Les méthodes de diagnostic biologique du paludisme - Présentation de la 5e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Marie Clémence RAKOTOARIVONY - Médecin - Service de Lutte contre le Paludisme /MINSANPF - Antananarivo, Madagascar - kamansy2@yahoo,fr

1. Dr Rakotoarivony Marie ClDr Rakotoarivony Marie Cléémencemence
Atelier sur le Paludisme 2007Atelier sur le Paludisme 2007
LES METHODES DE
DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
DU PALUDISME
EVALUATION
par les FACILITATEURS

2. PLANPLAN
IntroductionIntroduction
QuQu’’est ce quest ce qu’’un diagnostic biologique?un diagnostic biologique?
Quelles sont les diffQuelles sont les difféérentes mrentes mééthodesthodes
spspéécifiques?cifiques?
La comparaison entre ces diffLa comparaison entre ces difféérentsrents
mmééthodesthodes
ConclusionConclusion

3. INTRODUCTIONINTRODUCTION
En dEn déépit des efforts dpit des efforts dééployployéés en faveurs en faveur
de leur prde leur préévention et de leur traitement,vention et de leur traitement,
les maladies infectieuses et leles maladies infectieuses et le
paludisme en particulier demeurent unpaludisme en particulier demeurent un
problproblèème important de santme important de santéé publiquepublique
au niveau mondialau niveau mondial
Un diagnostic rapide et prUn diagnostic rapide et préécis occurecis occure
une bonne prise en charge du patient .une bonne prise en charge du patient .

4. QUQU’’EST CE QUEST CE QU’’UNUN
DIAGNOSTICDIAGNOSTIC
BIOLOGIQUE DUBIOLOGIQUE DU
PALUDISME?PALUDISME?appui de lappui de l’é’évocation cliniquevocation clinique
ddéétecte les acctecte les accèès simples et les accs simples et les accèèss
graves du paludismegraves du paludisme
éévalue lesvalue les ééchecs thchecs théérapeutiquesrapeutiques
((ééventuellement)ventuellement)

5. Goutte
épaisse
Sérologie PCR
TDR
Frottis
sanguin
Diagnostic
biologique
LES DIFFLES DIFFÉÉRENTESRENTES
METHODES DE DIAGNOSTICMETHODES DE DIAGNOSTIC
BIOLOGIQUEBIOLOGIQUE

6. L A MICROSCOPIEL A MICROSCOPIE
met enmet en éévidence les parasites plasmodialesvidence les parasites plasmodiales
dans le sangdans le sang
nnéécessite un microscope optique et descessite un microscope optique et des
colorantscolorants
Un personnel qualifiUn personnel qualifiéé
LectureLecture àà 100 champs microscopiques100 champs microscopiques
(oculaire 10X(oculaire 10X -- objectif 100X )objectif 100X )
RRéésultats quantitatifssultats quantitatifs

7. surface plus petite que le frottis.surface plus petite que le frottis.
hhéémolyse des globules rougesmolyse des globules rouges
DDéétecte destecte des parasitparasitéémiesmies 33--5 parasites/5 parasites/µµll
La sensibilitLa sensibilitéé 20 fois plus que FM20 fois plus que FM
Met enMet en éévidence les formesvidence les formes
éérythrocytaires derythrocytaires de PlasmodiumPlasmodium
La GoutteLa Goutte éépaissepaisse

8. Le frottis minceLe frottis mince (FM)(FM)
quantitquantitéé de sang plusde sang plus
faible que sur une GEfaible que sur une GE
Pas dPas d’’hhéémolyse demolyse de
GRGR
Lecture avecLecture avec
immersionimmersion
PolyparasitPolyparasitéémiemie
possiblepossible
mise en dmise en dééfaut enfaut en
cas decas de parasitparasitéémiemie
faiblefaible
sensibilitsensibilitéé ththééoriqueorique
est de 20est de 20 àà 30 fois30 fois
moindre qumoindre qu’’avec GEavec GE
DDéétecte 100tecte 100--200200
parasites/parasites/µµll

10. La sLa séérologierologie
Utilise les techniques ( ELISA,Utilise les techniques ( ELISA,
immunofluorescenceimmunofluorescence ……))
mesure les anticorps smesure les anticorps séériques (contact antriques (contact antéérieurrieur
du sujet avec le parasite)du sujet avec le parasite)
utilisutiliséé sur le plansur le plan éépidpidéémiologie, sur certainemiologie, sur certaine
forme clinique de paludisme viscforme clinique de paludisme viscééralral éévolutif, ouvolutif, ou
desdes éétudes rtudes réétrospectivestrospectives

11. bandelettes rbandelettes rééactivesactives
DDéétection antigtection antigééniquenique
RRééponse rapide (moins de 15 minutes),ponse rapide (moins de 15 minutes),
rréésultats sous forme dsultats sous forme d’’un trait sur la bandeletteun trait sur la bandelette
Ne nNe néécessite pas de compcessite pas de compéétence particulitence particulièèrere
SensibilitSensibilitéé de dde déétectiontection àà >90% chez les patients>90% chez les patients
>100 parasites/>100 parasites/µµll
Le Test de diagnosticLe Test de diagnostic
rapide(TDR)rapide(TDR)

12. HRP2HRP2
PlasmodiumPlasmodium falciparumfalciparum++++++
pas de distinction 3 autrespas de distinction 3 autres
espespèèces entre euxces entre eux
(( P. ovaleP. ovale,, P.P. malariaemalariae,, P.P. vivaxvivax))
ClairanceClairance àà > 2 semaines> 2 semaines
SensibilitSensibilitéé 10HPM soit une10HPM soit une
parasitparasitéémiemie 0.02 %0.02 %
pLDHpLDH
4 esp4 espèècesces
plasmodialsplasmodials
Moins sensibleMoins sensible
Clairance en rapportClairance en rapport
avec laavec la parasitemieparasitemie
DDéétection antigtection antigéénique ( RDT )nique ( RDT )

14. La technique de PCRLa technique de PCR
(Polymerase Chain Reaction )(Polymerase Chain Reaction )
amplifie les samplifie les sééquences reconnues et les rendquences reconnues et les rend
facilement repfacilement repéérables.rables.
beaucoup plus sensible, dbeaucoup plus sensible, déétecte 1 plasmodium/10mltecte 1 plasmodium/10ml
sang (5fois plus faible que GE)sang (5fois plus faible que GE)
n'est pas encoren'est pas encore éévaluvaluéée dans le diagnostic due dans le diagnostic du
paludisme dpaludisme d’’urgenceurgence
Outil de rechercheOutil de recherche
MatMatéériels chers et compliquriels chers et compliquééss

16. Comparaison des mComparaison des mééthodesthodes
de diagnostic biologiquesde diagnostic biologiques
Source : Thierry Fandeur Atelier palu 2003

17. conclusionconclusion
Variétés diagnostics
Prise en charge
PRECOCE
Utilisation rationnelle
des médicaments
Diagnostic
RAPIDE
Microscopie/TDR
de choix
Morbidité
mortalité

18. Merci de votreMerci de votre
AttentionAttention!!

19. RRééfféérences bibliographiquesrences bibliographiques
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Dubreuil,S.Issifou & F.Ntoumi. (1999).Dubreuil,S.Issifou & F.Ntoumi. (1999).
ÉÉvaluation dvaluation d’’une mune mééthode simple et rapidethode simple et rapide
dd’’extraction de lextraction de l’’ADN de plasmodium falciparumADN de plasmodium falciparum
àà partir de gouttespartir de gouttes éépaisses de patientspaisses de patients
gabonais. Ngabonais. N°°2031.2031. <Parasitologie>.<Parasitologie>.
33--Anon.(2000).Diagnostic du paludisme18Anon.(2000).Diagnostic du paludisme18
septembre.septembre. Biologie.hialaveraBiologie.hialavera@wanadoo.fr@wanadoo.fr

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comparative decomparative de cinqcinq mmééthodesthodes de diagnosticde diagnostic biologiquebiologique
dudu paludismepaludisme: la: la gouttegoutte éépaisse,lapaisse,la mmééthodethode QBC, LaQBC, La
sondesonde ADN ,la PCR et leADN ,la PCR et le ParasightParasight FF test.Mtest.Méédecinedecine
dd’’AfriqueAfrique Noire .45(4).Noire .45(4).
55-- David Bell, Rouel Go, Cynthia Miguel, John Walker,David Bell, Rouel Go, Cynthia Miguel, John Walker,
Lillibeth Cacal &Allan Saul.(2001).Diagnostic du paludismeLillibeth Cacal &Allan Saul.(2001).Diagnostic du paludisme
dans une rdans une réégion reculgion reculéée des Philippines:comparaison dee des Philippines:comparaison de
plusieurs techniques et de leur acceptation par les agentsplusieurs techniques et de leur acceptation par les agents
de santde santéé et la communautet la communautéé. Bulletin of world Health. Bulletin of world Health
Organisation 79(10):933Organisation 79(10):933-- 941.941.
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JulvezJulvez, Sylvie, Sylvie ManguinManguin, Dominique Richard, Dominique Richard LenobleLenoble,,
JacquesJacques CircoulonCircoulon.(2004)Biodiversit.(2004)Biodiversitéé du paludisme dansdu paludisme dans
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http://http://babelfish.altavista.combabelfish.altavista.com//babaelfishbabaelfish//trurl_pagetrurl_pagecontcont
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