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Crecimiento microbiano
Crecimiento Microbiano:

Cambio en el número de células
por una unidad de tiempo
determinada.


Tiempo de generación
(duplicación):

Tiempo requerido para que una
célula se divida en dos.
El tiempo puede ser minutos,
hora o días.
30 minutos
30 años
Alteración biológica
Número de bacterias


                                       Patógenos
                                       Toxinas




                      0123456
                      Tiempo (horas)
Favorecido por:
Número de bacterias


                                       Temperatura
                                       Composición
                                       Actividad de Agua
                                       Carga microbiana




                      0123456
                      Tiempo (horas)
FASES DE CRECIMIENTO
MICROBIANO:

El crecimiento de un cultivo microbiano se divide en tres
etapas claramente diferenciables:
                                                                                                          3
                                                                                                              4
                                                                                                 2
Fase de latencia:
Etapa en la cual un inóculo proveniente de otro medio de




                                                             Nº de microorganismos viables
cultivo al ser puesto en un medio fresco no crece.

Fase exponencial:
Etapa en la que las células están dividiéndose, por lo que
crecen de manera exponencial. La velocidad varía de una
especie a otra y depende de parámetros ambientales como
la temperatura.

                                                                                             1
Fase estacionaria:
Etapa en la que los nutrientes se agotan y el crecimiento
exponencial cesa.Hay actividad metabólica de síntesis y
energía.
                                                                                                     Tiempo
Fase de muerte:
Las células ya no crecen ni realizan actividades
metabólicas. Hay lisis celular.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
                                      Nutrientes
Temperatura


pH                                     Tiempo




Disponibilidad
                            Oxígeno
de agua
Temperatura
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Temperatura
Cada microorganismo es capaz de crecer en un rango muy determinado de
temperatura. Este rango es conocido como temperaturas cardinales y establece las
temperaturas mínimas, máximas y óptimas de crecimiento en función de la
velocidad de crecimiento y la temperatura de incubación.

La temperatura mínima es a la que el microorganismo ya no se detecta crecimiento
a valores más bajos de temperatura. La actividad metabólica es mínima, las
membranas se hacen más rígidas y los procesos de transporte son limitados o
inexistentes.

La temperatura optima es cuando el microorganismo registra la máxima velocidad
de crecimiento y las reacciones enzimáticas ocurren a la máxima velocidad posible.

La temperatura máxima es en la que el crecimiento no existe y se hace insostenible
todo proceso bioquímico por la desnaturalización de proteínas y enzimas.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Acidez y alcalinidad
Al igual que con la Tº cada microorganismo tiene un rango de pH dentro del que se
puede desarrollar. A diferencia de la temperatura, el pH óptimo de desarrollo suele
ser un valor muy bien definido para cada microorganismo.

Acidófilos. Son los microorganismos que viven a valores de pH por debajo de 2.
En general los hongos tienden a tolerar valores de pH más ácidos que las
eubacterias.

Alcalófilos. Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH superiores a
10.

Neutrófilos. Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH cercano a la
neutralidad (pH 6.0 a 8.0).

INDEPENDIENTE DEL Ph DEL AMBIENTE, EL INTERIOR DE LA CÉLULA
DEBE ESTAR CERCANO A UN VALOR 7.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Actividad del agua (aw).

Para el crecimiento microbiano es fundamental contar con
agua para realizar todas las reacciones bioquímicas y
enzimáticas.

El agua difunde siempre desde una zona de alta concentración
(baja concentración de solutos) a una zona de baja
concentración de agua (alta concentración de solutos).

La actividad de agua depende de la disponibilidad de ésta en
el medio ambiente y de la concentración de solutos presentes
en ella. Por lo que se relaciona bien con las concentraciones de
NaCl.
Actividad de agua
La disponibilidad de agua que se encuentra libre en el mismo y
es necesaria para que las bacterias se multipliquen. Este agua
quot;no comprometidoquot; con ningún nutriente recibe el nombre de
actividad de agua (Aw). y se indica con un número que va desde
0 hasta 1.
                                  Aw
                   Alimento

                                  0.98
                   Carne
                                  0.99
                   Leche
                                  0.70
                   Harina
                                  0.60
                   Galletas
Cuanto más cercano a cero es ese valor, menos disponible está
el agua para las bacterias.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Actividad del agua (aw).

HALÓFILOS. Microorganismos que requieren del ión sodio
para desarrollarse.
Halófilos discretos (1-6 %)
Halófilos moderados (6-15 %)
Halófilos extremos (15-30 %)

OSMÓFILOS. Microorganismos que viven en presencia de
altos valores de azúcares

XERÓFILOS. Microorganismos que viven en presencia de
alta sequedad o ausencia de agua.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Nutrientes.

Los microorganismos que son patógenos son considerados
HETERÓTROFOS. Esto significa que al igual que un ser
humano, ellos requieren de:

Carbono
Nitrógeno
Azufre
Microelementos

Todos estos elementos están disponibles para ellos en nuestros
alimentos al igual que para nosotros.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Nitrógeno
Se requiere en la forma amina y se obtiene de proteínas.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Carbono
Se obtiene de los carbohidratos y proteínas.
Factores ambientales y crecimiento
microbiano.
Oxígeno.

AEROBIOS. Microorganismos que viven en ambientes con
tensiones normales de oxígeno (21 % de O2).

MICROARÓFILOS. Microorganismos que viven en
presencia de niveles de oxígeno que están bajo la
concentración presente en el aire (<21 %).

ANAEROBIOS FACULTATIVOS. Microorganismos que
pueden vivir en ausencia de oxígeno o en su presencia.

ANAEROBIOS. Microorganismos incapaces de crecer en
presencia de O2.
Esterilización y Desinfección
o Dentro del área de la salud pública, controlar el crecimiento
  bacteriano es fundamental para prevenir la transmisión de
  enfermedades infecciosas e intoxicaciones alimentarias.


o El crecimiento microbiano puede ser controlado aplicando
  procedimientos que limiten dicho crecimiento (inhibición), o que
  maten los microorganismos de un ambiente particular.


o Estos procedimientos pueden ser físicos o químicos.


o En términos generales, ellos comprenden la esterilización, la
  desinfección y el uso de antimicrobianos.
Desinfección: tiene por objeto la destrucción
de los microorganismos con el fin de disminuir
su número a niveles mínimos. Esto se logra
mediante el uso de agentes químicos
denominados desinfectantes.
Asepsia:    término     aplicado    a    los
procedimientos utilizados para prevenir que
los microorganismos progresen en un
ambiente    determinado,     por   ejemplo:
quirófanos, líneas de procesamineto de
alimentos,  líneas   de   conservación    de
alimentos.
Antisépticos: agentes desinfectantes que
pueden aplicarse sobre las superficies
corporales con el fin de reducir la microbiota
normal y los contaminantes microbianos de
carácter patógeno. Tienen un menor grado de
toxicidad que los desinfectantes y en general,
menor grado de actividad.
Esterilización: es un proceso (físico o químico), que destruye toda
forma de vida microbiana, incluidas las esporas.
Métodos               Tipos                                Procedimiento                                       Condiciones de uso
                                    Horno a presión que consiste en una cámara en la que el aire puede         121ºC a 1 atmósfera de presión
FISICOS                             ser sustituido por vapor de agua a presión. Útil para esterilizar medios   por 15 a 20 min.
                Autoclave
                                    de cultivo o soluciones.
 Calor húmedo

                                    Se somete el producto que se desea esterilizar, a calentamientos            56 a 100ºC por 30 min. Intervalo
                Tindalización
                                    intermitentes entre 56 y 100ºC. En los intervalos se deja a 37ºC o a       a 37ºC. Repetir el ciclo.
                                    temperatura ambiente.
                Flameado            Exposición de un objeto pequeño al efecto de una llama hasta               Alta temperatura
                                    incandescencia (ej. asa de cultivo a la llama del mechero).
                                    Aplicación de alta temperatura a aquellos productos en los que no
                Incineración        importa se destrucción (ej. desechos como apósitos, basura, etc.).         Alta temperatura
  Calor seco
                                    Horno en el que se aplica aire caliente, que, al tener menor eficacia
                Horno Pasteur       que el calor directo, se aplica a altas temperaturas por largo tiempo.     180ºC por 2 h.
                                    Eficaz para esterilizar material de vidrio y metales (ej. instrumental
                                    odontológico).
 Radiaciones    Luz ultra violeta   Útil en la preparación de vacunas, esterilización de áreas hospitalarias
                                    críticas (quirófanos, salas de prematuros, etc.).

                Ionizantes          Se usan principalmente en procesos industriales para esterilizar
                                    dispositivos quirúrgicos (guantes, jeringas).


  Filtración                        Útil para esterilizar líquidos. Los microorganismos quedan retenidos en
                                    el filtro.




QUIMICOS                            Gas inflamable eficaz en la esterilización de sustancias termolábiles:
                                    prótesis, catéteres, etc. Después de aplicar se debe airear el material
                Oxido de etileno                                                                               Se expone el material a 5-10% de
                                    debido al carácter mutagénico del gas.                                     óxido de etileno en anhídrido
                                                                                                               carbónico a 50-60ºC con humedad
                                    En forma gaseosa y en cámara cerrada se usa en la esterilización           controlada por 4-6 h.
                                    hospitalaria y en la industria farmaceútica. También se usa como           Se usa disuelto en agua al 40%.
                                    desinfectante ambiental en salas altamente contaminadas, que una vez
                Formaldehído
                                    tratadas deben airearse.
                                    Se emplea sobre todo en oftalmología y otorrinolaringología. En la
                                    esterilización de instrumentos ópticos y los usados en terapia
                Glutaraldehído                                                                                 Se aplica sumergiendo el material
                                    respiratoria.                                                              en una solución al 2%.
Esterilización: es un proceso (físico o químico), que destruye toda
forma de vida microbiana, incluidas las esporas.
Antimicrobianos: sustancias químicas producidas por
microorganismos       (antibióticos)    o     sintetizadas
químicamente (agentes quimioterapeúticos), los cuales a
bajas concentraciones son capaces de inhibir, e incluso de
destruir, microorganismos sin producir efectos tóxicos
en el huésped. En relación al microorganismo que inactivan
se    clasifican   como    antibacterianos,    antivirales,
antifúngicos y antiprotozoarios.
Los antimicrobianos ejercen su acción          en forma
específica sobre alguna estructura o función   microbiana.
Poseen una elevada potencia biológica, es      decir, que
inhiben o destruyen las bacterias a            muy baja
concentración.
Presentan una toxicidad selectiva, es decir, una mínima
toxicidad para las células del organismo huésped. Esto es
una diferencia fundamental con los antisépticos y
desinfectantes, que también poseen alta eficacia
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Crecimiento Microbiano

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Crecimiento Microbiano

  • 2. Crecimiento Microbiano: Cambio en el número de células por una unidad de tiempo determinada. Tiempo de generación (duplicación): Tiempo requerido para que una célula se divida en dos. El tiempo puede ser minutos, hora o días.
  • 4.
  • 5.
  • 6.
  • 7. Alteración biológica Número de bacterias Patógenos Toxinas 0123456 Tiempo (horas)
  • 8. Favorecido por: Número de bacterias Temperatura Composición Actividad de Agua Carga microbiana 0123456 Tiempo (horas)
  • 9. FASES DE CRECIMIENTO MICROBIANO: El crecimiento de un cultivo microbiano se divide en tres etapas claramente diferenciables: 3 4 2 Fase de latencia: Etapa en la cual un inóculo proveniente de otro medio de Nº de microorganismos viables cultivo al ser puesto en un medio fresco no crece. Fase exponencial: Etapa en la que las células están dividiéndose, por lo que crecen de manera exponencial. La velocidad varía de una especie a otra y depende de parámetros ambientales como la temperatura. 1 Fase estacionaria: Etapa en la que los nutrientes se agotan y el crecimiento exponencial cesa.Hay actividad metabólica de síntesis y energía. Tiempo Fase de muerte: Las células ya no crecen ni realizan actividades metabólicas. Hay lisis celular.
  • 10.
  • 11.
  • 12.
  • 13. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Nutrientes Temperatura pH Tiempo Disponibilidad Oxígeno de agua
  • 15. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Temperatura Cada microorganismo es capaz de crecer en un rango muy determinado de temperatura. Este rango es conocido como temperaturas cardinales y establece las temperaturas mínimas, máximas y óptimas de crecimiento en función de la velocidad de crecimiento y la temperatura de incubación. La temperatura mínima es a la que el microorganismo ya no se detecta crecimiento a valores más bajos de temperatura. La actividad metabólica es mínima, las membranas se hacen más rígidas y los procesos de transporte son limitados o inexistentes. La temperatura optima es cuando el microorganismo registra la máxima velocidad de crecimiento y las reacciones enzimáticas ocurren a la máxima velocidad posible. La temperatura máxima es en la que el crecimiento no existe y se hace insostenible todo proceso bioquímico por la desnaturalización de proteínas y enzimas.
  • 16.
  • 17.
  • 18. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Acidez y alcalinidad Al igual que con la Tº cada microorganismo tiene un rango de pH dentro del que se puede desarrollar. A diferencia de la temperatura, el pH óptimo de desarrollo suele ser un valor muy bien definido para cada microorganismo. Acidófilos. Son los microorganismos que viven a valores de pH por debajo de 2. En general los hongos tienden a tolerar valores de pH más ácidos que las eubacterias. Alcalófilos. Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH superiores a 10. Neutrófilos. Son aquellos microorganismos que viven a valores de pH cercano a la neutralidad (pH 6.0 a 8.0). INDEPENDIENTE DEL Ph DEL AMBIENTE, EL INTERIOR DE LA CÉLULA DEBE ESTAR CERCANO A UN VALOR 7.
  • 19.
  • 20. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Actividad del agua (aw). Para el crecimiento microbiano es fundamental contar con agua para realizar todas las reacciones bioquímicas y enzimáticas. El agua difunde siempre desde una zona de alta concentración (baja concentración de solutos) a una zona de baja concentración de agua (alta concentración de solutos). La actividad de agua depende de la disponibilidad de ésta en el medio ambiente y de la concentración de solutos presentes en ella. Por lo que se relaciona bien con las concentraciones de NaCl.
  • 21. Actividad de agua La disponibilidad de agua que se encuentra libre en el mismo y es necesaria para que las bacterias se multipliquen. Este agua quot;no comprometidoquot; con ningún nutriente recibe el nombre de actividad de agua (Aw). y se indica con un número que va desde 0 hasta 1. Aw Alimento 0.98 Carne 0.99 Leche 0.70 Harina 0.60 Galletas Cuanto más cercano a cero es ese valor, menos disponible está el agua para las bacterias.
  • 22. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Actividad del agua (aw). HALÓFILOS. Microorganismos que requieren del ión sodio para desarrollarse. Halófilos discretos (1-6 %) Halófilos moderados (6-15 %) Halófilos extremos (15-30 %) OSMÓFILOS. Microorganismos que viven en presencia de altos valores de azúcares XERÓFILOS. Microorganismos que viven en presencia de alta sequedad o ausencia de agua.
  • 23.
  • 24. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Nutrientes. Los microorganismos que son patógenos son considerados HETERÓTROFOS. Esto significa que al igual que un ser humano, ellos requieren de: Carbono Nitrógeno Azufre Microelementos Todos estos elementos están disponibles para ellos en nuestros alimentos al igual que para nosotros.
  • 25. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Nitrógeno Se requiere en la forma amina y se obtiene de proteínas.
  • 26. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Carbono Se obtiene de los carbohidratos y proteínas.
  • 27. Factores ambientales y crecimiento microbiano. Oxígeno. AEROBIOS. Microorganismos que viven en ambientes con tensiones normales de oxígeno (21 % de O2). MICROARÓFILOS. Microorganismos que viven en presencia de niveles de oxígeno que están bajo la concentración presente en el aire (<21 %). ANAEROBIOS FACULTATIVOS. Microorganismos que pueden vivir en ausencia de oxígeno o en su presencia. ANAEROBIOS. Microorganismos incapaces de crecer en presencia de O2.
  • 28.
  • 29.
  • 30.
  • 31. Esterilización y Desinfección o Dentro del área de la salud pública, controlar el crecimiento bacteriano es fundamental para prevenir la transmisión de enfermedades infecciosas e intoxicaciones alimentarias. o El crecimiento microbiano puede ser controlado aplicando procedimientos que limiten dicho crecimiento (inhibición), o que maten los microorganismos de un ambiente particular. o Estos procedimientos pueden ser físicos o químicos. o En términos generales, ellos comprenden la esterilización, la desinfección y el uso de antimicrobianos.
  • 32. Desinfección: tiene por objeto la destrucción de los microorganismos con el fin de disminuir su número a niveles mínimos. Esto se logra mediante el uso de agentes químicos denominados desinfectantes. Asepsia: término aplicado a los procedimientos utilizados para prevenir que los microorganismos progresen en un ambiente determinado, por ejemplo: quirófanos, líneas de procesamineto de alimentos, líneas de conservación de alimentos. Antisépticos: agentes desinfectantes que pueden aplicarse sobre las superficies corporales con el fin de reducir la microbiota normal y los contaminantes microbianos de carácter patógeno. Tienen un menor grado de toxicidad que los desinfectantes y en general, menor grado de actividad.
  • 33. Esterilización: es un proceso (físico o químico), que destruye toda forma de vida microbiana, incluidas las esporas.
  • 34. Métodos Tipos Procedimiento Condiciones de uso Horno a presión que consiste en una cámara en la que el aire puede 121ºC a 1 atmósfera de presión FISICOS ser sustituido por vapor de agua a presión. Útil para esterilizar medios por 15 a 20 min. Autoclave de cultivo o soluciones. Calor húmedo Se somete el producto que se desea esterilizar, a calentamientos 56 a 100ºC por 30 min. Intervalo Tindalización intermitentes entre 56 y 100ºC. En los intervalos se deja a 37ºC o a a 37ºC. Repetir el ciclo. temperatura ambiente. Flameado Exposición de un objeto pequeño al efecto de una llama hasta Alta temperatura incandescencia (ej. asa de cultivo a la llama del mechero). Aplicación de alta temperatura a aquellos productos en los que no Incineración importa se destrucción (ej. desechos como apósitos, basura, etc.). Alta temperatura Calor seco Horno en el que se aplica aire caliente, que, al tener menor eficacia Horno Pasteur que el calor directo, se aplica a altas temperaturas por largo tiempo. 180ºC por 2 h. Eficaz para esterilizar material de vidrio y metales (ej. instrumental odontológico). Radiaciones Luz ultra violeta Útil en la preparación de vacunas, esterilización de áreas hospitalarias críticas (quirófanos, salas de prematuros, etc.). Ionizantes Se usan principalmente en procesos industriales para esterilizar dispositivos quirúrgicos (guantes, jeringas). Filtración Útil para esterilizar líquidos. Los microorganismos quedan retenidos en el filtro. QUIMICOS Gas inflamable eficaz en la esterilización de sustancias termolábiles: prótesis, catéteres, etc. Después de aplicar se debe airear el material Oxido de etileno Se expone el material a 5-10% de debido al carácter mutagénico del gas. óxido de etileno en anhídrido carbónico a 50-60ºC con humedad En forma gaseosa y en cámara cerrada se usa en la esterilización controlada por 4-6 h. hospitalaria y en la industria farmaceútica. También se usa como Se usa disuelto en agua al 40%. desinfectante ambiental en salas altamente contaminadas, que una vez Formaldehído tratadas deben airearse. Se emplea sobre todo en oftalmología y otorrinolaringología. En la esterilización de instrumentos ópticos y los usados en terapia Glutaraldehído Se aplica sumergiendo el material respiratoria. en una solución al 2%.
  • 35. Esterilización: es un proceso (físico o químico), que destruye toda forma de vida microbiana, incluidas las esporas.
  • 36. Antimicrobianos: sustancias químicas producidas por microorganismos (antibióticos) o sintetizadas químicamente (agentes quimioterapeúticos), los cuales a bajas concentraciones son capaces de inhibir, e incluso de destruir, microorganismos sin producir efectos tóxicos en el huésped. En relación al microorganismo que inactivan se clasifican como antibacterianos, antivirales, antifúngicos y antiprotozoarios. Los antimicrobianos ejercen su acción en forma específica sobre alguna estructura o función microbiana. Poseen una elevada potencia biológica, es decir, que inhiben o destruyen las bacterias a muy baja concentración. Presentan una toxicidad selectiva, es decir, una mínima toxicidad para las células del organismo huésped. Esto es una diferencia fundamental con los antisépticos y desinfectantes, que también poseen alta eficacia antimicrobiana a bajas concentraciones, pero que son muy tóxicos para las células humanas.