Este estudo investigou se o extrato de Gleditsia sinensis fruta (GSE) induz inibição de crescimento envolvendo fator de crescimento fibroblástico básico (bFGF) e óxido nítrico (NO) em linhagens cancerosas. Os resultados mostraram que o GSE reduziu os níveis de bFGF e aumentou a produção de NO, levando à inibição do crescimento celular. O GSE parece exercer sua atividade anti-tumoral modulando o bFGF e induzindo a produção de NO.

1. Gleditsia sinensis fruit extract
induced growth inhibition
involves basic fibrobast growth
factor and nitric oxide
CHUI, C.H. et al.
Várias instituições da China.
Int. J. Mol. Med. 13: 169-73, 2004.

2. INTRODUÇÃO
• G. sinensis
– Medicamento utilizado na China
continental;
– Atividade citotóxica contra várias
linhagens tumorais;
– Induz apoptose em células leucêmicas.
• Outros extratos inibição de
crescimento.

3. INTRODUÇÃO
• bFGF
– Angiogênese;
– Mitose;
– Inibição de crescimento de câncer de mama.
• NO
– xNOS;
– Função biológica.

4. INTRODUÇÃO
• OBJETIVOS
– Verificar se o bFGF está envolvido na atividade
inibitória de GSE;
– Produção de NO.

5. MATERIAIS e MÉTODO
• Extrato de G. sinensis
• Cultura de linhagens cancerosas
• ELISA quantificação bFGF
• Quantificação NO (NO2
-)
• Mudanças morfológicas
• Ensaio da Sulforadamina B
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6. Trituração Etanol Agitação e
aquecimento
Secagem e
mensuração da [ ]Diluição
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7. DOAÇÃO
Condições de incubação: 37º C e 5 % CO2
10 %
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8. Voltar
Coleta de meio e
adição de GSE (10,
15, 20 µg/mL)
6/ 24 h
Prot. Totais
(Bradford)
pg de
bFGF/ 0.1
mg de
prot.totais

9. Tratamento
com GSE
Coleta do meio
Solução de
Greiss
(540nm)
µM NO2
-
Nível de
síntese de NO Voltar

10. Adição de 20
µg/mL GSE
6h
Voltar

11. Troca de meio
e adição de
GSE
Ác.
Tricloroacético
(fixador)
6 / 24 h
Sulforodamina B
(corante)
Centrifugação
Tampão
Tris
540 nm Voltar

12. RESULTADOS
• GSE e as culturas;
• Mudanças na morfologia celular;
• NO;
• ELISA (bFGF).
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13. Voltar

14. Voltar

15. DISCUSSÃO
• Crescimento celular
• bFGF ação às vezes contraditória
• GSE bFGF inibição crescimento
• GSE [NO2
-
] inibição
• GSE induz inibição envolvendo nível
bFGF
– Indução produção NO
• GSE anti-angiogênico
• Medicamento

16. OBRIGADO !!!!!
DIOGO B. PROVETE
diogoprov@yahoo.com.br
Grupo de Biologia Celular e TecidualGrupo de Biologia Celular e Tecidual
Laboratório de Microbiologia e ImunologiaLaboratório de Microbiologia e Imunologia
Departamento de Ciências BiológicasDepartamento de Ciências Biológicas
Efoa/Ceufe – Alfenas-MGEfoa/Ceufe – Alfenas-MG