O documento discute métodos de microscopia e coloração bacteriana. Ele descreve o microscópio de luz e o microscópio eletrônico, e como eles podem ser usados para visualizar bactérias. Também explica vários métodos de coloração como o método de Gram e o método de Ziehl-Neelsen, que permitem diferenciar bactérias com base em suas características de parede celular.

1. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 1
MICROSCOPIO DE LUZ:
1000 a 1500 x Até 5000 x

2. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 2
Partes do Microscópio de Luz:
MICROSCOPIO DE LUZ :

3. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 3
• Bacterioscopia ao Microscópio de Luz:
Diâmetro da célula bacteriana: 1 a 2 micrômetros
1 micrômetro = 1 m = 10-6 m
Bactéria = 10-3 m = 1 a 2 mm
Microscópio Luz 1000 x (103)
Bactéria 1-2 m = 1-2 x 10-6 m
MICROSCOPIO DE LUZ:
Preparação “a fresco” Preparação “coradas”

4. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 4
Aumento de 1000 x no Microscópio de Luz:
 Objetiva de Imersão:
MICROSCOPIO DE LUZ:
Ar
Água

5. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 5
Microscópio Eletrônico
de Transmissão
 Descoberto em 1932
 ME Varredura (MEV):  10.000 x
 ME Transmissão (MET):  1.000.000 x
MICROSCOPIA ELETRÔNICA:

6. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 6
ME Transmissão ME Varredura
MICROSCOPIA ELETRÔNICA:

7. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 7
Microscópio Eletrônico Transmissão
MICROSCOPIA ELETRÔNICA:
Microeletronografia
Microeletronografia
Colorizada
 Estudo da ultraestrutura celular;
Envoltórios
Bactéria Enterócito
Bactéria
Microvilosidade
Vermelho:
DNA Genômico

8. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 8
Microscópio Eletrônico Varredura
MICROSCOPIA ELETRÔNICA:
 Estudo da morfologia da célula;

9. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 9
Microscópio Eletrônico Varredura
MICROSCOPIA ELETRÔNICA:

10. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 10
Os Métodos de Coloração Facilitam a Visualização
dos Microrganismos ao Microscópio Óptico
Preparação
“a fresco”
Preparação
“corada”
Caracterização da Morfologia da Bactéria

11. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 11
MÉTODOS DE COLORAÇÃO DIFERENCIAIS:
Método de
Coloração Diferencial
Morfologia
Identificação
Reação Tintorial
Staphylococcus
Coco
Reação
Positiva
Agrupados
Predominantemente
em Cachos de Uvas
Bastonete
Reação
Positiva
Esporulado
Bacillus
Clostridium
Método de Coloração de Gram:
Método de Coloração de Ziehl-Neelsen: :
Bastonete
Reação
Positiva
Micobactérias (Gênero
Mycobacterium) M. tuberculosis
M. leprae

12. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 12
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM:
Solução
de Cristal
Violeta
Corante
Interpretação
do Resultado:
Reação Positiva = Roxo
Reação Negativa = Rosa
1 minuto
Solução
de Iôdo
de Gram
(Lugol)
Mordente
1 minuto
Solução
de Álcool
Etílico
95% ou
Acetona
Descorante
“o suficiente”
Solução
de
Safranina
ou
Fucsina
Diluída
Corante
30 seg

13. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 13
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM:
Hipóteses que Explicam a Diferenciação das Bactérias:
Gram Negativa
ParedeCelular
Membrana Celular
Gram Positiva
 Espessura da Camada de Peptidioglicano:
 Desorganização da Membrana Externa das Bactérias Gram Negativas
pelo Diferenciador (Solvente Orgânico):
 Presença de Ácidos Teicóicos nas Bactérias Gram Positivas ;

14. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 14
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM:
Cocos Gram positivo
agrupados em
cachos de uva
Cocos Gram positivo
agrupados em
cadeias
Cocos Gram positivo
agrupados em
tétrades

15. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 15
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM:
Cocos Gram positivo
agrupados 2 a 2
(diplococos)
Bastonetes Gram
positivo não
esporulados
Bastonetes Gram
positivo esporulados

16. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 16
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM:
Bastonetes Gram
lábeis não
esporulados
Cocos Gram
negativo agrupados
2 a 2 (diplococos)
intra e extra-
celulares
Bastonetes
(cocobacilos) Gram
negativo

17. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 17
Solução de Fucsina
de Ziehl-Neelsen,
fenicada,
concentrada à
quente por 5 min
Corante
Solução
Álcool
Ácida
Descorante
Solução de
Azul de
Metileno
Corante
Interpretação
do Resultado:
Reação Positiva = Vermelha
Reação Negativa = Azul
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN:
BAAR= Bacilo Álcool-
Ácido Resistente

18. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 18
Citoplasma
 Composição da Parede Celular das Micobactérias:
Polipeptídios
(Ex.: tuberculina) Lipídios Livres (Ex.: fator
corda, ceras, micosídios )
Camada Micolato
Arabinogalactano
Camada de
Peptidioglicano
Membrana
Citoplasmática
Ácido D-glutâmico - Ac. m-diaminopimélico e L-alanina
Ácidos Micólicos
D-arabinose e D-galactose
Hipóteses que Explicam a Diferenciação das Bactérias:
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN:

19. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 19
MÉTODO DE COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN:
Tuberculose
Globia
Hanseníase

20. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 20
Doença em foco: Tuberculose
M. tuberculosis
Transmissão por Via Aérea
Tuberculose
Infecção
Cura
Tuberculose Doença
Vacina BCG
Teste do PPD da Tuberculina
Disseminação
Renal
Tuberculose Doença
Óssea
Tuberculose
Doença

21. Microscopia e Método de Coloração Bacteriana 21
Doença em foco: Hanseníase
M. leprae Alteração da Sensibilidade:
Térmica  Táctil  Dolorosa
Formas Clínicas
Indeterminada
Tuberculóide
Dimorfa
Virchowiana
Sadio
Forma de Transmissão
Multibacilar
Secreções do Trato
Respiratório Superior
Teste da
Lepromina
ou Mitsuda