Simulación in vitro de los efectos causados por la plata en organismos acuáticos, peces espada y golfish cometa.

1. SIMULACIÓN in vitro DE LOS
EFECTOS CAUSADOS POR LA
PLATA EN LAS ESPECIES
XIPHOPHORUS HELLERI Y
CARASSIUS AURATUS
Baldarrago Maico Leslie1, Bobadilla Atao Leo2, Cuadros Cuya Ana3, Olivares Rodríguez Ligia4, Oré
Romero Carmen5 & Sandoval Vizcarra Carolina6
Universidad Privada del Norte (UPN). Ingeniería ambiental. Bioquímica y toxicología ambiental.
RESUMEN
La plata es un elemento químico que se usa para diversas actividades. Este no es toxico de
por sí, pero cuando se vuelven sales se convierten en un gran riesgo para la salud si se
entra en contacto, ya que puede convertirse en un cancerígeno. El proyecto busca identificar
cuáles son las reacciones que causan este químico, en forma de nitrato de plata, en el
organismo, a nivel físico y microbiológico.
Para realizar dichos estudio, se usará una simulación in vitro usando como organismos de
muestra a las especies Carassius auratus y Xiphophorus hellari. Para la identificación del
daño celular se usara la técnica de micronúcleos, una técnica fácil de realizar y de bajo
costo; además, que arroja resultados confiables.
Al realizar el proyecto de investigación, arrojo como resultado final la muerte de todos los
peces que se usaron en la prueba. Se observó que sufrieron daños físicos, descamación y
decoloración, y microbiológicos, explotaron las células.
Palabras clave: Plata, tóxico, in vitro, ensayo de micronúcleos, daños.
ABSTRACT
SILVER IS A chemical element VARIOUS ACTIVITIES usa para. This is non-toxic and of itself, but
when sales are Vuelven become Great Health Risk if it comes into contact, and may Becoming a
carcinogen . The project seeks to identify Which child the chemical reactions that cause esta in the
form of silver nitrate in the Agency , a Physical and microbiological level .
Perform For such study , in vitro Using A simulation Agencies As Displays a Species Goldfish and
Xiphophorus hellari be used. For the identification of cell damage Technique micronuclei, A
Technical Easy to make and low cost will be used ; : Also, Reliable Results That throws .
To Perform Research Project , throw As a result m final death of all fish used in the test. It was
noted suffered Physical , peeling and discoloration , microbiological Damage and exploited the cells
.
Keywords : Silver , toxic in vitro micronucleus assay , damages.

2. INTRODUCCIÓN
Según la ingeniería química Blanca
Elena Jiménez (2001). La plata es un
elemento químico pesado, que si bien
es usado para diversas actividades
económicas, puede causar severos
daños a la salud de los seres vivos, no
es tóxica de por sí, pero la mayoría de
sus sales son venenosas y pueden ser
carcinógenas.
Las sales solubles de plata,
especialmente el nitrato de plata
(AgNO3), son letales en
concentraciones de hasta 2 g. Los
compuestos de plata pueden ser
absorbidos lentamente por los tejidos
corporales, teniendo como
consecuencia pigmentación azulada o
negruzca en piel.
Estudios realizados por el
Departamento de Salud y Servicios para
Personas Mayores de New Jersey,
exponen que el nitrato de plata causa
serios riesgos para la salud, y es que
causa efectos tanto agudos, crónicos a
largo plazo, dependiendo del tiempo de
exposición, también causa un riesgo de
cáncer, así como para la reproducción.
Es por ello, que hemos decidido realizar
una simulación in vitro de los efectos
causados por la plata en un organismo.
Tomaremos como referencia el estudio
realizado por Victoria Barahona
Gomáriz (2000). Para realizar este
proyecto de curso usamos peces para
las pruebas experimentales, del género
Carassius auratus y Xiphophorus hellari,
a los cuales sometimos a diferentes
dosis de nitrato de plata para observar
su reacción, cambio físico y
microbiológico y su mortandad.
El Acuario Paradise (2013), expone que
los peces espada o Xiphophorus hellerii
son de Cuerpo alargado y
medianamente robusto, con la boca
levemente orientada hacia arriba, lo cual
nos indica que se alimenta de la
superficie. Buen nadador. Posee una
aleta caudal cuyos radios inferiores se
proyectan hacia atrás, dándole así una
cola con forma de espada, de ahí su
nombre común. Y los peces Goldfish
Cometa o Carassius auratus son de
cuerpo alargado y cuenta con una sola
aleta caudal. Es muy similar al Japones
Común con la diferencia de que el
cuerpo es más alargado, elegante y
tiene las aletas más desarrolladas. Se
les encuentra en color blanco, plata,
amarillo y tonos rojizos. Esta es la
especie de goldfish más resistente.
Para la identificación de daños a nivel
celular se usará la prueba de
micronúcleos. Según lo expuesto en la
investigación realizado por Gómez
Belinda (2006, Abril), dentro de las
ventajas de la técnica se incluyen la
facilidad y rapidez, la posibilidad de
probar un sólo químico sin otros
compuestos, la abundancia de células
analizables en diferentes periodos del
ciclo celular y el que los micronúcleos
formados durante la división celular
persisten al menos durante la siguiente
interface; además, la prueba no deja
lugar a dudas sobre el daño producido,
pues lo que se observa como
micronúcleos es claramente una
pérdida de ADN. Por otro lado, la prueba
no detecta agentes que no producen
pérdidas de material genético o rezagos
anafásicos, y tampoco es útil en
poblaciones celulares que no se dividen.

3. MATERIALES Y METODOLOGÍA
I. Materiales y equipos
 Materiales
- Comida para peces
- 5 envases de plástico de
5L
- Motor de oxígeno
- Declorador
- Pecera
- Vaso precipitado
- Probeta
 Equipos
- Microscopio
- Estereoscopio
 Reactivo
- Wright

 Especie a estudiar
- 8 Golfish cometa
(Carassius auratus)
- 8 Pez espada
(Xiphophorus hellari)
 Muestra problema
- 100ml de solución de
Nitrato de Plata
II. Procedimiento
 Preparación de la muestra
1. Se preparó 4 soluciones de AgNO3, en concentraciones de 5%, 10%, 15% y
20%.
Cálculos (Factor gravimétrico)
푋푔푟 퐴푔 =
107,87 퐴푔
169,87 퐴푔푁푂3
= 0,63 푔푟 퐴푔
Es decir, en la solución del Nitrato de plata, el 63% corresponde al elemento: plata.
Preparación de la muestra
2. A las 16 hras, en los 5 recipientes, se colocaron dicha soluciones de la
siguiente manera.
Recipiente 1 2 3 4 5
Concentración 0% 5% 10% 15% 20%
, , m
(5ml de la solución por cada litro de agua)*
Ilustración 1. Recipientes donde se llevara a cabo el experimento.

4. 3. Se dejó en periodo de prueba por 24 horas.
Ilustración 2. Inicio del experimento.
 Ensayo de micronúcleos
a) Se procede a cortar una parte del pez, con el fin de obtener una cantidad
pequeña (una a dos gotas) de sangre. La cual será esparcida, con ayuda de
un portaobjeto, sobre otro, usando la técnica del raspado.
b) Luego se espera 15 minutos como mínimo para que seque y se sumerge los
portaobjetos en alcohol frio durante 10 minutos.
c) Pasado ese tiempo, y una vez seca la muestra, utilizamos el reactivo Wright
para colorear las células. Aplicamos unas gotas sobre el portaobjeto.
d) Posteriormente, con la ayuda del microscopio se observó el cambio y /o daño
celular que sufrieron los peces.
Ilustración 3. Corte al pez para obtener muestras de sangre.
Ilustración 4. Técnica del raspado.

5. TABLA Nº 1: Vista microscópica del daño celular
RECIPIENTE CONCENTRACIÓN EXPOSICIÓN AL AgNO3
Blanco 0%
2 5%
3 10%
4 15%
5 20%

6. RESULTADOS
El ensayo realizado dio como resultado la muerte de todos los peces que se sometieron
a la prueba.
Se pudo observar una decoloración leve en la piel, así como una descamación en varias
zonas de ambas especies, Carassius auratus y Xiphophorus hellari.
El ensayo de micronúcleos arrojo un daño celular, y es que se pudo observar que las
células habían explotado por completo.
Los cuerpos de agua en donde se realizaron las pruebas cambio de color, se tornó de
color marrón oscuro.
TABLA Nº 2: Cambios físicos en el cuerpo de los peces
RECIPIENTE CONCENTRACIÓN EXPOSICIÓN AL AgNO3
Blanco 0%
2 5%
3 10%
4 15%
5 20%

7. CONCLUSIONES
Finalmente, podemos decir que la experimentación de cuán grande puede ser el daño
de la plata en seres vivos, en este caso con peces de las especies Carassius auratus y
Xiphophonus hellari, es severa; ya que, no solo se obtuvo como resultado la muerte de
todos los peces, sino que pudimos comprobar que el elemento químico ya mencionado
les causo una decoloración y descamación parcial, completa en algunos casos, a los
peces; Además, se pudo apreciar los daños a nivel celular que presentaron los
bioindicadores estudiados, como pudimos ver las células habían explotado por completo
debido al compuesto problema.
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 Riesgo toxicológico ambiental
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