6. 二、系谱分析 系谱分析是指通过调查先证者家庭成员的发病情况,绘出系谱,以确定疾病遗传方式的一种方法。经过分析有助于判断某种疾病是否为遗传病;又有助于确定其类型,即是单基因病还是多基因病,或是染色体病;如果是单基因病,还可进一步确定该病的遗传方式(常显、常隐、 X 显、 X 隐、 Y 连锁遗传)。系谱分析时应注意的事项是: ①要注意系谱的准确性、完整性。一个完整的系谱应有三代以上家庭成员的患病情况、婚姻状况及生育情况;还要注意了解家系往往由患者或代述人因顾虑而提供的虚假资料,影响分析结果的准确性。 ②遇到“隔代遗传”时,要注意区分是显性遗传病外显不全,还是隐性遗传所致。 ③当系谱中除先证者外,找不到其他患者,呈散发现象时,须认真分析是常染色体隐性遗传所致,还是新基因突变所致。
7. 三、细胞遗传学检查 主要适用于染色体异常综合征的诊断。它可以从形态学的角度直接观察染色体数目、结构等是否出现异常。主要包括以下两种检查方法。 (一)染色体检查或称核型分析 (二)性染色质 ( 包括 X 染色质和 Y 染色质 ) 的检查
12. (三)原理 用已知的核苷酸序列测定未知的核苷酸序列。 (四)方法 主要包括分子杂交、 DNA 体外扩增( PCR )、 DNA 单链构象多态分析法等,其中最基本的技术是核酸分子杂交技术。 1. 核酸分子杂交概念及过程示意图 2. 核酸分子杂交的应用 (五)应用 1978 年简悦威( YW Kan )首次用 DNA 重组技术进行镰刀型贫血病的产前诊断,到 1982 年普遍开始试用基因诊断技术。迄今已对数百种遗传性疾病进行基因诊断和产前基因诊断。随着检测人类基因探针的分离和克隆化,以及基因 DNA 序列的阐明,将有更多的单基因遗传病能进行基因诊断。
25. (三)产前诊断的指征 ① 夫妇一方有染色体异常或生育过染色体异常患儿的孕妇; ②夫妇一方为单基因病患者或生育过单基因病患儿的孕妇; ③ 35 岁以上的高龄孕妇; ④有不明原因习惯性流产史、畸胎史、死产史或新生儿死亡史的孕妇; ⑤夫妇一方为染色体平衡易位携带者; ⑥有脆性 X 综合征家系的夫妇或同胞中有严重 X 连锁隐性遗传病的孕妇; ⑦夫妇一方有神经管畸形者或生育过先天性神经管畸形的孕妇; ⑧羊水过多的孕妇; ⑨夫妇一方有明显致畸因素接触史; ⑩具有遗传病家族史或近亲婚配的孕妇。
26. (三)产前诊断的指征 ① 夫妇一方有染色体异常或生育过染色体异常患儿的孕妇; ②夫妇一方为单基因病患者或生育过单基因病患儿的孕妇; ③ 35 岁以上的高龄孕妇; ④有不明原因习惯性流产史、畸胎史、死产史或新生儿死亡史的孕妇; ⑤夫妇一方为染色体平衡易位携带者; ⑥有脆性 X 综合征家系的夫妇或同胞中有严重 X 连锁隐性遗传病的孕妇; ⑦夫妇一方有神经管畸形者或生育过先天性神经管畸形的孕妇; ⑧羊水过多的孕妇; ⑨夫妇一方有明显致畸因素接触史; ⑩具有遗传病家族史或近亲婚配的孕妇。
28. (五)产前诊断的方法 ① 细胞遗传学诊断:在产前诊断中最常用。以羊水中胎儿脱落细胞、绒毛细胞等为材料,对胎儿的染色体或性染色质进行检查,以确定胎儿是否患有染色体病或鉴定 X 连锁遗传病的胎儿性别。 ②生物化学诊断:应用生物化学技术测定羊水、绒毛、孕妇血清、尿中等的某些酶的活性或某些代谢产物的水平,以确定胎儿是否患有遗传性代谢病和分子病。例如,甲胎蛋白 (AFP) 、乙酰胆碱酯酶( AchE )、蛋白质(酶)的测定可以初筛开放性神经管畸形或缺陷、先天愚型、地中海贫血和异常血红蛋白症。 ③仪器诊断:是直接观察胎儿表型是否改变的主要方法。利用 X 线或超声波( A 、 M 、 B 和超声多普勒仪)、胎儿镜等方法观察胎儿的外部形态及骨骼、心脏等内部结构是否正常。 B 型超声仪更具有无创伤、效果好的优点,现已普遍使用。 ④产前基因诊断:以羊水细胞、绒毛细胞等为研究材料,进行 DNA 分析,以检测出患有遗传病的胎儿。特别适用于常规诊断方法无法取材或确诊的情况。
62. 例 7. 一位 23 岁的男青年,因患严重的佝偻病并有骨骼畸形、骨痛而行走困难,故前来咨询,询问这种病是否为遗传病?怎样传递的?能否治疗?他的子女将来是否患这种病? 佝偻病是婴儿中常见的一种疾病,一般是由于缺少维生素 D 和缺钙所引起,服用维生素 D 和钙片容易治疗,不是遗传病。而这位青年所患的佝偻病病情严重,查体可见身材矮小,下肢进行性弯曲, O 形腿,骨痛,行走困难,且病情进行加重。实验室检查表明血钙正常,血磷低、尿磷高、血清碱性磷酸酶增高,服用维生素 D 制剂不能提高血磷,故可确诊为抗维生素 D 性佝偻病。这是一种 X 连锁显性遗传病,病因是由于肾小管对磷酸盐的重吸收障碍和肠对钙的吸收不良,故又称低磷酸盐血症性佝偻病。 经详细问诊广泛收集家族史,绘制系谱。 ( 见下图 )
66. NTD 是一种多基因遗传病,除遗传基础(遗传度 60% )外,一些环境因素对发病也有重要影响。这对夫妇在再次妊娠前,可补充叶酸,维生素 B 、 C 等,并注意不吃发芽的马铃薯;并应在妊娠第 13 ~ 15 周,采取羊水进行 AFP 检测和超声波扫瞄检查作出产前诊断,以防止 NTD 患者出生。 同时,遗传咨询医师和专家应注意,对这样的病例,应进行“扩大的家庭遗传咨询”,以防止患儿的出生。
67. 例 9. 一位女性放射线科医生,婚后生了一个小头畸形的智力低下患儿,因此全家都很苦恼,担心下一个孩子还会是同样的患儿而来进行遗传咨询。 首先应向她说明,小头畸型的病因是多种多样的。存在着遗传异质性。典型的小头畸形呈染色体隐性遗传,患者除有严重智力低下,头围小,前额低斜外,还有身体矮小,耳大等特征。 在另一些家庭中,其小头畸形患儿可以是多基因遗传引起的。这样的病例往往是散发的,一般找不到明确的环境影响因素,这种情况的再发风险一般不超过 10% 。 还有的小头畸形是由于环境因素(如巨细胞病毒感染、单纯疱疹病毒感染, X 射线照射等)干扰了胚胎发育过程所致。由于咨询者是一位放射线科女医师,有较多的机会接触 X 射线,所以,她所生的小头畸形患儿有可能是 X 射线诱发的。可建议她在今后工作中,应加强对射线的防护。此外,下次妊娠时,应进行产前诊断,以检出胎儿是否为小头畸形。如确诊是小头畸形儿后,可进行选择性人工流产,以防止患儿出生。所以,可以考虑再次妊娠。