixe ( Alfac –
              HE )
Vidro
 4000 anos a.C.
 fenícios
 egipcianos
                   Areia ( sílica ou
                  dióxido de silício
                           )
                      fundida é
                       pastosa
Renascentismo
                século XV
                  artesãos de vidro
                século XVIII
                  indústria vidreira
                lusitana




areia : vidro     gota de areia
( 1,3 : 1,0 )       derretida
                  ( 1250 ºC ) ,
Galileu Galilei (1564-1642)
¶ balança hidrostática
¶ compasso geométrico e militar
¶ contestou as idéias de Aristóteles
¶ Descobriu que a massa não influi
           na velocidade da queda

¶ Luneta Astronômica :
     montanhas da Lua
     satélites de Júpiter
     manchas solares
     planetas ainda não conhecidos
Galileu (1564-1642)
   modifica seu telescópio
Janssen (1590)
   holandês construtor de
lentes
Kepler (1611)
   sugere modos de construção
   para o microscópio
composto
Hooke - 1655
 em Londres,
 utiliza o microscópio composto
 para ver poros na seção
 de cortiça
 (celas)
1660




Antonius van Leeuwenhoek (1632-1723)
protozoários em
1674 !
bactérias em 1683 ?!
Célula Animal X Protista


       -
   . . -. . .
     ,,,,
       -
       -
1750


1704
Watkins 1750
Ross 1850
Hepatopâncreas de peixe ( Bouin – Tricrômico de
                  Masson )
                VASO




  FÍGADO



                               PÂNCREAS
Swift & Wales 1879




Thomas Edison inventa a lâmpada incandescete
Pillischer 1880
Collinsb 1880
Beck - continental - 1895
Watson 1900
Swift 1901
Watson & Heurck 1907
Beck – black – 1908
Canalículo Biliar em fígado de peixe
          ( Alfac – HE )


         cB




                            VAS O
FÍGADO

              eritrócitos
                                    cB
Zeiss 1912
Zeiss 1922
Leitz 1935
Watson 1938
Bausch & Lomb
Bausch & Lomb 1945
O
L
Y
M
P
U
S
1960
1970

 N
 I
 K
 O
 N
LUZ É UMA ONDA ELETROMAGNÉTICA
                           (OEM)
  Energia Radiante (e=mcc)       e Oscilatória de partícula
PROPAGAÇÃO RETILÍNEA
Vácuo                                    V=ƒ × λ
   V cte para qualquer ⇑ ƒ ∴ ⇓ λ
   299.792.458 m.s-1 ≅ 3.108 m.s-1
                                          osc. × m
   Vvácuo > Vmatéria
                                           s
                      ≅ 300.000 km.s-1
                                             m.s-1
Sequência (no tempo)
de uma OEM tem 2 componentes
                                            Maxwell ( 1864 )
campo magnético de oscilação                  equações do
   ignorado para se ver                    eletromagnetismo
campo elétrico de oscilação
   fenômeno de formação de                   Heinrich Hertz
   imagens                                       ( 1888 )
                                           validação empírica
1 nm = 0,000000001 m = 10-9 m




                            ƒ óton




                            ƒ = 1.t -1   ƒ (Hz)   t(s)
Luz Visível ao homem é só uma parte do
     espectro radioativo eletromagnético

(violeta) nm 380              780 nm (vermelho)
E⇑
                                           NÍVEL SUBATÔMICO
                                                                                    A cor não é
                                              OU CÓSMICOS
                                        ( ATRAVESSAM A MATÉRIA )
                                                                                   propriedade
                                                            átomos
                                                                                  intrínseca aos
     atravessam substâncias e quebram

                                             FATOR FÍSICO
                                         PROMOTOR DE CÂNCER                         objetos !!
         moléculas grandes como o DNA




                                           MENOR ENERGIA ( f )

                                                                                    Violet
                                                                                           a (3 8 0
                                           DE RÁDIO: RADAR,                           Azul (       -440 n
                                                                                              440-4       m)
                                        CELULAR, ...DOMÉSTICO FM
                                                                      metro        Verde             90 nm
                                                                                Amar       (490-5          )
                                                                 TV
                                                                                      elo (5        65 nm
                                                                                Laran         65-59       )
                                                             SW
                                                                                      j a (5 9      0 n m)
                                                                              Verm
                                                                 AM
                                                                                   elho ( 0-630 nm)
                                                                                          630-7
⇓E                                                                                               8 0 nm
                                                                                                        )
AR                    refração
                       ÁGUA     propagação da OEM de um meio material
                                para outro, de densidade diferente

                       VIDRO    alteração da V, do λ e da direção
                                (se não for ortogonal à superfície)
                       AR       em ≠’s substâncias materiais (1 e 2)
                                    de 1 para 2 – ƒ cte
índice de refração                  para ⇓V ∴ ⇓ λ ( AR >>> ÁGUA )
(lei de Snell, 1621)


      V=ƒ × λ                  ƒ1 = ƒ2

              V1 ≠ V 2 ↔ λ 1 ≠ λ 2
Epz


                      n
                                        2   absorç
2                  2n  n               n     ão
n



     reflexão
    Testículo de peixe ( Alfac – HE )
um dado tipo de radiação não pode ser usado

                                     difração
   INTERFERÊNCIA entre 2 ou + OEM’s ⇒ novo padrão de ondas
                                                                             para revelar detalhes muito menores
                                                                                que seu próprio λ ( 0,4 µ m )

   superposição: onda resultante é soma dos espectros de frequência

           ocula               PODER DE RESOLUÇÃO ≠ AUMENTO
               r
                                ⇑ poder de resolução ↔ ⇓ limite de resolução (d)

                               d: menor distância entre dois pontos,
                               na qual eles são distinguidos como tal, “ : “ .

              óleo              NA: abertura numérica da objetiva (n × sen θ)
                                      n: índice de refração do meio (ar ou óleo)                ⇓ brilo
               NA
               NA




                                      θ: metade da largura angular do cone
objetiva
                                            de raios coletados pela lente
                                é uma função da objetiva da sua
                                capacidade de coletar luz
                                                   0,61 × λ      0,61 × λ
                                              d=             =
                                                   n × senθ         AN
                                onde:
            condensador
                                      λ é o comprimento de onda (luz, elétrons etc.)
                                      ⇑ AN ↔ ⇓ d ↔ ⇑ poder de resolução
                                      ⇓ λ ↔ ⇓ d ↔ ⇑ poder de resolução

                          século XIX: o menor d conseguido para o MO
                            revela detalhes com distância entre 0,2 µ m ,
                                 raramente equiparado atualmente                              ⇑ brilo
berrações na formação de imagens

feito de borda: em altas magnificações,
   por interferências (ondas fora de fase)

sférica: raios não convergem a um só ponto

urvatura de Campo:
  lentes que dão imagens curvas de objetos planos
  diferença de foco no centro e periferia do campo




                                                                       Acromáticas: mais comuns
                                                         Semi-Acromáticas: fluorita (certa correção)
                                                      Apocromáticas: correção ampla (todo o espectro)
                                                     Planacromáticas: corrigem a curvatura de campo
                                                           Planapocromáticas = planacromáticas +
                                                                                      apocromáticas
10 mm                        Aparelho de Golgi por exemplo




0,2
mm



                10-20 μm   AMOSTRA
vezes
1000




                 0,5 μm

0,2
μm
A Luz ou o Elétron atravessam o
Microscopia Óptica material
                          Microscopia Eletrônica de
                                  Transmissão
MET
hepatócito
fibroblasto
célula
mesênquimatosa
      da serosa
A Luz ou o Elétron revelam detalhes da
Microscopia Estereoscópica superfície do material
      ( LUPA )
                           Microscopia Eletrônica de
                                  Varredura
Alberts et
   alii
( 1997, p.
    1 )
             Z
 crédito:
  Tony
  Brain
os créditos das f otomicrograf ias são de Alves Costa (200
do Centro de Microscopia Eletrônica e
do Setor de Ciências B iológicas - UFP R
LASER
      L ight A mplification by S timulated E mission of
                          R adiation
      Amplificação da Luz por Emissão Estimulada de
                          Radiação




dispositivo que produz radiação (onda) eletromagnética :
   ¶ monocromática
   ¶ possui λ bem definido e coerente:
         todas as ondas dos fótons que compõe o feixe estão em
fase

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animicroscopia

  • 1. P . João R rof icardo Alves Costa
  • 2. Fígado de peixe ( Alfac – HE )
  • 3. Vesícula Biliar de peixe ( Alfac – HE )
  • 4. Vidro 4000 anos a.C. fenícios egipcianos Areia ( sílica ou dióxido de silício ) fundida é pastosa
  • 5. Renascentismo século XV artesãos de vidro século XVIII indústria vidreira lusitana areia : vidro gota de areia ( 1,3 : 1,0 ) derretida ( 1250 ºC ) ,
  • 6. Galileu Galilei (1564-1642) ¶ balança hidrostática ¶ compasso geométrico e militar ¶ contestou as idéias de Aristóteles ¶ Descobriu que a massa não influi na velocidade da queda ¶ Luneta Astronômica : montanhas da Lua satélites de Júpiter manchas solares planetas ainda não conhecidos
  • 7.
  • 8.
  • 9. Galileu (1564-1642) modifica seu telescópio Janssen (1590) holandês construtor de lentes Kepler (1611) sugere modos de construção para o microscópio composto
  • 10. Hooke - 1655 em Londres, utiliza o microscópio composto para ver poros na seção de cortiça (celas)
  • 11.
  • 14. Célula Animal X Protista - . . -. . . ,,,, - -
  • 15.
  • 19. Hepatopâncreas de peixe ( Bouin – Tricrômico de Masson ) VASO FÍGADO PÂNCREAS
  • 20. Swift & Wales 1879 Thomas Edison inventa a lâmpada incandescete
  • 27. Beck – black – 1908
  • 28. Canalículo Biliar em fígado de peixe ( Alfac – HE ) cB VAS O FÍGADO eritrócitos cB
  • 29.
  • 37. 1960 1970 N I K O N
  • 38.
  • 39.
  • 40.
  • 41.
  • 42.
  • 43.
  • 44.
  • 45. LUZ É UMA ONDA ELETROMAGNÉTICA (OEM) Energia Radiante (e=mcc) e Oscilatória de partícula PROPAGAÇÃO RETILÍNEA Vácuo V=ƒ × λ V cte para qualquer ⇑ ƒ ∴ ⇓ λ 299.792.458 m.s-1 ≅ 3.108 m.s-1 osc. × m Vvácuo > Vmatéria s ≅ 300.000 km.s-1 m.s-1 Sequência (no tempo) de uma OEM tem 2 componentes Maxwell ( 1864 ) campo magnético de oscilação equações do ignorado para se ver eletromagnetismo campo elétrico de oscilação fenômeno de formação de Heinrich Hertz imagens ( 1888 ) validação empírica
  • 46. 1 nm = 0,000000001 m = 10-9 m ƒ óton ƒ = 1.t -1 ƒ (Hz) t(s)
  • 47. Luz Visível ao homem é só uma parte do espectro radioativo eletromagnético (violeta) nm 380 780 nm (vermelho)
  • 48. E⇑ NÍVEL SUBATÔMICO A cor não é OU CÓSMICOS ( ATRAVESSAM A MATÉRIA ) propriedade átomos intrínseca aos atravessam substâncias e quebram FATOR FÍSICO PROMOTOR DE CÂNCER objetos !! moléculas grandes como o DNA MENOR ENERGIA ( f ) Violet a (3 8 0 DE RÁDIO: RADAR, Azul ( -440 n 440-4 m) CELULAR, ...DOMÉSTICO FM metro Verde 90 nm Amar (490-5 ) TV elo (5 65 nm Laran 65-59 ) SW j a (5 9 0 n m) Verm AM elho ( 0-630 nm) 630-7 ⇓E 8 0 nm )
  • 49. AR refração ÁGUA propagação da OEM de um meio material para outro, de densidade diferente VIDRO alteração da V, do λ e da direção (se não for ortogonal à superfície) AR em ≠’s substâncias materiais (1 e 2) de 1 para 2 – ƒ cte índice de refração para ⇓V ∴ ⇓ λ ( AR >>> ÁGUA ) (lei de Snell, 1621) V=ƒ × λ ƒ1 = ƒ2 V1 ≠ V 2 ↔ λ 1 ≠ λ 2
  • 50.
  • 51. Epz n 2 absorç 2 2n  n n ão n reflexão Testículo de peixe ( Alfac – HE )
  • 52. um dado tipo de radiação não pode ser usado difração INTERFERÊNCIA entre 2 ou + OEM’s ⇒ novo padrão de ondas para revelar detalhes muito menores que seu próprio λ ( 0,4 µ m ) superposição: onda resultante é soma dos espectros de frequência ocula PODER DE RESOLUÇÃO ≠ AUMENTO r ⇑ poder de resolução ↔ ⇓ limite de resolução (d) d: menor distância entre dois pontos, na qual eles são distinguidos como tal, “ : “ . óleo NA: abertura numérica da objetiva (n × sen θ) n: índice de refração do meio (ar ou óleo) ⇓ brilo NA NA θ: metade da largura angular do cone objetiva de raios coletados pela lente é uma função da objetiva da sua capacidade de coletar luz 0,61 × λ 0,61 × λ d= = n × senθ AN onde: condensador λ é o comprimento de onda (luz, elétrons etc.) ⇑ AN ↔ ⇓ d ↔ ⇑ poder de resolução ⇓ λ ↔ ⇓ d ↔ ⇑ poder de resolução século XIX: o menor d conseguido para o MO revela detalhes com distância entre 0,2 µ m , raramente equiparado atualmente ⇑ brilo
  • 53. berrações na formação de imagens feito de borda: em altas magnificações, por interferências (ondas fora de fase) sférica: raios não convergem a um só ponto urvatura de Campo: lentes que dão imagens curvas de objetos planos diferença de foco no centro e periferia do campo Acromáticas: mais comuns Semi-Acromáticas: fluorita (certa correção) Apocromáticas: correção ampla (todo o espectro) Planacromáticas: corrigem a curvatura de campo Planapocromáticas = planacromáticas + apocromáticas
  • 54.
  • 55. 10 mm Aparelho de Golgi por exemplo 0,2 mm 10-20 μm AMOSTRA vezes 1000 0,5 μm 0,2 μm
  • 56. A Luz ou o Elétron atravessam o Microscopia Óptica material Microscopia Eletrônica de Transmissão
  • 58. A Luz ou o Elétron revelam detalhes da Microscopia Estereoscópica superfície do material ( LUPA ) Microscopia Eletrônica de Varredura
  • 59. Alberts et alii ( 1997, p. 1 ) Z crédito: Tony Brain
  • 60. os créditos das f otomicrograf ias são de Alves Costa (200 do Centro de Microscopia Eletrônica e do Setor de Ciências B iológicas - UFP R
  • 61. LASER L ight A mplification by S timulated E mission of R adiation Amplificação da Luz por Emissão Estimulada de Radiação dispositivo que produz radiação (onda) eletromagnética : ¶ monocromática ¶ possui λ bem definido e coerente: todas as ondas dos fótons que compõe o feixe estão em fase