1. UNIDAD 2 TÉCNICAS
MICROBIOLÓGICAS
2.2 MÉTODOS DE CULTIVO
2.2.1 CLASIFICACIÓN Y USO
2.2.1 PREPARACIÓN Y CONTROL

2. MÉTODOS DE CULTIVO
 Se denomina “medio de cultivo” a cualquier
material que presente una adecuada combinación
de nutrientes para permitir el crecimiento o el
incremento del número de células de una
población microbiana.
En los Laboratorios de Microbiología se utiliza una gran
variedad de medios de cultivos para mantener las cepas, aislar
o identificar microorganismos con varias finalidades: determinar
la existencia de contaminación de alimentos, medicamentos o
cosméticos; diagnosticar alguna enfermedad, elaboración de
vacunas bacterianas, etc.

3.  CONSTITUYENTES BÁSICOS
DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
1. Fuentes de energía.
1.1 Orgánicas: carbohidratos,
proteínas, polisacáridos, grasas,
ácidos orgánicos, etc. • Componentes estructurales
celulares
1.2 Inorgánicas: Ej. amonio,
nitritos, azufre, etc. 2.1 Componentes principales:
Carbono, hidrógeno, oxígeno,
1.3 Luz. nitrógeno, azufre, fósforo,
potasio, magnesio, calcio,
hierro y sodio.
2.2 Elementos trazas:
Cobalto, zinc, molibdeno, cobre
3. Agua y manganeso.
2.3 Factores de crecimiento.

4.  CLASIFICACIÓN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
 1. Según su estado físico
 1.1 Líquidos
 Usualmente se denominan caldos ya que
contienen los nutrientes disueltos en agua.
Permiten obtener suspensiones con un
elevado número de microorganismos. Ej.
Caldo nutritivo.

5.  Sólidos
Se pueden preparar a partir de medios
líquidos a los cuales se les añaden agentes
solidificantes como agar, gelatina o sílica
gel. Se utilizan con frecuencia en el
aislamiento y mantenimiento de los
microorganismos en el laboratorio. Ej. Agar
nutritivo.

6.  Según la naturaleza de sus constituyentes
Medios naturales o complejos
Están constituidos por sustancias complejas de origen animal o vegetal
y usualmente se complementan con el añadido de minerales y otras
sustancias. No se conocen todos los componentes del medio de
cultivo, ni las cantidades exactas en que están presentes. Ej. Extracto
de carne, extracto de levaduras.

7.  Medios sintéticos o químicamente definidos.
Se preparan a partir de ingredientes químicamente
puros y por lo tanto se puede conocer exactamente
su composición cuali y cuantitativa. Por su costo
sólo se emplean en procedimientos especiales.

8.  Según sus propósitos de uso
Medios de enriquecimiento
Se llama enriquecimiento a cualquier cultivo en medio líquido que
resulte en un incremento en el número de un tipo dado de
microorganismo en relación con el número de otros tipos de
microorganismos que puedan estar en el inóculo. Un medio de
enriquecimiento puede contener sustancias que favorezcan el
crecimiento del microorganismo que nos interesa o que inhiban el
crecimiento de los otros tipos de microorganismos presentes.

9.  Medios selectivos
Son básicamente iguales a los de
enriquecimiento, se diferencian por ser
medios sólidos y están diseñados para
el aislamiento de microorganismos
específicos.
Ej. Agar desoxicolato citrato utilizado
para el aislamiento de patógenos
entéricos.

10.  Medios diferenciales
No contienen sustancias inhibidoras, es decir, permiten el crecimiento
de muchos tipos de microorganismos, pero si contienen indicadores de
productos derivados de la actividad metabólica de los microorganismos
sobre algunos de los componentes del medio. Se utilizan para la
identificación de los microorganismos.
 Ej.: Agar base rojo fenol utilizado para detectar fermentación de
carbohidratos

11.  Medios selectivos diferenciales
A veces se combinan en un mismo medio
las características de ser selectivo y
diferencial.
Ej.: el agar Mac Conkey contiene sales
biliares y cristal violeta, que inhiben el
crecimiento de las bacterias gram
positivas. Pero como también contiene
lactosa y un indicador de pH permite
distinguir entre las bacterias
fermentadoras de lactosa y las que no lo
son.

12. PREPARACIÓN Y CONTROL
 Los medios de cultivo se pueden preparar en el laboratorio a partir
de cada uno de sus constituyentes básicos, o por simple
rehidratación de productos asequibles comercialmente (medios de
cultivo deshidratados). Generalmente se prefiere el uso de los
medios de cultivo deshidratados porque, además de simplificar el
trabajo, con ellos se tiene mayor probabilidad de obtener resultados
reproducibles.

13.  Para su preparación se deben tener en cuenta los siguientes
aspectos:
• Prepararlos sólo a partir de productos que provengan de fabricantes o
proveedores que suministren productos de calidad.
• Utilizar agua destilada o desmineralizada con una calidad
microbiológica y fisicoquímica adecuada.
• Utilizar materiales de vidrio bien lavados y enjuagados con agua
destilada o desmineralizada.
• Controlar el tiempo y la temperatura recomendada durante su
esterilización. Nunca se deben exceder las condiciones señaladas por
el fabricante.

14. CONTROL
 ALMACENAMIENTO DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
Los medios de cultivo deshidratados se deben
almacenar en envases sellados bajo las
condiciones que señale el fabricante.
Generalmente se almacenan en un lugar fresco
(entre 15 y 25 ), con poca humedad y protegidos
de la luz solar directa. Nunca se deben
almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra
fuente de calor o vapor.

15. REFERENCIAS
 http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_fa
rmacia/catedraMicro/10_Preparaci%C3%B3n_de_
medios_de_cultivo.pdf
 http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_fa
rmacia/catedraMicro/08_Tema_5_Cultivo.pdf