1. BANDEAMENTOS DAPI, Q E C EM CROMOSSOMOS DE PIMENTÃO
(CAPSICUM ANNUUM L.). Aarestrup JR e Carvalho CR. Laboratório de Citogenética
Vegetal, Depto de Biologia Geral, Universidade Federal de Viçosa. jroriz@yahoo.com.br
e ccarvalh@mail.ufv.br
Bandeamentos cromossômicos têm sido utilizados como importantes ferramentas na
caracterização dos cromossomos de plantas. Além das características morfológicas
clássicas, os pares de homólogos podem ser identificados pela distribuição longitudinal
de certas regiões, após coloração com corantes DNA-específicos. O DAPI (4`-6-
diamidino-2-phenilindole)é uma substância que produz padrões característicos de
fluorescência e proporciona uma análise com maior resolução dos cromossomos. As
regiões DAPI positivas são compostas de DNA rico em adenina e timina (AT). Os
cromossomos banda Q positivos apresentam regiões fluorescentes ricas AT, intercaladas
por regiões não-fluorescentes ricas em CG. O bandeamento C, técnica que evidencia
regiões heterocromáticas, em geral, tem sido utilizado em plantas com sucesso,
considerando a acentuada quantidade de heterocromatina. As regiões banda C positivas,
representadas por blocos escuros, permitem a identificação e a comparação de
cromossomos. No presente trabalho, foram aplicadas técnicas de bandeamento DAPI, Q e
C para analisar as características da morfologia cromossômica, bem como averiguar se
essas características auxiliam na identificação individual dos cromossomos de Capsicum
annuum L. Sementes foram germinadas em placas-Petri a 28C. O pré-tratamento das
raízes foi realizado em solução de brometo de etídio a 25 micrometros ou trifluralina a 10
micrometros, por 3 a 6 horas, a 28-30C. Raízes foram fixadas em solução de metanol-
ácido acético 3:1 (V/V) e armazenadas a -20C. Após 24 horas, as raízes foram lavadas
em água corrente por 10 minutos e em água destilada por 5 minutos. A digestão do
material foi realizada em solução de composto Flaxzyme e água destilada 1:14 (V/V) por
1h20min. As lâminas foram preparadas por dissociação celular e secagem-ao-ar. A
coloração foi realizada com solução de DAPI nas concentrações de 0,5 a 2,0
microgramas por mililitro em tampão McIlvine pH 6,8; 7,0 ou 7,2 por 5 a 30 minutos, à
temperatura ambiente e no escuro. As lâminas submetidas ao bandeamento Q foram
cobertas com solução de quinacrina a 0,25; 0,10 ou 0,08% em água destilada, por 5 a 15
minutos, à temperatura ambiente. No bandeamento C, foi utilizado solução de Giemsa a
5% em tampão fosfato pH 6,8 por 8 minutos e em temperatura ambiente. A análise digital
das imagens permitiu verificar que, apesar das alterações na concentração e no pH das
soluções, não foram encontradas alterações no padrão de coloração. Os cromossomos
coraram-se uniformemente, o que não proporcionou a diferenciação e a caracterização
dos mesmos por padrões de bandas heterocromáticas. Imagens negativasdos nucléolos
em células interfásicas e profásicas sugerem a ausência de regiões mais densamente
coradas que, normalmente, correspondem aos blocos heterocromáticos encontrados na
metáfase, quando presentes. Os resultados encontrados confirmam a suposição de outros
autores de que existe pouca quantidade de heterocromatina ou a sua presença dispersa
pelo genoma de C. annuum L. Órgão Financiador : CAPES
