1. Vendredi 4 juin 2010
Quand et Comment demander un
bilan génétique dans les
dyslipidémies ?
Pourquoi ...
Alain Carrié
Centre de Génétique Moléculaire et Chromosomique
Laboratoire Biochimie Endocrinienne et Oncologique (Pr J. Chambaz)
UF Endocrinologie Moléculaire et Oncologique, GH Pitié-Salpêtrière
Inserm U939 (Dr J. Chapman), Hôpital de la Pitié Paris, France

3. Hegele RA. Nat Rev Genet. 2009 ;10(2):109-21

4. Hyperlipoprotéinémie de type IIa (1/20)
Formes Familiales d’hypercholestérolémies
Monogéniques
(pour revue Varret M. et al. Clin Genet. 2008: 73: 1-13)
Autosomique Dominante:
- LDL-R 1/500 (79%)
- ApoB 1/1000 (5 à 7%) Phénotype variable…
- PCSK9 Risque d’atteinte coronaire
- Hchola 4 / 5 ! >50% chez ♂ de 50 ans
>30% chez ♀ de 60 ans
Autosomique Récessive: Dépistage de ces patients
- LDLRAP1 (Très rare)
Tall A. N Engl J Med. 2006, 354 (12): 1310-1312
Statin Treatment in Children with Familial hypercholesterolemia: The Younger, the better
Rodenburg J. et al. Circulation. 2007: 116: 664-668

5. Identification des sujets à Risque
très élevé
Simon Broome Register (HEART UK) depuis 1980:
FH certaine: CT > 2,9 g/L, LDL-C > 1,9 g/L (adulte) + Xanthomes
CT > 2,6 g/L, LDL-C > 1,6 g/L (< 16 ans) + Xanthomes
FH possible: ATCD familial IDM 1er degré (<50ans) 2ème degré (60ans)
ou CT > 2,9 g/L chez parents 1er degré ou 2ème degré
MED PED (US + 14 pays) depuis 1995:
Valeurs CT et LDL-C > 95ème percentile / âge et sexe
xanthomes, ATCD personnel ou familial IDM 1er degré

6. Identification des sujets à Risque
très élevé
“Dutch Lipid Clinic Criteria” (1999):
Scores Diagnostic:
> 8, Certain
6 – 8 Probable
3 – 5 Possible
Diagnosis scoring for clinical identification of children with hFH.
Benlian P et al. J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2009 Apr;48(4):456-63

7. Identification des sujets à Risque
très élevé
Clinico-biologique versus Génétique !
Diagnostic Génétique en cascade:
Cas Index: sélection Clinico-Biologique + identification mutation.
puis recherche mutation chez apparentés
Norvège, Pays-Bas, Angleterre:
Efficacité: Lors du dépistage génétique des apparentés mutés
- 38% Pays-Bas, 53% Norvège n’étaient pas traités (93%, 89% après)
- 6% étaient aux objectifs thérapeutiques (Norvège)
- 32% CT > 3 g/L (Angleterre)
- uniquement 10% étaient correctement traités (Angleterre)
Bien toléré:
2% Pays-Bas, 5% Norvège regrettent d’y avoir été soumis
Coût: / année de vie gagnée: 3300 £ (UK); 8700$ (Pays-Bas)
à comparer aux 13300 $ par année de vie gagnée en prévention IIaire

8. Identification des sujets à Risque
très élevé
Diagnostic Génétique en cascade:
Notre expérience: LDL-C > 2,2 g/L + composante familiale
>1100 sujets testés
- 850 cas index: 490 mutés (57%, dont 92% LDL-R, 8% apoB)
- 280 apparentés: 200 mutés (71%)
Critères suggérés: LDL-C > 2,0 g/L + composante familiale

9. Ferrières J, et al. Arch Mal Coeur Vaiss. 2005; 98(2):127-32
Hypo-HDL
10ème
percentile
Phospholipide
ApoA-II
ApoA-
ApoC-I
ApoC-
ApoC-II
ApoC- 0.3 0.4
ApoE
Cholestérol
Cholesté 4.0 4.0
Non-esterifié
Non-esterifié
3.0
risque CV
ApoA-I
ApoA-
2.0
2.0
1.0
1.0
0
0,25 0,45 0,65
HDL-C (g/L)
50 % à 70% de la variabilité Kannel WB. Am J Cardiol 1983;52:9B–12B.
aurait un déterminisme génétique
Heller DA. et al., N Engl J Med, 1993, 328 ; 1150-1156
Prenger VL. et al., Am J Hum Genet, 1992, 51 ; 1047-1057

10. Génétique
Hypo-HDL
Phospholipide
ApoA-II
ApoA-
ApoC-I
ApoC-
ApoC-II
ApoC-
ApoE
Cholestérol
Cholesté 4.0 4.0
Non-esterifié
Non-esterifié
3.0
risque CV
ApoA-I
ApoA-
2.0
2.0
1.0
1.0
0
0,25 0,45 0,65
HDL-C (g/L)
50 % à 70% de la variabilité Kannel WB. Am J Cardiol 1983;52:9B–12B.
aurait un déterminisme génétique
Heller DA. et al., N Engl J Med, 1993, 328 ; 1150-1156
Prenger VL. et al., Am J Hum Genet, 1992, 51 ; 1047-1057

11. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
Bile
A-I
CL A-I
EC EC
LCAT FC
CE CL
SCARBI ABCA1
HDL Macrophage
Foie HDL Mature Naissante
apoAI, LCAT, ABCA1

12. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
Bile
apoAI
A-I
CL A-I
EC EC
LCAT FC
CE CL
SCARBI ABCA1
HDL Macrophage
Foie HDL Mature Naissante
Plus de 30 mutants identifiés
(Faux Sens+++)
Notion de Co-dominance
“Homozygotes” > hétérozygotes
Opacités cornéennes possibles (Norum…)
Brewer (1978) séquence peptide
Breslow (1982) Clonage gène
Athérosclérose non systématique
ApoAI-Milano (Franceschini 1980)
R173C… (IV, Nissen 2003)

13. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
Bile
LCAT
A-I
CL A-I
EC EC
LCAT FC
CE CL
SCARBI ABCA1
HDL Macrophage
Foie HDL Mature Naissante
Mac Lean (1986) Clonage gène
Norum et Gjone (1967)

14. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
LCAT Mesure rapport
Défaut d’estérication du Cholestérol cholestérol estérifié
cholestérol total
Glomérulosclérose
“Global”
Déficit
“ciblé HDL” Opacité Cornéenne Familial
Maladie LCAT
Yeux (FLD)
Poisson
(FED)
Anémie
http://www.lcat.it

15. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
Bile
ABCAI
A-I
CL A-I
EC EC
LCAT FC
CE CL
SCARBI ABCA1
HDL Macrophage
Foie HDL Mature Naissante
Captain John Smith
(1608)
Tangier…
John Crockett
(1686)
Dr Fredrickson
(1960)

16. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
ABCAI
Tangier…
Autosomique Récessif HypoHDLémie
Familiale
Co-Dominante
“Homozygotes” > hétérozygotes
Oram JF, Vaughan AM. Circ Res. 2006;99:1031-1043
Hépato-splénomégalie
Neuropathie périphérique…
Athérosclérose inconstante mais avérée:
MT risque vasculaire 3 à 6 fois supérieur
(Assmann G et al. In: Scriver C, Beaudet A, Sly W, et al., eds. The Metabolic and
Molecular Bases of Inherited Diseases. 8th ed. New York: McGraw-Hill; 2001:2937-2960)
50% des MT auraient une atteinte coronaire après 45 ans
(Serfaty-Lacrosniere C et al. Atherosclerosis. 1994;107:85-98)

17. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
Brooks-Wilson A et al. Nat Genet. 1999;22:336-345
ABCAI Bodzioch M et al. Nat Genet. 1999;22:347-351
Rust S et al. Nat Genet. 1999;22:352-355
Nascent HDL
LCAT
Lipid-free CETP
ApoA1 PLTP
ABCA1
Endosome
Free
LDL-R cholesterol
Cholesterol HDL3
sER HMG-CoA Red
Peripheral cell

18. Épidémiologies moléculaires …
Cohorte de 110 sujets non apparentés
HDL-C < 0,3 g/L
HDL-C ≤ 0,1 g/L 23 patients (90% mutés)
14 ABCA1 “homozygotes” (8 délétions ou Stop; 20 faux-sens)
2 ABCA1 hétérozygotes
3 LCAT “FED” “homozygotes” (2 réarrangements; 4 faux-sens)
2 ApoA1 hétérozygotes (mut récurrente)
2 Non mutés
0,1g/L < HDL-C ≤ 0,3 g/L 87 patients
1 LCAT “FED” “homozygotes” (2 faux-sens, 0,11g/L)
8 ApoA1 hétérozygotes (dont 2xMilano et 2x mut récurrente)
11 ABCA1 hétérozygotes (sur 46 sujets testés)

19. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
ABCAI
Fréquentes !!!
HDL-C < 0,3 g/L
HDL-C ≤ 0,1 g/L
14/ 23 patients (61%)ABCA1 “homozygotes”
0,1g/L < HDL-C ≤ 0,3 g/L
11 / 46 patients (24%)ABCA1 hétérozygotes

20. Étiologies moléculaires d’hypoHDLémies
primitives
ABCAI
Phénotypes !!!
Tangier…
HDL-C ≤ 0,1 g/L
4ABCA1 “homozygotes” perte de fonction
pseudosyringomyélie
0,1g/L < HDL-C ≤ 0,3 g/L
11 / 46 patients (24%)ABCA1 hétérozygotes…
Genetic variation in ABCA1 predicts ischemic heart disease in the general population.
Frikke-Schmidt R. et al. ATVB. 2008 jan; 28: 181-186
Association of loss-of-function mutations in the ABCA1 gene with HDL-C levels
and risk of ischemic heart disease.
Frikke-Schmidt R. et al. JAMA. 2008 jun; 299: 2524-2532
PHRC 2010

21. Diagnostic Génétique: Comment ?
Aspects législatifs Lois de bioéthique 1994, Décret d’application en 2000
Nouvelles lois de bioéthique en Août 2004
Décret d’application en 04/2008

23. Diagnostic Génétique: Comment ?
Prescription de l’examen génétique par équipe pluridisciplinaire
(cliniques et génétiques) spécialisée notamment lors d’une
hospitalisation (HDJ) pour apprécier le retentissement vasculaire de la
dyslipidémie.
Prélèvement, en lui-même très simple:
«2» tubes de 7ml sang total sur EDTA
Acheminés à température ambiante (<72h)
Laboratoires du Réseau de diagnostic Génétique des dyslipidémies rares:

24. Laboratoires du Réseau National
de diagnostic Génétique des dyslipidémies rares:
UF Dyslipidémies-Cardiobiologie Biochimie-Biologie Moléculaire
Dr Agnès SASSOLAS Dr Pascale BENLIAN
Groupement Hospitalier EST Hôpital Saint Antoine
59 Boulevard Pinel 184 Rue du Faubourg Saint Antoine
69677 Lyon-Bron Cedex 07 75012 PARIS Cedex 12
Laboratoire de Biochimie et de Génétique Moléculaire Centre de Génétique Moléculaire et
Dr Jean-Pierre RABÈS Chromosomique
Hôpital Ambroise Paré Dr Alain CARRIÉ
9 Avenue Charles de Gaulle UF Endocrinologie Moléculaire, Bât 6 Lapeyronie,
92104 BOULOGNE Cedex Secteur Pitié
GH Pitié Salpêtrière, 47-83 Bd de l’Hôpital
75651 PARIS Cedex 13