O estágio visa estudar a expressão génica de genes relacionados com o stress hídrico (RD29A, S19, pPLAIIα) em folhas de Arabidopsis geneticamente modificadas para o gene AtpPLAIIα sob condições normais e de défice hídrico através de extração de RNA, análise qualitativa e quantitativa do RNA e RT-PCR.
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Plano de Estágio Ana Rita Mendes
1. DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA VEGETAL
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Edifício C2, 4º Piso, Campo Grande, 1749-016 Lisboa, Portugal tel. 351 21 750 0000; fax 351 21 750 0048
Plano de Estágio Ana Rita Mendes
Voluntariado no âmbito do projecto /AGR-AAM/103721/2008-“Função de uma acil hidrolase
lipolítica de tipo patatina na degradação membranar em condições de deficit hídrico: Uma
abordagem molecular e fisiológica em Arabidopsis”
Objectivo: Estudo da expressão génica (RD29A, S19; pPLAIIα) em folhas de Arabidopsis de
plantas geneticamente modificadas para o gene AtpPLAIIα em condições de deficit hídrico
Etapas principais:
1: Extracção de RNA das 6 linhas (WT, AS e OE) de folhas de plantas contrôle e deficit
hídrico
2: Análise qualitativa do RNA em gel de agarose
3: Doseamento do RNA por espectrofotometria
4: Preparação das soluções de trabalho de RNA para RT-PCR e verificação em gel
5: RT-PCR e electroforese
Nota: serão utilizadas amostras de folhas congeladas a -80ºC
RD29A: gene marcador de stress
S19: gene constitutivo que codifica uma proteína ribossomal
Orientação: Ana Rita Matos
Local: Plant Molecular Biology and Biotechnology Lab