Práctica de laboratorio realizada en el Laboratorio de la Facultad de Ciencias Químicas Ext. Ocozocoautla, Chiapas, de la carrera en Químico Farmacobiólogo, respecto a la materia de Biología Celular 2° semestre.

1. REPORTE DE PRÁCTICA
PRÁCTICA 10 EXTRACCIÓN DE ADN
ASIGNATURA: LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR
DOCENTE: DRA. ANA OLIVIA CAÑAS URBINA
2° SEMESTRE
LIC. EN QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO
INTEGRANTES DEL EQUIPO:
ÁLVAREZ OCAÑA JOHNNY A.
DOMÍNGUEZ MUÑOZ DEYANIRA A.
GÓMEZ CASTELLANOS DANIELA GPE.
MALDONADO GÁLVEZ ALEJANDRA
OCOZOCOAUTLA DE ESPINOZA, CHIAPAS; A 11 DE NOVIEMBRE DE 2015

2. ANTECEDENTES.
“El ADN por las siglas de Acido Desoxirribonucleico, es una molécula de gran
tamaño que guarda y transmite de generación en generación toda la información
necesaria para el desarrollo de todas las funciones biológicas de un organismo”.
“El ADN fue identificado inicialmente en 1868 por Friedrich Miescher, biólogo
suizo, en los núcleos de las células del pus obtenidas de los vendajes quirúrgicos
desechados y en el esperma del salmón. Él llamó a la sustancia nucleína, aunque
no fue reconocida hasta 1943 gracias al experimento realizado por Oswald Avery”.
“La estructura del ADN es una pareja de largas cadenas de nucleótidos. La
estructura de doble hélice del ADN fue descubierta en 1953 por James Watson y
Francis Crick. Una larga hebra de ácido nucleico está enrollada alrededor de otra
hebra formando un par entrelazado. Dicha hélice mide 3,4 nm de paso de rosca y
2,37 nm de diámetro, y está formada, en cada vuelta, por 10,4 pares de
nucleótidos enfrentados entre sí por sus bases nitrogenadas”.
El ADN se encuentra en el núcleo de las células, por lo tanto para poder extraer
ADN se necesitan romper las 3 membranas que lo recubren, para eso se utiliza el
detergente ya que estos emulsionan los lípidos de las membranas y las rompen.
La sal evita la unión de las proteínas al ADN, disminuyendo su solubilidad, al igual
que el jugo de piña que contiene enzimas que rompen a las proteínas. Para aislar
el ADN se hace que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua y el alcohol
separa el ADN de otras sustancias que no interesan, que quedan en la solución
acuosa.
OBJETIVO.
Observar el ADN de la cebolla.
MATERIALES.
Material
Una cebolla grande fresca
Jugo de piña
2 vasos de precipitados
Cúter
Licuadora
Alcohol n-propílico, absoluto, fenol y
al 70%
Detergente líquido para trastes
Agua destilada

3. Agitador de vidrio
Cubre bocas para filtrar
Sal
4 tubos de ensaye
METODOLOGÍA.
RESULTADOS.
Para realizar la práctica de extracción de ADN, se prepararon los materiales y la
mezcla del detergente (sirve para romper las tres membranas para llegar al
núcleo), la sal (sirve para estabilizar el pH), el jugo de piña (sirve para asegurar el
ADN) y el alcohol (funciona como un separador de fases, es decir mientras que el
ADN esta diluido en el agua, al agregar alcohol éste queda suspendido).
Se pretendió realizar la extracción con cuatro diferentes alcoholes:
1.- alcohol absoluto
2.- alcohol a 70°
3.- alcohol n- propílico
4.- fenol
Paso 1
•Identificar el centro de la cebolla y cortarlo en cubos
Paso 2
•En un vaso de precipitado agregar 3 cucharadasdedetergente, una de sal y agua hasta llenar el
vaso.Mezclar perfectamente.
Paso 3
•Vaciar la mezcla en el vaso de la licuadora,agregar los trozos decebolla y licuar por 3 minutos.
Paso 4
•Filtrar en un vaso de precipitado
Paso 5
•Añadir 3 cucharaditasdel jugo de piña y mezclar con el agitador devidrio.Colocar en los tubos
de ensaye un poco de esta mezcla.
Paso 6
•Agregar poco a poco el alcohol,resbalandolo por las paredes,hasta quesellene el vaso y los
tubos de ensaye. Dejar reposar por 3 minutos.
Paso 7
•A los 3 minutos se observa una zona turbia,extraer las fibrasdeADN de esta zona.

4. Se colocó en cuatro tubos de ensaye cierta parte de la muestra, después de esto
se añadió, cierta cantidad de alcohol a cada tubo y estos sirvieron como control, a
parte de los tubos de ensaye se colocó una mayor parte de la mezcla en un vaso
de precipitado y se le añadió alcohol n- propílico.
Se esperó el tiempo que nos sugería la metodología, y se
observaron los resultados, se esperaba que al añadir el
alcohol a la mezcla se identificaran fácilmente las hebras
del ADN, sin embargo, no fue así,
En el alcohol absoluto se lograron
identificar pequeñas bolitas, que se
deducía era el ADN.
En el alcohol a 70° no se logró la
separación del ADN ya que no hubo
ningún cambio o bien no se identificaron
las tres fases como en el n-propílico.
En el alcohol n-propílico si se logró observar la diferencia de las
fases, tanto en el vaso como en el tubo de ensaye, en la parte
inferior se observó una parte más obscura que al ir subiendo se
convertía en más claro hasta transparente, en la parte del medio
se encontraba el ADN, que al intentar sacar la hebra de ADN, no
se logró.
Con el fenol, definitivamente la reacción no funcionó, en la parte de abajo se formó
un “hueco” transparente.
Al final se intentó tomar las hebras de ADN con un hisopo, sin embargo no se
logró, este fenómeno ocurrido lo atribuimos a diferentes factores,
DISCUSIÓN DE RESULTADOS.
Los resultados obtenidos no fueron exactamente los esperados de acuerdo a la
metodología utilizada en la práctica, se piensa que esto se debe a varios factores,
tales como:
 Las cantidades utilizadas no fueron trabajadas sobre unidades de
medidas(ej.mg, gr, ml, L)
 La falta de alcohol al 96% que se requería la práctica.
 El agua destilada que se utilizó no se encontraba fría.

5.  El jugo de piña no se coló previamente por lo tanto contenido impurezas.
 En otra práctica realizada con anterioridad se observó que no se utiliza
licuadora, sino mortero con pistilo por lo que piensa que la licuadora pudo
haber sido segmentado demasiado al ADN.
 A parte de hacer la mezcla en un vaso precipitado, como control se realizó
en tubo de ensayo; en donde se observó una mejor separación de fases.
Por lo tanto la metodología se considera esta errada.
CONCLUSIÓN.
En conclusión, al obtener los resultados esperados se aconseja la revisión de
la metodología de esta práctica, por lo que al ser una práctica a realizar en un
laboratorio de nivel básico, no se maneja un completo control de las variables,
por lo tanto la extracción de ADN no es tan sencillo como se preveía.
CUESTIONARIO.
1.- ¿Podrían extraer ADN de otros materiales?, ¿de cuáles?
Sí, siempre y cuando sean materiales qué estén dentro de la categoría de “seres
vivos”, ya que éstos poseen células, unidades fundamentales para la vida. Tanto
los vegetales, como los animales, incluso microorganismos poseen el material
genético, que los hace únicos en su especie, ya que controla los procesos vitales y
alberga el material genético.
2.- ¿Podrían distinguir simple vista el ADN de distintos seres vivos?, ¿Por
qué?
Si se realiza un experimento similar al de ésta práctica pues sí, ya que el ADN se
encuentra de forma condensada, pero con esto, se logra desenrollar al ADN,
pudiéndose observar a simple vista. De otra forma ver el ADN es en realidad
imposible de observar para el ojo humano, ya que el ADN dentro del núcleo de las
células se encuentra en un aproximado de 22-26 Angstroms aclarando que puede
variar según la especie. Si tenemos en cuenta que 1 Angstroms=0.1 nm, entonces
hablaríamos de 2.2 a 2.6 nm

6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
EcuRed. (22 de diciembre de 2006). EcuRed.com. Recuperado el 10 de
noviembre de 2015, de www.ecured.cu/index.php/ADN
Herrera, M. (2012). Extracción y separación de ADN. Recuperado el 10 de
noviembre de 2015, de http://biologocalentano.blogspot.mx/2012/03/practica-de-
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Icarito. (19 de mayo de 2010). Icarito.cl. Recuperado el 10 de noviembre de 2015,
de www.icarito.cl/enciclopedia/articulo/segundo-ciclo-basico/ciencias-
naturales/estructura-y-funcion-de-los-seres-vivos/2009/12/60-7958-9-el-adn.shtml
Limón S., Mejía J. y Aguilera J. (2014): Ciencias 1. Biología. Secundaria
fundamental 1er grado. Ediciones Castillo, México D.F. pp 236
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Syngenta. (s.f.). ¿Qué es ADN? Recuperado el 10 de noviembre de 2015, de
http://www.syngenta.com.mx/que-es-adn.aspx