1. 10
UNIVERSIDAD TÉCNICADE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LASALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICAY FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor:Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Daysi Lorena Ambuludi Farez
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N0
3
Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 23 de junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 30 de junio del 2014
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR ETANOL
Animal de Experimentación: Cobayo
Vía de Administración: Vía Parenteral.
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
Observar que sintomatología presenta el cobayo ante la intoxicación por Etanol.
Realizar las reacciones químicas correspondientes para verificar la presencia de
Etanol.
MATERIALES:
Soporte de hierro
Pinza de nuez
Vaso de precipitación 250ml
Matraz Erlenmeyer 250ml
Equipo de decisión
Bisturí
Mangueras
Balón de destilación
Agitador
Mechero de alcohol
Tabla de disección
Panema
Cronometro
SUSTANCIAS:
Agua destilada
Cloruro de fenilhidracina 4 %
Nitroprusiato de sodio 2,5 %
Hidróxido de sodio (NaOH) 0.1N
Leche
Ácido sulfúrico concentrado (H2SO4)
Cloruro férrico ( Cl3Fe )
Ácido clorhídrico (HCl)
Hidróxido de potasio 12 % (KOH)
K3Fe(CN)6
Formol
Aceite mineral
Ácido tartárico
Etanol
2. Jeringa de 10ml
Probeta de 50ml
Refrigerante
Cinta de embalaje
Aro de hierro
Fosforo
Piola
Pipetas
Pinza para tubos
Funda plástica
Perlas de vidrio
Tubos de ensayos
Mandil
Mascarilla
Guantes de látex
PROCEDIMIENTO
1. Desinfectar el área de trabajo y previamente tener todos los materiales a utilizarse
limpios y secos.
2. Preparamos la solución problema
3. Administramos 10 ml. de etanol por vía peritoneal
4. Seguidamente se coloca el cobayo en el panema.
5. Observar que sintomatología presenta el cobayo ante la intoxicación por metanol y
tomar en cuenta el tiempo en que muere.
6. Una vez el cobayo muerto lo trasladamos a la taba de disección previamente se
coloca una funda sobre la tabla para evitar contaminación alguna
7. Se debe cuidadosamente amarar sus extremidades con ayuda de unas piolas en
los extremos de la tabla para facilitar abrir al cobayo.
8. Raspamos el área donde se realizara el corte y después con cuidado se procede
abrir el cobayo .
9. Observamos detenidamente todos los órganos que han sido afectados por la
intoxicación del etanol.
10. Colocando las vísceras afectadas, en un vaso de precipitación, procediendo a
picar lo más fino posible
11. Añadimos un acidulante, previamente preparado (2 gr AC. Tartárico 2% +50ml
H2O destilada y agitamos) en la muestra (vísceras) y en matraz colocamos 20ml
NaOH 0.1N en el cual se recogió los vapores de etanol, emitidos tras la destilación
efectuada.
12. Se arma el equipo de destilación correctamente.
13. Abrimos la llave para que empiece el proceso de destilación por 30 minutos
14. Al terminar el proceso de destilación se procede a realizar las reacciones químicas
pertinentes para la detectar etanol.
15. Una vez concluida la práctica se limpia y desinfecta la área donde se trabajó ya
que puede causar contaminación debido a restos que se hayan regado durante la
práctica , dejar todos los materiales limpios y los reactivos empleados bien
cerrados ,ordenados donde corresponde .
3. Reacciones de reconocimiento:
1. Reacción de Schiff:
A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al
1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja
reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido
oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se
decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico
puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo
cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
2. Reacción de Rimini
A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de
solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de
hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
3. Con la Fenilhidracina
En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de
muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de
ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se
obtiene una coloración rojo grosella.
5. Con el Ácido Cromotrópico
Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el
formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
6. Reacción de Hehner
Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con
ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5
gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de
contacto se produce un color violeta o azul violeta
GRÁFICOS:
Preparación del EtanolColocación del Cobayo
En el panema
Administración del
etanol primera dosis
(5ml)
4. Muerte del cobayo a los
26 minutos
Observación de los órganos
afectados por el tóxico
Trituración de las vísceras, y
acidulación con Ac. tartárico
Colocación de la mezcla
en el balón de destilación
Armado del equipo de
destilación
Colocación del cobayo en el
panema una vez Adm. la
primera dosis
Administración del etanol
segunda dosis
Colocación del cobayo en el
panema una vez Adm. la 2da
dosis
Preparación de cobayo en
la tabla para la disección
Disección del animal con el
bisturí
Proceder a la destilación
durante 30 min.
5. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO:
1) Reacción de Shiff:
Reacción Positivo característico violeta
2) Reacción de Rimini:
Reacción positivo característico azul intenso
3) Con la fenil hidracina:
1. Reacción positivo característico Coloración rojo grosella
6. 4) Con el ácido cromotrópico:
Reacción positivo característico rojo
5) Reacción de Hehner:
Reacción positivo característico violeta
OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar Etanol ( 40ml) por vía intraperitoneal al
cobayo, se presentaron las siguientes manifestaciones:
Inicio de administración Etanol (5ml): Fue 8:25 am. Presentando Convulsiones
leves, respiración agitada, perdida de la movilidad motora.
Segunda administración Etanol (5ml) : Fue 9:00 am Respiración lenta,
parpadeos, inmovilidad en sus extremidades.
Tercera dosis Etanol (5ml): Inmovilidad, convulsiones fuertes
Cuarta dosis Etanol (5ml): Fue 9:32am Respiración lenta, inmovilidad total en
sus extremidades.
Quinta dosis Etanol (5ml): Fue 9:54am Respiración lenta
Sexta dosis Etanol (5ml): Fue 10:13am Inmovilidad, hipoxia
Deceso: 10:25 am.
Duracion: 2 horas
CONCLUSIONES
7. Mediante esta práctica observamos cuales son las manifestaciones que se presentan
ante la administración del etanol en el cobayo, que órganos afecta el toxico, los cuales
fueron: hinchazón del estómago, vesícula inflamada y el tiempo en que tardo en morir
que fue de 2 horas y mediante las reacciones de reconocimientos se identificó la
presencia del toxico.
RECOMENDACIONES
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para
evitar posteriormente accidente alguno
Al momento de administrar la dosis realizarlo en la vía correcta, para evitar de
esta manera provocar embolias.
Preparar correctamente los reactivos a la concentración requerida en la
práctica y así mismo utilizar pipetas o bulbos para cada reactivo.
Culminada la práctica se debe dejar el área desinfectada, para evitar
contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
CUESTIONARIO:
¿Cuáles son las principales características del etanol?
El alcohol etílico o etanol es un alcohol que se presenta como un líquido incoloro e
inflamable con un punto de ebullición de 78 °C. Al mezclarse con agua en cualquier
proporción, da una mezcla azeotrópica. Es un líquido transparente e incoloro, con sabor
a quemado y un olor agradable característico. Es conocido sencillamente con el nombre
de alcohol. Su fórmula química es H3C-CH2-OH , principal producto de las bebidas
alcohólicas. Es el alcohol que se encuentra en bebidas como la cerveza, la sidra, el vino
y el brandy. Debido a su bajo punto de congelación, ha sido empleado como fluido en
termómetros para medir temperaturas inferiores al punto de congelación del mercurio, -
40 °C, y como anticongelante en radiadores de automóviles. Normalmente el etanol se
concentra por destilación de disoluciones diluidas. El de uso comercial contiene un 95%
en volumen de etanol y un 5% de agua. Ciertos agentes deshidratantes extraen el agua
residual y producen etanol absoluto. El etanol tiene un punto de fusión de -114,1°C, un
punto de ebullición de 78,5°C y una densidad relativa de 0,789 a 20°C.
¿Cuál es la Toxicología del etanol?
Impide la coordinación correcta de los miembros, pérdida temporal de la visión. Puede
afectar al sistema nervioso central provocando mareos, somnolencia, confusión, estados
de euforia, pérdida temporal de la visión. En ciertos casos se produce un incremento en
la irritabilidad del sujeto intoxicado como también en la agresividad; en otra cierta
cantidad de individuos se ve afectada la zona que controla los impulsos, volviéndose
impulsivamente descontrolados y frenéticos. Finalmente, conduce al coma y puede
provocar la muerte.
8. ¿En quienes parece ser mayor la capacidad metabólica del etanol y de que
depende?
La capacidad metabólica de bebedores habituales parece ser mayor que la de personas
con un menor contacto con esta sustancia. Esta diferencia parece depender de una
inducción del MEOS en los primeros, como respuesta a la presencia crónica de sustrato.
¿Por qué es posible determinar la concentración sérica de alcohol etílico por
medio del aliento?
El etanol accede a los pulmones desde el torrente sanguíneo y se vaporiza en el aire a
una velocidad constante, siendo por ello posible determinar la concentración sérica de
este alcohol desde los niveles contenidos en el aire exhalado.
GLOSARIO:
Azeótropo (o mezcla azeotrópica) es una mezcla líquida de dos o más compuestos
químicos que hierven a temperatura constante y que se comportan como si estuviesen
formadas por un solo componente.
Sidra.- Es una bebida alcohólica de baja graduación (desde menos del 3 % en vol. en el
caso de la sidra doux francesa, hasta un máximo del 8 % en vol.) fabricada con el zumo
fermentado de la manzana.
Frenetico.- Que muestra una exaltación violenta del ánimo.
Ácido cromotrópico.- Es un compuesto orgánico de fórmula(HO)2C10H4(SO3H)2, un
derivado do naftaleno dissulfonado e diidroxilado.
Concentración sérica.- La concentración es aquella que una sustancia tiene en el suero
sanguíneo de un individuo. si es 60% sería que 60 gramos de sustancia hay en 100 ml
de plasma.
Sustrato.- Es la superficie en la que una planta o un animal vive. El sustrato puede
incluir materiales bióticos o abióticos.
9. BIBLIOGRAFIA:
o Sousa G. Metanol y Etanol.2009. . (Consultado el 25 de junio del 2014).
Disponible:
o http://profesores.fi-
b.unam.mx/l3prof/Carpeta%20energ%EDa%20y%20ambiente/MetanolEtanol.p
df
o Cardona C. Simulación de los Procesos de obtención de Etanol a partir de caña
de azúcar y maíz.2000. (Consultado el 25 de junio del 2014). Disponible:
http://revistas.utp.edu.co/index.php/revistaciencia/article/viewFile/6859/4011
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD:
DAYSI AMBULUDI ____________________
KHATHERINE CAYAMBE ___________________
NELLY CEPEDA ____________________
10. Toxico utilizado en la práctica (ETANOL)
Animal en el cual se experimentó ( Cobayo )