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Colorante. 
Coloraciones y 
Anticoagulantes 
Lic, Christiam Albornos Andrade 
Instituto Superior Tecnológico Daniel A. 
Carrión 
Curso: Hematología I
Colorantes y Coloraciones 
O Coloración: es el proceso mediante el 
cual un cuerpo es teñido por una 
sustancia colorante sin perder el color 
cuando es lavado con el disolvente 
utilizado al preparar la solución colorante. 
O Colorante: son aquellas sustancias que 
pueden conferir color a otros cuerpos. Es 
una estructura molecular no saturada 
(sales neutras)
Tipos de Coloración 
OProgresiva: es aquella en donde se hace 
actuar el colorante hasta que llegue a su 
punto optimo teniendo un control en los 
tiempos de coloración (Hematoxilina de 
Mayers) 
ORegresiva: es en donde se realiza 
primero una sobre coloración y luego se 
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diferenciadores. (Diferenciación)
O El mecanismo fisicoquímico de la coloración 
tisular esta vinculado a la formación de uniones 
intermoleculares por atracción electrostática 
(entre cargas contrarias-electro adsorción) o por 
fuerzas d tensión superficial (interacción 
molecular entre los líquidos por fuerzas de 
gravitación generadas al dispensar las moléculas 
muy próximas entres si)
Tinciones de Romanowsky 
O Tinción Giemsa (protozoos) 
1g colorante, 66ml metanol y 66 ml 
glicerol 
Buffer a pH 6.8 
O Tinción Wright 
0.3g colorante, 97ml metanol y 3 ml 
de glicerol. 
Buffer a pH 7.2
O Tinción de May-Grünwald o Jenner 
(variante del Wright), no produce efecto 
cromático pero si ayuda a observar las 
granulaciones leucocitarias.
Característica General 
O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una 
combinación de colorantes básicos y ácidos 
O 1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich 
Romanowsky 
O Conformados por: 
O Colorante catiónico (Azur B) 
O Colorante aniónico (Eosina) 
O Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y 
Wright 
O Adición de glicerol => Giemsa (aumentar 
estabilidad)
Anticoagulantes usados en 
Hematología 
O Anticoagulante: sustancia que bloquea el 
mecanismo de coagulación evitando la 
formación de fibrina (coagulo) 
O Uso: obtención de plasma 
O Mantienen la morfología y fisiología 
sanguínea. 
O No usarlo por mas de 24h a 4°C 
O Los mas usado son: EDTA, Heparina sódica, 
Heparina de litio, citrato trisodico, ACD, 
Oxalato de potasio.
EDTA (C10H16N2O8) 
O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica. 
(etilendiaminotetraacético) 
O Acción quelante (Ca++) 
O Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis 
sanguíneo. 
O Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio 
(solubilidad) 
O ICSH recomienda la sal dipotasica 
O K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de 
calcio iónico y el pH para una solución al 1% es 
de 4.8+/-1,0 
O Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre
HEPARINA SODICA, 
HEPARINA DE LITIO 
O Anticoagulante fisiológico 
O Impide la transformación de protrombina a 
trombina. 
O No es recomendado para el usado de 
frotis sanguíneo. 
O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg por 
ml de sangre 
O Usado para pruebas de fragilidad 
osmótica.
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O Impide que el calcio se ionice. 
O Utilizado para las pruebas de hemostasia 
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O Proporción 9: 1 (hemostasia) 
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O Se utiliza en una concentración de de 
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C6H5O7Na3.2H2O).
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Sangre para la conservación de unidades. 
O Proporción usada: un volumen de ACD 
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O Composición: 
O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2 g, 
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colorantes. coloraciones y anticoagulantes

  • 1. Colorante. Coloraciones y Anticoagulantes Lic, Christiam Albornos Andrade Instituto Superior Tecnológico Daniel A. Carrión Curso: Hematología I
  • 2. Colorantes y Coloraciones O Coloración: es el proceso mediante el cual un cuerpo es teñido por una sustancia colorante sin perder el color cuando es lavado con el disolvente utilizado al preparar la solución colorante. O Colorante: son aquellas sustancias que pueden conferir color a otros cuerpos. Es una estructura molecular no saturada (sales neutras)
  • 3. Tipos de Coloración OProgresiva: es aquella en donde se hace actuar el colorante hasta que llegue a su punto optimo teniendo un control en los tiempos de coloración (Hematoxilina de Mayers) ORegresiva: es en donde se realiza primero una sobre coloración y luego se elimina el resto del colorante por medio d diferenciadores. (Diferenciación)
  • 4. O El mecanismo fisicoquímico de la coloración tisular esta vinculado a la formación de uniones intermoleculares por atracción electrostática (entre cargas contrarias-electro adsorción) o por fuerzas d tensión superficial (interacción molecular entre los líquidos por fuerzas de gravitación generadas al dispensar las moléculas muy próximas entres si)
  • 5.
  • 6. Tinciones de Romanowsky O Tinción Giemsa (protozoos) 1g colorante, 66ml metanol y 66 ml glicerol Buffer a pH 6.8 O Tinción Wright 0.3g colorante, 97ml metanol y 3 ml de glicerol. Buffer a pH 7.2
  • 7. O Tinción de May-Grünwald o Jenner (variante del Wright), no produce efecto cromático pero si ayuda a observar las granulaciones leucocitarias.
  • 8.
  • 9. Característica General O 1879: Paul Ehrlich comenzó con una combinación de colorantes básicos y ácidos O 1891: Ernst Malchowski y Dimitry Leonidovich Romanowsky O Conformados por: O Colorante catiónico (Azur B) O Colorante aniónico (Eosina) O Metanol (disolvente) – Fijación => Leishman y Wright O Adición de glicerol => Giemsa (aumentar estabilidad)
  • 10.
  • 11.
  • 12. Anticoagulantes usados en Hematología O Anticoagulante: sustancia que bloquea el mecanismo de coagulación evitando la formación de fibrina (coagulo) O Uso: obtención de plasma O Mantienen la morfología y fisiología sanguínea. O No usarlo por mas de 24h a 4°C O Los mas usado son: EDTA, Heparina sódica, Heparina de litio, citrato trisodico, ACD, Oxalato de potasio.
  • 13. EDTA (C10H16N2O8) O Presentación: disodica, dipotasica o tripotasica. (etilendiaminotetraacético) O Acción quelante (Ca++) O Uso: recuentos celulares, Hematocrito y frotis sanguíneo. O Sales de potasio tienen ventaja sobre las de sodio (solubilidad) O ICSH recomienda la sal dipotasica O K2EDTA .2H2O (PM:404,1g) 1g quela 100 mg de calcio iónico y el pH para una solución al 1% es de 4.8+/-1,0 O Cantidad: 1.5 – 2.2 mg por ml de sangre
  • 14. HEPARINA SODICA, HEPARINA DE LITIO O Anticoagulante fisiológico O Impide la transformación de protrombina a trombina. O No es recomendado para el usado de frotis sanguíneo. O Proporción es de 0.1 ó 0.2 mg a 1mg por ml de sangre O Usado para pruebas de fragilidad osmótica.
  • 15. Citrato Sódico (C6H5O7Na3) O Impide que el calcio se ionice. O Utilizado para las pruebas de hemostasia y pruebas de sedimentación O Proporción 9: 1 (hemostasia) O Proporción 4:1 (pruebas de sedimentación) O Se utiliza en una concentración de de 0.106 mol/l (31,3 g/L de C6H5O7Na3.2H2O).
  • 16. ACD O Usado fundamentalmente en Banco de Sangre para la conservación de unidades. O Proporción usada: un volumen de ACD con 4 volúmenes de sangre O Composición: O Acido Cítrico 0.9 g, Citrato disódico 2 g, Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 ml.