1. Síndrome Respiratorio y
Reproductivo del Cerdo
(PRRS)
MVZ. MC. Rosalba Carreón Nápoles
Departamento de Producción Animal: Cerdos
FMVZ-UNAM
Sinaloa, 2011

2. Definición
Enfermedad infecto-contagiosa
provocada por un Arterivirus. Esta
caracterizada por provocar una falla
reproductiva, así como neumonía en
animales jóvenes y en crecimiento.

3. •Un virus similar fue
aislado en Estados
Unidos en 1992 y se
le conoce como ATTC
VR 2332.
En Europa se le denomino
síndrome respiratorio y aborto
epidémico porcino (PEARS) y
oreja azul entre otros.
El primer aislamiento fue
realizado en el Instituto Central
de Veterinaria de Netherlands
en 1991 y se le designo a la
etiología como virus Lelystad.

5. Arterivirus
Familia: Arteriviridae
Orden: Nidovirales
Replicación en macrófagos.
Establecimiento de infecciones
persistentes asintomáticas.

6. Genoma RNA
Envuelto
Sensible a solventes de lípidos y
cloroformo.
Estable varios meses a 70º C y 1 mes a
4º C.
7 proteínas estructurales

7. Posee un alto rango de mutación por lo que hay una
significativa variación genómica entre las cepas.
Las cepas se han clasificado en europeas y
americanas.
GP5
asociada a la
variabilidad
del virus

8. Relación cepas-signología
A través de RFLPs
1-0-4 asociado a falla reproductiva y
mortalidad en maternidad.
1-0-2 en fase de engorda
Los vacunales son similares
geneticamente, pero no se asocia a
signos de enfermedad
Rosendal IPVS 2010

9. Tipo Europeo
Se han descrito cepas de alta y baja
virulencia.
Difieren en viremia, signos, lesiones,
eliminación.
Las de baja virulencia no pueden
detectarse en hisopos porque son de baja
eliminación.

10. Circulación Viral
Las diferentes cepas pueden circular de
diferente manera en las diferentes formas.
Una cepa puede circular brevemente en
un grupo de una edad mientras en otra
granja la misma cepa puede persistir mas
ampliamente por un largo periodo.
Esto influye en la epidemiología,
signos, lesiones, diagnostico y
control

11. Epidemiología
Se transmite por contacto estrecho de cerdo a cerdo.
También por saliva, semen, orina y heces.
No existen otros hospederos, los roedores no son
susceptibles.
Solamente se ha detectado en patos silvestres como
susceptibles al virus.
El virus el altamente infeccioso, la dosis requerida para
una infección activa es extremadamente baja.(10
partículas)
De acuerdo a su patogenicidad influirá esto en las
vías por la que se elimina y la cantidad eliminada.

12. Epidemiología
La transmisión entre granjas ocurre mediante
cerdos portadores y el uso de semen
contaminado.
El incremento de la inseminación artificial ha
conllevado a la diseminación de la enfermedad.
La eliminación en semen puede ser intermitente
hasta por un período de 92 días.

13. Epidemiología
Puede haber infecciones subclínicas con
resolución en infecciones persistentes.
Los lechones nacidos virémicos de
hembras infectadas en el ultimo tercio de
gestación, pueden crear subpoblaciones
de cerdos virémicos en el hato originando
cuadros crónicos.

14. Epidemiología
PRRS
Granjas Libres
Granjas
Positivas Estables
(No signología)
Granjas
Positivas Inestables
(signología)

15. Inmunidad
Se desarrolla y confiere protección con cepas
homólogas y parcial con las heterólogas
Importante para establecer la cinética de la
enfermedad.
La presencia de anticuerpos, No impide la
viremia.
Los ac SN aparecen hasta el mes y su pico a los
3 meses bloquean o suprimen la infección sobre
todo los producciones por gp5

16. gP5

17. Inmunidad Celular
Hay interferón gamma a partir de la 3ª.
semana.
Altera los patrones de citoquinas liberadas
por los macrófagos.
Se afectan subpoblaciones CD2, CD4 y
CD8+

18. Fig. 2 Macrófago alveolar
Fig. 3 Macrófago muerto por el
virus de PRRS

20. Signos clínicos I
Dependen de:
La virulencia de la cepa involucrada.
Edad de los animales.
Co-infeciones con otros virus y
bacterias.
Factores estresantes medioambientales.

21. Hembra y lechón
Aumento de partos
prematuros.
Lechones nacidos
débiles.
Lechones nacidos
muertos.
Cuadro respiratorio
en lechones.

22. Verracos
Baja la libido.
Decrece motilidad espermática
Incremento de anormalidades en la cola
del espermatozoide y presencia de gotas
citoplasmáticas.
Baja el volumen del eyaculado.

23. Linea de Produccion
Fiebre, anorexia.
Cianosis en orejas,
vientre y miembros.
Cuadro respiratorio.
Asociación con otros
virus y bacterias.

24. Interacciones
Salmonelosis
Enfermedad de Glasser
Neumonía enzooótica
P
R
R
S
Parvovirosis
Estreptococosis
Circovirosis
Pleuropneumonia

25. Lesiones
Macroscópicas:
Neumonía intersticial
Linfoadenopatia
generalizada.
Microscópicas:
Engrosamiento
paredes alveolares.
Hipertrofia de
nódulos linfáticos

27. ¿Como la diagnosticamos?

28. Aislamiento viral

29. Líneas celulares de ciertos monos
africanos:
MAO-104
MARC-145. Más usada en Estados
Unidos.
Limitantes: variación en la susceptibilidad
de las líneas: usar 2 líneas.

30. Limitantes
Disponibilidad de cultivo celular de bajo
pasaje.
El aislamiento viral está limitado a dos
líneas celulares.
El virus es difícil de aislar.
Implica de una a dos semanas.
La muestra debe enviarse al laboratorio a
la brevedad posible y en congelación.

31. Reacción en cadena de la
polimerasa (PCR)
Extracción del ácido nucleico del virus y
su posterior amplificación de una porción
específica de su material genético para su
posterior identificación mediante una
electroforesis.
Interpretación: Presencia del fragmento
amplificado del PCR, comparándolo con
un control de pares de bases y el control
positivo.

33. PCR
MUESTRAS:
Suero
Tejidos
Semen
Extraccion RNA
Amplificacion
Visualizacion del
fragmento amplificado
Electroforesis

34. PCR
Altamente sensible y específico, capaz de detectar 10 viriones por
ml de semen.
El resultado puede obtenerse de 24-48 horas.
Se puede utilizar para diferenciar el virus americano del europeo.
Hay PCR en 1 y 2 pasos.
En 30-35 ciclos se producen 235 (34´359´738,368) moléculas
idénticas del ADN original (sensibilidad)
Semen hay eliminación intermitente y con baja carga viral.
Al infectarse a los 2 días pueden empezar a eliminarlo en semen.
PCR positiva en suero
PCR positiva en tejidos
1mes
2 meses

36. Fluidos orales
Al correlacionarlo con PCR en suero hay
resultados inconsistentes en pie de cría y
cerdos jóvenes.
Mas consistencia en animales de engorda.
Influir: Variación de la cepa y tiempo de
infección. Puede tener el mismo valor
diagnostico que el suero en fase aguda.
Afecta por el tipo y concentración de cepa
Utilizar pooles
Charreire IPVS
2010

37. Fetos
Cordón umbilical húmedo
Pulmones no colapsados

38. Tarjetas FTA
Papel de una matriz de celulosa
que lisa las células en la
muestra, mientras preserva los
ácidos nucleicos.
Al inactiva a virus y bacterias,
no son infecciosas.
Pueden almacenarse a
temperatura ambiente y los
ácidos nucleicos quedan
protegidos de la degradación.
Se han usado con muestras de
suero, sangre y fluidos orales.

39. •RT- PCR ANIDADO
Se realiza una segunda reacción con un par de primers
que se localizan dentro de la región amplificada por
primera vez .
Se incrementa la sensibilidad.
Cuando usarla:
•Animales de gran valor (reproductores)
•Se presume de que existe la enfermedad, pero no se
tiene la certeza
•Se requiere certificar que no hay virus circulando en la
granja (alta sensibilidad)
•El muestreo se realiza muy temprano o muy tardío a la
fase de viremia

40. PRC tiempo real PCRtr
PCR TIEMPO REAL
•Herramienta sensible, específica,rápida y cuantitativa para el
diagnóstico de las enfermedades infecciosas.
•Algunas de las aplicaciones del PCR en tiempo real:
•Cuantificación viral
•Genotipificación (virus involucrados son del mismo o diferente
origen)
Alta reproducibilidad
Muchas muestras se pueden analizar a la vez
Uso para preparación de inóculos
Evaluación de vacunas
Alto costo
Detecta un bajo numero de copias y esto es bueno sobre todos
cuando hay serologias negativas.

41. PCR en Tiempo Real
Cada copia de ADN producida emite
una unidad de fluorescencia,la cual es
captada por un lector laser que es
decodificada por un software.

42. Limitantes
Inversión inicial costosa.
Entrenamiento de personal
Áreas de trabajo, personal y equipo,
exclusivo para el PCR.
Por su costo, no debe utilizarse como una
prueba tamiz.

44. Factores a considerar:
•Calidad de la muestra
•Calidad en el envío de la muestra
•Presencia de DNAasa y RNAasa
•Metodología utilizada (preparación
casera vs Kits Comerciales)
•Necesito almacenar la muestra?
•Cuando fue tomada la muestra?
NO HAY PRUEBAS 100% SENSIBLES Y ESPECIFICAS

45. RFLps
Secuenciacion
Diversidad genética entre cepas
europeas, americanas y
diferencias de vacunas.
Comparar 2 virus de la misma
granja en diferentes momentos
para saber si es el mismo.
Comparar 2 virus de diferente
origen: el de la granja y el de los
animales introducidos.

46. Secuenciación del PRRSV y
estudios filogenéticos
Determinar la secuencia completa o parcial
del genoma
1…
CGGGACTGTCGATTGATCAGCTAGCTA
AATCGATCGTCT
AAAAGCTAGCTCTTGTGCGCGTGATCG
ATCGATCG…15421
15421 nucleótidos
SOLO ORF 5
13788…
CGGGATTGATCAAAGCTAGCCCGTATA
AATCGATC
GTCTAAAAGCTAGCTCTTCGTGATCGA
TCGTTTTCG…14390

47. Secuenciación del PRRSV y estudios
filogenéticos
Para que sirve conocer las
secuencias del PRRS?
Para compararlas entre diversos virus y
determinar el grado
de similitud
Para evidenciar mutaciones
genéticas/antigénicas
Para investigación en genética molecular
La secuenciación no es una técnica de
diagnóstico

49. Arbol filogenético basado en secuencias
del ORF5 de cepas europeas
-Diversidad
genética en una
región geográfica.
-Evolución en los
cambios genómicos
de las cepas.
Goubars IVPS 2010

50. Dendograma antigénico de
aislados de virus de PRRS
No hubo relación entre los “clusters”
antigénicos y genómicos de los aislados
por lo tanto hay diversidad antigénica y
no pueden definirse grupos
Martinez-Lobo IPVS 2010
Dendograma genómico de
aislados de virus de PRRS

51. Inmunohistoquímica
Detección del
antígeno mediante un
anticuerpo
monoclonal, marcado
con una enzima que
se evidencia con un
cromógeno.

52. SEROLOGIA
 Detecta exposición a enfermedades
 Análisis de hato
• No para individuos
 Puede ayudar a establecer la edad de la
infección
 Programa de vacunación
 NO se puede diferenciar el tipo de
anticuerpos!!!
• Anticuerpos vacunales (inmunidad activa)
• Anticuerpos por infección (inmunidad activa)

53. Diagnóstico de anticuerpos
E.L.I.S.A.
Inmunofluorescencia
indirecta
Seroneutralización
Serología detectable
1 semana hasta un año

54. E.L.I.S.A.
Detección de anticuerpos
indirectamente mediante
la utilización de una
enzima y con un sustrato
forma un coloreado.
Interpretación:
Dependerá de acuerdo a
la marca comercial
utilizada

55. E.L.I.S.A.
Media IDEXX
2.8
Media HIPRA
220
200
2.4
160
Media S/P IDEXX
2
140
1.6
120
100
1.2
80
0.8
60
40
0.4
20
0
0
4
5
6
7
8
9
Edad (Semanas)
10
11
12
Media IRPC HIPRA
180

57. Inmunofluorescencia indirecta
Se emplean monoestratos infectados de
cultivos celulares y un antisuero marcado
con fluoresceína.
Interpretación: Observación de una célula
y/o colonia de células fluorescentes en su
citoplasma

58. El utilizar la combinación de E.L.I.S.A.
con IFA es MAS sensible para determinar
el status individual.
Aplicación: Pie de cría MACHOS
Usado rutinariamente antes de la
introducción de machos a unidades libres
si un animal sale positivo puede ser
removido a tiempo.

59. Seroneutralización
Capacidad del suero
problema para neutralizar
la infectividad de una
cantidad constante de
virus en un cultivo celular.
Interpretación: Presencia
o ausencia de efecto
citopático.

60. Comparación entre pruebas
serológicas
Prueba
Detección
de
anticuerpos
Rango de
positividad
Tipo de Ig
detectada
E.L.I.S.A.
9-13 días
Depende de la
marca comercial
Ig G
IPMA
5-9 días
Mayor a 20
Ig G
IFA
7-11 días
5-7 días
Mayor a 20
Ig G
Ig M
SN
28 días
Mayor a 1:2
Ig G

61. Economicamente, la más
importante a nivel
mundial

62. Conclusiones
Es una enfermedad que esta en “continuo
movimiento”.
Evolución en las cepas
En el diagnóstico
En el control
La interacción con otras enfermedades

63. ¡GRACIAS!
rcarreonn@prodigy.net.mx