Презентация с конференции "Медицинский стартап - это возможно!"

1. ООО Регенекс
Российский Национальный исследовательский
медицинский университет им. Н.И. Пирогова
Отдел клеточных технологий и регенеративной
медицины
С.Н. Быковская
Терапия множественного склероза и подавление
реакции отторжения трансплантата (РТПХ)
вакцинами регуляторных Т клеток
CD4+CD25+FoxP3+

2. Описание проблемы
• Множественный склероз (МС) представляет собой
аутоиммунное заболевание, которое поражает
головной и спинной мозг , что приводит к потере
мышечного контроля, зрения, баланса, и
чувствительности.
• Множественным склерозом обычно заболевают в
возрасте от 20 до 30 лет.
• Стоимость лечения МС в США оценивается в более чем
$10 миллиардов ежегодно.
• Стоимость лечения одного больного на протяжении
всей длительности заболевания оценивается в $2.2
миллиона.
• Количество больных: 400,000 в США и 2.5 миллиона во
всём мире.
• Заболеваемость: 1 на 700 человек
• Согласно данным ассоциации «Множественный склероз»
отмечается около 10,000 новых случаев в год
http://www.fda.gov/bbs/topics/news/2004/NEW01141.html

3. Заболевание РС распространено в Европе, Северной Америке, Австралии, и Новой
Зеландии. , Хотя МС встречается в Японии, Китае и некоторых других восточных
странах, оно крайне редко на Востоке по сравнению с Западом. Регионы,
расположенные к 40 градусам Северной долготы, характеризуются заметно более
высокой заболеваемостью, чем южные страны. Высокая заболеваемость отмечается в
европейских странах, особенно в Скандинавии, на Британских островах, на юге Европы
и в Германии. Канада, северные районы США, Новая Зеландия, имеют эквивалентно
высокую распространённость. Чрезвычайно высокая заболеваемость РС выявляется в
пограничных районах Шотландии (203 на 100.000), Crowsnest Pass in Alberta, в Канаде
(217 на 100,000), самая северная провинция Швеции, (253 на 100,000) и др.

4. Специфическое лечение отсутствует, применяемая
в настоящее время терапия неэффективна и не
излечивает заболевание, и только укорачивает
длительность периода обострения

5. Решение проблемы – лечение Т регуляторными
клетками
Регуляторные Т клетки контролируют иммунный
ответ на аутоантигены, предотвращая таким
образом развитие аутоиммунных реакций и
минимизируя Т клеточную иммунопатологию.
• Строгой регуляторной активностью обладают CD4 T
клетки, которые постоянно экспрессируют
высокоафинный рецептор, альфа цепь IL-2, CD25, и
продукт гена FoxP3, постоянный маркёр Т рег
(CD4+CD25+FoxP3+).
• У пациентов с МС выявлен дефицит регуляторных
Т клеток CD4+CD25+FoxP3+ У больных снижено не
только количество, но и их супрессорная функция

6. По нашим данным, количество Т регуляторов в
периферической крови больных значительно снижено в
стадии обострения и увеличивается в стадии ремиссии
C D +C D 25+FO X P 3+ %
периф ерическая кров ь
6
5
4
3
2
1
0 M e d ia n
2 5 % -7 5 %
N o n - O u t lie r R a n g e
-1
О бо с тр е н и е Ремиссия Д оноры
Обострение ремиссия доноры

7. Регуляторные Т клетки CD4+CD25+Foxp3+ играют критическую роль в
развитии аутоиммунных заболеваний
C o r r e la t io n : r = - , 7 1 7 5
5 ,0
4 ,5
4 ,0 Рассеянный склероз: негативная
3 ,5
корреляция между
+
CD4 CD25 Foxp3
3 ,0
стадией заболевания и
+
2 ,5
2 ,0
(X axis, скоры EDSS) и
+
1 ,5 содержанием в крови больных
1 ,0 Т клеток CD4+CD25+FoxP3+ (Y
0 ,5
axis)
0 ,0
0 1 2 3 4 5 6
ED SS 9 5 % c o n f id e n c e
C o r r e la tio n : r = - ,6 8 9 1
5 ,0
4 ,5
4 ,0
Негативная корреляция между
3 ,5 количеством регуляторных
+
CD4 CD25 Foxp3
3 ,0 Т-клеток CD4+CD25+Foxp3+
в периферической крови
+
2 ,5
2 ,0
больных (Y axis)
+
1 ,5
1 ,0
и длительностью РС
0 ,5 (X axis, месяцы)
0 ,0
-2 0 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220
длите льность Р С 9 5 % c o n f id e n c e

8. Дефицит регуляторных Т клеток в организме
больного можно компенсировать. Клетки
предшественники Т регуляторов можно
выделить из периферической крови
пациента, вырастить ex vivo и ввести обратно

9. Благодаря своим супрессорным характеристиками, Т рег
клетки становятся привлекательны для адаптивной
иммунотерапии при аутоиммунных заболеваниях.
Существуют многочисленные исследования в моделях на
животных, где показана эффективность применения этих
клеток
Адаптивно перенесённые T регуляторы
• лечат колит (Mottet C. e.a., 2003),
• останавливают диабет в начале заболевания (Tang Q e.a.,
2004),
• подавляют экспериментальный аутоиммунный
энцефаломиелит (Kohm A.P. e.a.,),
• замедляют прогрессию коллаген-индуцированного артрита
в эксперимерте (Morgan M.E. e.a., 2005)
• предотвращают развитие РТПХ (Cohen J.L. e.a. 2002,) и
отторжение трансплантата (Hara M. e.a., 2001).

10. Индукция CD4+CD25+Foxp3+ T клеточных клонов
Забор крови больного
Подкожная инъекция
клеток пациента
Выделение мононуклеарных
клеток крови
в градиенте плотности
Иммунофенот
пический
анализ клеток
Индукция Т рег CD4+CD25+Foxp3+ в среде RPM
Коньюгация CD4+ Т клеток с 1640 с 5% сыворотки больного в присутствии
магнитными шариками ростовых факторов
Выделение клеток

12. Рассеянный склероз: Результаты инъекций полученных ex vivo
CD4+CD25+FoxP3+ Tрегуляторов
Боль- Скоры Количество Т Количество Количество Т Скоры
ные EDSS, регуляторо в введённых регуляторов EDSS,
периферичес- больному в после
Воз- (перед кой крови в клеток периферичес- инъек-
раст инъекц перед CD4+CD25+ кой крови ции
ией инъекцией Foxp3+ x107 через 2 клеток
клеток) недели после
инъекции
клеток
T.M., 2.5 0.7% 355 1.1% 1.5
26
E.T., 2.5 0.7% 400 1.5% 1.0
33
A.Z., 3.0 0.4% 273 1.1 % 2.0
29
A.C., 3.0 0.4% 250 1.4% 1.5
37

15. Девочка (1 год) с диагнозом Миелодиспластический синдром, у которой после
пересадки костного мозга развилась кожная форма «Реакции трансплантат
против хозяина», III cтадия

16. 18 дней после одной инъекции регуляторных Т клеток

17. Заключение
• Мы не отметили каких-либо различий между количеством
выращенных регуляторных Т клеток у больных по сравнению с
клетками здоровых доноров
• У пациентов не зарагистрировано каких-либо побочных
эффектов после инъекции регуляторных Т клеток
• Клеточная терапия сопровождалась клиническими улучшениями
• Адаптивный перенос T регуляторных клеток может
предотвратить обострение и лечить многие воспалительные
и аутоиммунные заболевания
• Т регуляторные клетки больного, размноженные ex vivo, могут
быть использованы для индукции донор-специфической
трансплантации

18. Применение технологии Regenex
при других заболеваниях
• Неспецифический язвенный колит, болезнь Крона
• Диабет I типа
• Ревматоидный артрит
• Псориаз
• Болезнь Шёгрена
• Аллергические заболевания, бронхиальная астма
• Подавление реакции трансплантат против хозяина
(РТПХ)
• Подавление отторжения трансплантата при пересадках
почки, сердца, лёгких

19. Псориаз: динамика кожных изменений после 5 инъекций Т рег клеток в период 3 месяца

20. Next steps:
• International patent (supported by Skolkovo) 2012
• Professional business plan development (supported
by Skolkovo) 2012
• Multicenter national (Russia) trial and registration of
technology in Russia (2012 - 2014)
• State insurance reimbursement for some categories
of patients (children, disabled) - 2014
• Start providing service in Russia ( beginning 2015)
• Going international: FDA application ( depending on
partner)

21. Basic Business model
• Product: cultivating T reg from patients’ blood
( Regenex central lab)
• Point of service: hospitals and other
healthcare providers
• Payers:
– State insurance fund
– Private insurance companies
– Out of pocket