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Prof. João Ricardo Alves Costa
Fígado de peixe ( Alfac – HE )
Vesícula Biliar de peixe ( Alfac – HE )
Vidro
  4000 anos a.C.
  fenícios
  egipcianos
                    Areia ( sílica ou
                   dióxido de silício )
                   fundida é pastosa
Renascentismo
                  século XV
                    artesãos de vidro
                  século XVIII
                    indústria vidreira lusitana




areia : vidro    gota de areia derretida
 ( 1,3 : 1,0 )   ( 1250 ºC ) , arrefecida
                    e depois lapidada
Galileu Galilei (1564-1642)
¶ balança hidrostática
¶ compasso geométrico e militar
¶ contestou as idéias de Aristóteles
¶ Descobriu que a massa não influi
             na velocidade da queda

¶ Luneta Astronômica :
     montanhas da Lua
     satélites de Júpiter
     manchas solares
     planetas ainda não conhecidos
Galileu (1564-1642)
   modifica seu telescópio
Janssen (1590)
   holandês construtor de lentes
Kepler (1611)
   sugere modos de construção
   para o microscópio composto
Hooke - 1655
 em Londres,
 utiliza o microscópio composto
 para ver poros na seção
 de cortiça
 (celas)
1660




Antonius van Leeuwenhoek (1632-1723)
protozoários em 1674 !
bactérias em 1683 ?!
Célula Animal X Protista


      -
  . . -. . .
    ,,,,
      -
      -
1750


1704
Watkins 1750
Ross 1850
Hepatopâncreas de peixe ( Bouin – Tricrômico de Masson )

                    VASO




   FÍGADO


                                       PÂNCREAS
Swift & Wales 1879




Thomas Edison inventa a lâmpada incandescete
Pillischer 1880
Collinsb 1880
Beck - continental - 1895
Watson 1900
Swift 1901
Watson & Heurck 1907
Beck – black – 1908
Canalículo Biliar em fígado de peixe
             ( Alfac – HE )


         cB




FÍGADO
              eritrócitos

                                      cB
Zeiss 1912
Zeiss 1922
Leitz 1935
Watson 1938
Bausch & Lomb
Bausch & Lomb 1945
O
L
Y
M
P
U
S
1960
1970

 N
 I
 K
 O
 N
LUZ É UMA ONDA ELETROMAGNÉTICA
                           (OEM)
  Energia Radiante (e=mcc)       e Oscilatória de partícula
PROPAGAÇÃO RETILÍNEA
Vácuo                                   V=
   V cte para qualquer   
   299.792.458 m.s-1  3.108 m.s-1       osc.  m
   Vvácuo > Vmatéria                      s
                      300.000 km.s-1

Sequência (no tempo)
                                             m.s-1
de uma OEM tem 2 componentes
                                            Maxwell ( 1864 )
campo magnético de oscilação                  equações do
   ignorado para se ver                    eletromagnetismo
campo elétrico de oscilação
   fenômeno de formação de                  Heinrich Hertz
   imagens                                      ( 1888 )
                                          validação empírica
1 nm = 0,000000001 m = 10-9 m




                            óton




                             = 1.t -1    (Hz)   t(s)
Luz Visível ao homem é só uma parte do
     espectro radioativo eletromagnético

(violeta) nm 380              780 nm (vermelho)
NÍVEL SUBATÔMICO
                                                                         A cor não é propriedade
   E                                   OU CÓSMICOS
                                   ( ATRAVESSAM A MATÉRIA )              intrínseca aos objetos !!
                                                       átomos
    moléculas grandes como o DNA




                                        FATOR FÍSICO
atravessam substâncias e quebram




                                    PROMOTOR DE CÂNCER




                                      MENOR ENERGIA ( f )


                                                                            Violeta (380-440 nm)
                                      DE RÁDIO: RADAR,
                                   CELULAR, ...DOMÉSTICO
                                                                              Azul (440-490 nm)
                                                            FM   metro
                                                                             Verde (490-565 nm)
                                                            TV
                                                                           Amarelo (565-590 nm)
                                                        SW
                                                                           Laranja (590-630 nm)
                                                            AM
                                                                          Vermelho (630-780 nm)
            E
AR                      refração
                       ÁGUA     propagação da OEM de um meio material
                                para outro, de densidade diferente

                       VIDRO    alteração da V, do  e da direção
                                (se não for ortogonal à superfície)
                       AR       em ≠’s substâncias materiais (1 e 2)
                                    de 1 para 2 –  cte
índice de refração                  para V   ( AR >>> ÁGUA )
(lei de Snell, 1621)


       V=                   1 = 2

               V1 ≠ V2  1 ≠ 2
Epz


                         n
                                          2n   absorção
2n                  2n  n




      reflexão
      Testículo de peixe ( Alfac – HE )
difração                           um dado tipo de radiação não pode ser usado
                                                                             para revelar detalhes muito menores
                                                                                que seu próprio  ( 0,4  m )
   INTERFERÊNCIA entre 2 ou + OEM’s  novo padrão de ondas
   superposição: onda resultante é soma dos espectros de frequência

       ocular                 PODER DE RESOLUÇÃO ≠ AUMENTO

                               poder de resolução   limite de resolução (d)

                              d: menor distância entre dois pontos,
                              na qual eles são distinguidos como tal, “ : “ .

              óleo            NA: abertura numérica da objetiva (n  sen )
                                    n: índice de refração do meio (ar ou óleo)                   brilo
objetiva     NA                     : metade da largura angular do cone
                                           de raios coletados pela lente
                              é uma função da objetiva da sua
                              capacidade de coletar luz
                                                  0,61        0,61  
                                            d=              =
                                                  n  sen         AN
                              onde:
           condensador
                                     é o comprimento de onda (luz, elétrons etc.)
                                     AN   d   poder de resolução
                                        d   poder de resolução

                         século XIX: o menor d conseguido para o MO
                          revela detalhes com distância entre 0,2 m ,
                               raramente equiparado atualmente                                 brilo
Aberrações na formação de imagens

Efeito de borda: em altas magnificações,
     por interferências (ondas fora de fase)

Esférica: raios não convergem a um só ponto

Curvatura de Campo:
    lentes que dão imagens curvas de objetos planos
    diferença de foco no centro e periferia do campo




                                                                                  Acromáticas: mais comuns
                                                                  Semi-Acromáticas: fluorita (certa correção)
                                                             Apocromáticas: correção ampla (todo o espectro)
                                                            Planacromáticas: corrigem a curvatura de campo
                                                       Planapocromáticas = planacromáticas + apocromáticas
10 mm                        Aparelho de Golgi por exemplo




0,2
mm



                     10-20 μm
1000 vezes




                                AMOSTRA



                      0,5 μm


0,2
μm
A Luz ou o Elétron atravessam o material
 Microscopia Óptica   Microscopia Eletrônica de Transmissão
MET
hepatócito
fibroblasto
célula mesênquimatosa
       da serosa
A Luz ou o Elétron revelam detalhes da superfície
  Microscopia Estereoscópica         do material
       ( LUPA )           Microscopia Eletrônica de Varredura
Alberts et alii
( 1997, p. 1 )
   crédito:
Tony Brain
                  Z
LASER
      Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation
      Amplificação da Luz por Emissão Estimulada de Radiação




dispositivo que produz radiação (onda) eletromagnética :
   ¶ monocromática
   ¶ possui  bem definido e coerente:
         todas as ondas dos fótons que compõe o feixe estão em fase
   ¶ colimada: propaga-se como um feixe de ondas paralelas

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História da luz e microscopia

  • 1. Prof. João Ricardo Alves Costa
  • 2. Fígado de peixe ( Alfac – HE )
  • 3. Vesícula Biliar de peixe ( Alfac – HE )
  • 4. Vidro 4000 anos a.C. fenícios egipcianos Areia ( sílica ou dióxido de silício ) fundida é pastosa
  • 5. Renascentismo século XV artesãos de vidro século XVIII indústria vidreira lusitana areia : vidro gota de areia derretida ( 1,3 : 1,0 ) ( 1250 ºC ) , arrefecida e depois lapidada
  • 6. Galileu Galilei (1564-1642) ¶ balança hidrostática ¶ compasso geométrico e militar ¶ contestou as idéias de Aristóteles ¶ Descobriu que a massa não influi na velocidade da queda ¶ Luneta Astronômica : montanhas da Lua satélites de Júpiter manchas solares planetas ainda não conhecidos
  • 7.
  • 8.
  • 9. Galileu (1564-1642) modifica seu telescópio Janssen (1590) holandês construtor de lentes Kepler (1611) sugere modos de construção para o microscópio composto
  • 10. Hooke - 1655 em Londres, utiliza o microscópio composto para ver poros na seção de cortiça (celas)
  • 11.
  • 13. protozoários em 1674 ! bactérias em 1683 ?!
  • 14. Célula Animal X Protista - . . -. . . ,,,, - -
  • 15.
  • 19. Hepatopâncreas de peixe ( Bouin – Tricrômico de Masson ) VASO FÍGADO PÂNCREAS
  • 20. Swift & Wales 1879 Thomas Edison inventa a lâmpada incandescete
  • 27. Beck – black – 1908
  • 28. Canalículo Biliar em fígado de peixe ( Alfac – HE ) cB FÍGADO eritrócitos cB
  • 29.
  • 37. 1960 1970 N I K O N
  • 38.
  • 39.
  • 40.
  • 41.
  • 42.
  • 43.
  • 44.
  • 45. LUZ É UMA ONDA ELETROMAGNÉTICA (OEM) Energia Radiante (e=mcc) e Oscilatória de partícula PROPAGAÇÃO RETILÍNEA Vácuo V= V cte para qualquer    299.792.458 m.s-1  3.108 m.s-1 osc.  m Vvácuo > Vmatéria s  300.000 km.s-1 Sequência (no tempo) m.s-1 de uma OEM tem 2 componentes Maxwell ( 1864 ) campo magnético de oscilação equações do ignorado para se ver eletromagnetismo campo elétrico de oscilação fenômeno de formação de Heinrich Hertz imagens ( 1888 ) validação empírica
  • 46. 1 nm = 0,000000001 m = 10-9 m óton  = 1.t -1  (Hz) t(s)
  • 47. Luz Visível ao homem é só uma parte do espectro radioativo eletromagnético (violeta) nm 380 780 nm (vermelho)
  • 48. NÍVEL SUBATÔMICO A cor não é propriedade E OU CÓSMICOS ( ATRAVESSAM A MATÉRIA ) intrínseca aos objetos !! átomos moléculas grandes como o DNA FATOR FÍSICO atravessam substâncias e quebram PROMOTOR DE CÂNCER MENOR ENERGIA ( f ) Violeta (380-440 nm) DE RÁDIO: RADAR, CELULAR, ...DOMÉSTICO Azul (440-490 nm) FM metro Verde (490-565 nm) TV Amarelo (565-590 nm) SW Laranja (590-630 nm) AM Vermelho (630-780 nm) E
  • 49. AR refração ÁGUA propagação da OEM de um meio material para outro, de densidade diferente VIDRO alteração da V, do  e da direção (se não for ortogonal à superfície) AR em ≠’s substâncias materiais (1 e 2) de 1 para 2 –  cte índice de refração para V   ( AR >>> ÁGUA ) (lei de Snell, 1621) V= 1 = 2 V1 ≠ V2  1 ≠ 2
  • 50.
  • 51. Epz n 2n absorção 2n 2n  n reflexão Testículo de peixe ( Alfac – HE )
  • 52. difração um dado tipo de radiação não pode ser usado para revelar detalhes muito menores que seu próprio  ( 0,4  m ) INTERFERÊNCIA entre 2 ou + OEM’s  novo padrão de ondas superposição: onda resultante é soma dos espectros de frequência ocular PODER DE RESOLUÇÃO ≠ AUMENTO  poder de resolução   limite de resolução (d) d: menor distância entre dois pontos, na qual eles são distinguidos como tal, “ : “ . óleo NA: abertura numérica da objetiva (n  sen ) n: índice de refração do meio (ar ou óleo)  brilo objetiva NA : metade da largura angular do cone de raios coletados pela lente é uma função da objetiva da sua capacidade de coletar luz 0,61   0,61   d= = n  sen AN onde: condensador  é o comprimento de onda (luz, elétrons etc.)  AN   d   poder de resolução     d   poder de resolução século XIX: o menor d conseguido para o MO revela detalhes com distância entre 0,2 m , raramente equiparado atualmente  brilo
  • 53. Aberrações na formação de imagens Efeito de borda: em altas magnificações, por interferências (ondas fora de fase) Esférica: raios não convergem a um só ponto Curvatura de Campo: lentes que dão imagens curvas de objetos planos diferença de foco no centro e periferia do campo Acromáticas: mais comuns Semi-Acromáticas: fluorita (certa correção) Apocromáticas: correção ampla (todo o espectro) Planacromáticas: corrigem a curvatura de campo Planapocromáticas = planacromáticas + apocromáticas
  • 54.
  • 55. 10 mm Aparelho de Golgi por exemplo 0,2 mm 10-20 μm 1000 vezes AMOSTRA 0,5 μm 0,2 μm
  • 56. A Luz ou o Elétron atravessam o material Microscopia Óptica Microscopia Eletrônica de Transmissão
  • 58. A Luz ou o Elétron revelam detalhes da superfície Microscopia Estereoscópica do material ( LUPA ) Microscopia Eletrônica de Varredura
  • 59. Alberts et alii ( 1997, p. 1 ) crédito: Tony Brain Z
  • 60.
  • 61. LASER Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation Amplificação da Luz por Emissão Estimulada de Radiação dispositivo que produz radiação (onda) eletromagnética : ¶ monocromática ¶ possui  bem definido e coerente: todas as ondas dos fótons que compõe o feixe estão em fase ¶ colimada: propaga-se como um feixe de ondas paralelas