1. Citología Vaginal Exfoliativa
¿Cuándo y Para qué sirve?
1 al 3 de Diciembre de 2011
San Salvador, El Salvador

2. CITOLOGÍA VAGINAL EXFOLIATIVA
¿CUÁNDO Y PARA QUÉ SIRVE?
Verónica Garza Medina SERVICIO
INTEGRAL VETERINARIO
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Fundamento
La toma de una citología vaginal exfoliativa (CVE) es un procedimiento seguro,
rápido, económico y confiable. Conforme se adquiere experiencia, toda la
técnica, desde tomar la muestra, hasta su evaluación, puede tardar no más de
diez minutos.
Este procedimiento se basa en la obtención de las células descamadas del
epitelio vaginal para su estudio microscópico.
Para una adecuada interpretación es importante considerar que se deben
observar detalladamente los siguientes criterios celulares:
Forma y tamaño de las células
Forma y tamaño de los núcleos
Fondo de la laminilla
Cuando es utilizada para determinar las etapas del ciclo estral, se debe
observar el tipo y la cantidad de células presentes durante sus diferentes
etapas, ya que la mucosa vaginal durante este periodo sufre muchas
transformaciones debidas a los cambios hormonales: al inicio del ciclo, las
células epiteliales están en contacto con la irrigación sanguínea; conforme
aumentan los estrógenos, el epitelio vaginal se va engrosando, lo que ocasiona
que las células epiteliales se vayan separando del aporte sanguíneo, lo que da
como resultado una transformación de células parabasales a células
anucleadas.
No obstante, es importante resaltar que la CVE también puede ser una valiosa
y sencilla herramienta para diagnosticar:
Vaginitis
Piómetra
Neoplasias (principalmente tumor venéreo transmisible TVT)
Gestación, etc.
Material necesario para la CVE
Algodón
Hisopos largos con punta de algodón y mango de plástico
Portaobjetos
Alcohol de 96°
Tinciones

3. Técnica para obtener una CVE de buena calidad
1. Limpiar la vulva con un algodón humedecido con agua
2. Abrir un poco los labios vulvares con los dedos para introducir el hisopo por
la comisura dorsal de éstos.
3. |Introducir de verticalmente el hisopo hasta llegar al cingulum, que es un
estrechamiento que une al vestíbulo con la parte caudal de la vagina
4. Levantar la vulva y desplazar el hisopo horizontalmente hacia el interior de
la vagina, lo más profundo que se pueda.
Consideraciones:
El hisopo debe ser de mango de plástico largo, pues para alcanzar la
vagina de la perra se tiene que recorrer una distancia larga y no se
consigue hacerlo con los hisopos que se utilizan comúnmente para la
limpieza auricular.
También se debe corroborar que el algodón esté bien adherido a la punta
del hisopo para que no se desprenda en el interior de la vagina.
5. Hacer movimientos circulares de la muñeca, con el fin de obtener una
muestra de las paredes vaginales
6. Sacar el hisopo de la misma manera en que se introdujo.
7. Rodar el hisopo sobre una laminilla, tratando de que queden 3 líneas.
8. Fijar la laminilla en alcohol de 96° durante 10 minutos.
9. Teñir con la tinción de elección.
Células que se pueden observar en la CVE
La vagina tiene un epitelio estratificado plano no queratinizado. Las células que
lo forman desde la membrana basal hacia la superficie son:
Células de reserva
Células basales
Células parabasales
Células intermedias
Células superficiales
Células anucleadas
Células basales
Son pequeñas redondas u ovales, de tamaño uniforme, con núcleo evidente,
central, de cromatina granular, y ocasionalmente se observa en mitosis. Su
citoplasma es escaso. A partir de ellas se lleva a cabo la regeneración del
epitelio.
Se observan en casos de atrofia, vaginitis o en úlceras en la mucosa.
Células parabasales
Son originadas en la capa profunda del epitelio escamoso estratificado, se
encuentran cerca del aporte sanguíneo, por lo que son las más saludables y
pequeñas del epitelio vaginal, tienen forma redonda u oval. La cantidad de
citoplasma varía según el grado de maduración, pero en general es escaso, y
en él se pueden observar ocasionalmente vacuolas o glucógeno. Su núcleo es
central, grande, redondo u oval y puede ocupar casi toda la superficie celular.
La relación núcleo citoplasma es equitativa.

4. Estas células se encuentran durante el proestro, diestro y anestro.
Algunas veces, las células parabasales e intermedias contienen leucocitos en
su interior y reciben el nombre de células del diestro. Se observan en diestros
tempranos o en vaginitis.
Células intermedias
Las células intermedias son una transición entre las parabasales y las
superficiales. Tienen contornos bien definidos y forma poligonal con bordes
irregulares, ovales a redondeados y doblados. Su núcleo es más pequeño y
vesiculado con mayor cantidad de citoplasma. Se presentan en el proestro y
diestro.
Las células intermedias, bajo la influencia hormonal de progesterona, pueden
sufrir cambios morfológicos y reciben el nombre de:
Células naviculares: Son alargadas con forma de bote o barco. Tienen
importancia en la citología de hembras preñadas donde además tienen
gran cantidad de glucógeno.
Células de metaestro o espumosas: Son células intermedias que
pueden tener en su citoplasma vacuolas o leucocitos
polimorfonucleares.
Células superficiales
Provienen de la capa madura más externa del epitelio escamoso estratificado.
Son células muertas, sin irrigación, se observan solas, tienen forma poligonal
con bordes citoplasmáticos angulosos y doblados. Su citoplasma es delgado,
traslúcido, sin vacuolas. La relación núcleo citoplasma es de aproximadamente
20:80. Su núcleo se encuentra en posición central, es muy pequeño y picnótico,
propio de actividad estrogénica, por lo que estas células son observadas
durante el estro.
En su citoplasma se pueden encontrar pequeños gránulos lipídico,
perinucleares o periféricos, estrógeno-dependientes.
Células anucleadas o escamas:
Estas células están muertas debido al proceso de engrosamiento del epitelio
vaginal en respuesta al aumento de las concentraciones séricas de los
estrógenos y por lo tanto, carecen de núcleo, son células grandes, de bordes
irregulares y angulosos. Representan la etapa final de la maduración del
epitelio vaginal y por ende, son producto de un proceso que empezó con las
células parabasales, redondas y saludables.
Células endocervicales
Son células cilíndricas, ciliadas, con citoplasma finamente vacuolado; núcleo
basal, y uno o dos nucleolos pequeños. Se pueden ver aisladas o en grupos.
Suelen verse en los frotis de procesos inflamatorios, de metaplasia y displasia y
en atrofias.

5. Ciliocitoforia
Tipo de muerte celular que se presenta en las células cilíndricas. La célula
pierde citoplasma y el núcleo se desplaza hacia el borde apical, hasta quedar a
la orilla, debajo de la placa ciliar.
Células de reserva
Se localizan sobre la membrana basal, debajo de las células basales del
epitelio estratificado plano no queratinizado de la vagina o del epitelio cilíndrico
ciliado endocervical.
Su función es diferenciarse en células basales o cilíndricas, según el tipo de
epitelio al que van a sustituir debido a la descamación normal o a algún
proceso patológico. Cuando se encuentran aisladas pueden confundirse con
macrófagos o células endometriales.
Células endometriales
Se pueden obtener mediante lavado endometrial. En los frotis aparecen
aisladas o en grupos que semejan un panal de abejas. Son cilíndricas, ciliadas,
y más pequeñas que las endocervicales. Tienen núcleo redondo y citoplasma
fino y transparente. Su presencia en los frotis sugiere alguna patología
endometrial, excepto si fueron tomadas en el periodo de posparto.
Existen algunas células no epiteliales que se pueden encontrar normalmente
en los frotis vaginales.
Leucocitos
Macrófagos
Eosinófilos
Espermatozoides
Polimorfonucleares
Es normal verlos, en pequeñas cantidades, en un frotis vaginal. Cuando son
abundantes Indican un proceso Inflamatorio.
Macrófagos
Son redondos de tamaño variable, núcleo central o periférico redondo o
arriñonado, con uno o más nucléolos, dependiendo de su reactividad. Su
citoplasma es abundante, de apariencia esponjosa y puede tener material
fagocitado.
¿Para qué sirve la CVE?
1. Para detectar el ciclo estral
Muchas perras son remitidas a la clínica veterinaria por problemas para
reproducirse, pero hay que tener presente que la esterilidad en esta especie se
debe, con mucha frecuencia, a un manejo inadecuado de la monta, más que a
una incapacidad para concebir. La principal dificultad a la que el médico
veterinario se enfrenta es a la considerable variación del ciclo reproductivo

6. canino. Muchas veces dicha variación es interpretada, por el clínico o el
criador, como anormalidad, por lo que el médico debe ser capaz de distinguir
entre las perras que tienen un ciclo estral normal con patrones inesperados y
las que tienen alteraciones.
Como se mencionó con anterioridad, la CVE es una de las herramientas que
puede ayudar a predecir las variaciones en el ciclo estral y de esta manera
minimizarlas. La nomenclatura de las células del epitelio vaginal se basa en las
alteraciones que experimentan como resultado de la mayor concentración
sérica de estrógenos durante el proestro y el estro, lo que da como resultado el
engrosamiento de la cubierta vaginal. De esta forma, las células de la luz
vaginal (parabasales), se alejan más de su aporte sanguíneo hasta convertirse
en células anucleadas o escamas.
Antes de proceder a realizar una CVE es necesario contar con una correcta
anamnesis, como: examen físico, tipo de alimentación, fecha del último estro,
datos de monta, si tiene o no ha tenido alguna terapia hormonal, etc.
Con el fin de observar los cambios en el patrón celular del ciclo estral, o bien,
qué efecto hormonal predomina en las citologías, es necesario realizar
muestras seriadas con un intervalo de 2-3 días. La valoración del ciclo con
una sola muestra tiene un valor muy relativo.
En la perra las etapas del ciclo estral son:
Proestro: Dura de 3 a 21 días
Estro: Dura de 3 a 21 días
Diestro: 50-60 días
Anestro: Dura de 100-150 días
Proestro
En esta etapa las concentraciones de los estrógenos ejercen efecto sobre la
vasculatura endometrial y ocasionan la salida de eritrocitos por diapédesis de
dichos vasos, lo que provoca la presencia de eritrocitos.
Al principio del proestro las principales células presentes son las parabasales y
algunas intermedias. Conforme pasan los días, las células intermedias ganan
terreno. Los neutrófilos son frecuentes, en número variable, y puede haber
bacterias. Ambos van disminuyendo conforme avanza el proestro y se acerca
el estro. El fondo de la muestra se observa sucio debido a la presencia de
moco cervical y vaginal.
Estro
Las células que predominan, hasta en 90%, son las superficiales y anucleadas;
el 10% restante puede ser una combinación de superficiales e intermedias. Los
eritrocitos pueden disminuir, pero en algunas perras estarán presentes durante
todo el estro.
Diestro
En esta fase se alcanzan los niveles máximos de progesterona, por lo tanto en
las muestras tomadas al principio del diestro existe un predominio de células
intermedias. Conforme avanza esta etapa se pueden observar mayor número
de células parabasales. Algunos autores sugieren que también se observan
células de metaestro (intermedia o parabasal con neutrófilos en su interior) y
células espumosas (con citoplasma espumoso).

7. Anestro
Se considera que en esta etapa, la influencia hormonal es mínima, por lo tanto,
las células que suelen observarse son las basales, pero también existen
parabasales e intermedias en pequeñas cantidades.
2. Para detectar una gestación normal
Es importante mencionar que el uso de la CVE en estos casos, aún se
encuentra en procesos de investigación. Su fundamento es el siguiente: los
cambios hormonales de la preñez también ejercen efecto sobre el epitelio
vaginal, las células que predominan son las intermedias, la mayoría agrupadas
y con depósitos de glicógeno en su citoplasma. También se observan células
naviculares, (intermedias con forma como de bote o de barco). Estas células
pueden verse también en la etapa de diestro, por el efecto de la progesterona,
sin embargo, en preñez sus bordes son más reforzados, el núcleo se encuentra
en la periferia de la célula y forman grupos compactos. Otro hallazgo
observado es la presencia de moco en el fondo de la laminilla.
3. Para diagnosticar un aborto
En los casos de aborto, se observan células trofoblasticas. Son grandes con
varios núcleos de cromatina. Es importante conocerlas ya que son muy
similares a las que se encuentran en el coriocarcinoma. Pueden confundirse
con las células multinucleadas que se presentan en el herpes simple.
4. Para establecer un diagnóstico de quistes foliculares
El quiste folicular ovárico no ovulatorio tiene mayor tamaño que un folículo
preovulatorio normal, es decir mide de 1 a 5 cm de diámetro, sintetiza y secreta
estrógenos y se presentan con mayor frecuencia en perras menores de tres
años.
Los signos clínicos que se observan son: sangrado vaginal persistente, mayor
a 28 días y atracción del macho. La CVE muestra 80 a 90% de células
superficiales, lo que indica un proestro o estro prolongado.
La causa de su presencia puede ser la aplicación prolongada de estrógenos
exógenos como terapia anticonceptiva.
El tratamiento puede ser médico o quirúrgico. El primero consiste en la
aplicación de GnRH (50-100μg/perra), cada 24 horas, durante tres días. El
segundo es la ovariohisterectomía (OVH).
5. Para determinar la presencia de quistes luteinizados
Este tipo de quistes se caracteriza por producir altas cantidades de
progesterona (>2-5 ng/ml), lo que causa un diestro prolongado y la
subsiguiente ausencia de estro. En la citología se observan células
parabasales principalmente e intermedias en menor cantidad. El diagnóstico se
confirma por la hiperprogesteronemia. El tratamiento de elección es la OVH ya
que esta alteración puede ser un preámbulo para la presentación de hiperplasia
endometrial quística-piómetra.
6. Cuando se sospecha de hiperplasia endometrial quística-piómetra
Esta enfermedad es típica de perras mayores de 6 años, cuando se presenta
en jóvenes puede ser posterior al tratamiento con progetágenos o estrógenos.

8. La hiperplasia endometrial quística (HEQ) en la perra es una afección
progestágeno-dependiente debido a la alta sensibilidad del útero, de ciertas
perras, a esta hormona. La progesterona induce la proliferación y secreción
glandular del endometrio, suprime la actividad miometrial y por lo tanto facilita
la acumulación de las secreciones producidas e inhibe la respuesta
leucocitaria. Los cambios glandulares pueden ser locales o difusos y, en
consecuencia, interferir en la implantación y placentación. Una HEQ puede
conllevar a piómetra.
La piómetra es una enfermedad caracterizada por la acumulación de pus en el
útero. Ésta es producida por la colonización bacteriana de E. coli, Proteus,
Klebsiella, Mycolasma, Staphylococcus, Streptococcus, etc. proveniente de la
vagina y que por vía ascendente se aloja en el endometrio, el cual previamente
ha sufrido cambios patológicos debidos a la sobre estimulación de la
progesterona. Estos eventos crean un ambiente que favorece la rápida
multiplicación de los microorganismos.
Un punto clave, importante para ser tomado en cuenta es que esta alteración
se presenta generalmente a los 60-70 días después de finalizado el estro, por
lo que su presentación está íntimamente ligada al ciclo estral.
La CVE puede ser una de las herramientas para el diagnóstico, sobre todo en
piómetras a cuello abierto, en las que se observan células parabasales
endocervicales y gran cantidad de neutrófilos; mientras que, en las de cuello
cerrado sólo se observan células parabasales y endocervicales. El diagnóstico
definitivo, tanto de la HEQ, como de la piómetra, es por medio de un estudio
ecográfico con el fin de evaluar las estructuras de la pared uterina y su
contenido, a lo largo del tiempo.
El tratamiento de elección es la esterilización, pero también se puede intentar el
tratamiento médico, consistente en la aplicación de prostaglandinas F 2α (0.1
mg/kg, SC, cada 12 horas, dos días; luego 0.2 mg/kg, SC, cada 12 horas hasta
su efecto.
7. Para determinar la presencia de una vaginitis
Algunas bacterias que producen alteraciones reproductivas pueden formar
parte de la flora normal de la vagina. Durante el proestro y el estro estos
microorganismos pueden llegar al útero a través del cérvix que se encuentra
relajado en estas etapas del ciclo estral.
Existen dos tipos de vaginitis:
Prepuberal: Afecta más a cachorras de razas grandes. Se manifiesta
como una secreción vulvar de aspecto mucopurulento. Regularmente se
presenta varias semanas antes del primer ciclo estral. A pesar de su
aspecto, está compuesta en su mayoría por descamación epitelial y se
corrige sin tratamiento una vez que la perra entra en celo.
Adulta: Es de tipo bacteriano. Los signos clínicos incluyen inflamación de
la mucosa vaginal; el animal se lame con frecuencia, hay descarga
purulenta y atracción del macho.
La CVE de una perra con vaginitis muestra un gran número de neutrófilos y
bacterias. El inicio del diestro puede vincularse de manera transitoria, con
grandes cantidades de bacterias y neutrófilos, pero su persistencia supone una
vaginitis.

9. El tratamiento médico puede ser local, mediante lavados con soluciones
antisépticas y de óvulos antibióticos, durante 15-20 días. También se puede dar
tratamiento parenteral con trimetoprima, eritromicina, gentamicina, etc.
8. Para establecer un diagnóstico de tumor venéreo transmisible
El tumor más frecuente de la vagina de la perra es el tumor venéreo
transmisible (TVT). Desde el momento del contagio, hasta la presentación de
los primeros síntomas detectables transcurren entre 45 y 60 días. La hembra
presenta secreción sanguinolenta, prurito y lamido vulvar. El tumor comienza
con la presencia de pequeños nódulos blanco-rosados de 1-3 mm, muy
friables. Conforme se desarrolla se exterioriza a través de la abertura vulvar.
El diagnóstico debe incluir una cuidadosa anamnesis y la CVE en la que se
observan células redondeadas, con leve pleomorfismo celular, citiplasma
espumoso y núcleo grande que abarca la mayor parte del citoplasma, con
cromatina densa. Todas las anteriores son características de una célula
neoplásica.
El tratamiento puede ser quirúrgico, cuando lo tumores son pequeños y
localizados, pero lo más recomendable es la quimioterapia con 0.025 mg/kg de
vincristina, sin exceder nunca de 1 mg como dosis máxima, por vía IV cada
siete días. 2-7 aplicaciones. También se recomienda la combinación de
vincristina, ciclofosfamida y metotrexato.

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