Identificación, análisis, función y carcaterísticas de biomoléculas correspondientes al metabolismo primario. Proteínas. Carbohidratos. Lípidos. Almidón.

1. IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS LABORATORIO NO 2
Alejandro Ángel Berján
Código 20122010039
Grupo 423
Docente William Ariza
Universidad Distrital Francisco José de Caldas
Proyecto curricular de Ingeniería Forestal
Biología
Bogotá DC
27 de septiembre de 2012

2. INTRODUCCIÓN
Las biomoleculas están presentes desde el más grande organismo hasta el más
pequeño. Al interior se encuentran desempeñando papeles fundamentales en pro
del funcionamiento del individuo. De allí deriva la gran importancia que tienen
estos para los seres vivos.
Debido a su gran importancia, se ha propuesto identificar los principales tipos de
moléculas orgánicasa partir de sus propiedades físico-químicas.Tras reaccionar
con pruebas bioquímicas se tendrá en cuenta características como el color, para
determinar que clases de moléculas, además en que cantidad están concentradas
en un determinado alimento.
OBJETIVOS
Identificar los tipos de moléculas orgánicas que están presentes en un
determinado alimento.
Reconocer las propiedades físicas que adquiere una sustancia posteriormente a
una prueba bioquímica específica.
Comparar algunas características de las sustancias a analizar en función de las
biomoleculas presentes en ellas.
MATERIALES Y MÉTODOS
 Tubos de ensayo
 Cinta de enmascarar
 Estufa
 Mortero y pistilo
 Reactivo Benedict
 Reactivo Lugol
 Reactivo Sudán III
 Solución de sacarosa
 Solución de almidón
 Solución de aceite
 Solución de caseína
 Soya
 Maíz
 Maní
 Quinua

3. Biuret- Caseína Lugol-Almidón
Biuret- Caseína
Benedict-Sacarosa Sudán III-Aceite
Se toman cuatro tubos de ensayo y son rotulados de la siguiente manera:
Posterior a ello, se disponen para agregar las determinadas sustancias con el
respectivo reactivo. Para el tubo que contiene Benedict y sacarosa es puesto en
baño de María durante un lapso de 20 minutos. Luego son tenidos en cuenta
como testigos.
Inmediatamente después se toma 1 gr de maíz previamente machacado para
obtener una mezcla homogénea y se introduce en cuatro tubos de ensayo para
luego agregar los cuatro reactivos asignados para nuestras pruebas.
De igual manera siguiendo el procedimiento anteriormente mencionado, se
manipulan los alimentos restantes, teniendo presente que aquellos comestibles
que son puestos a reaccionar con el Biuret, deben ser expuestos a baño de maría
Finalmente se registran datos respecto al color inicial y final que obtiene la
sustancia puesta a prueba, para así determinar que tipo de biomolecula está
presente en el alimento y paralelamente definir su concentración.
MARCO TEÓRICO
Según J. Macarulla, A. Marino y A. Macarulla (1988), el término biomolecula
se entiende como las moléculas que integran a los seres vivos y este
además puede clasificarse tanto inorgánicas como orgánicas, de esta
manera tenemos:
Orgánicas Inorgánicas
Azucares: Glucosa, almidón,
celulosa
Gases como O2, N2 y CO2.
Lípidos como grasas, esteroides y
cerebrósidos.
Aniones como (HCO3
-
), Cl-
y So=
4.
Proteínas, como insulina,
hemoglobina, fibrinógeno
Cationes como Na+
, K+
, amonio
(NH+
4).
Ácidos nucleicos, como DNA, RNA y
sus componentes.
Metabolitos intermediarios, como ác.
Acético, etanol, urea y ác. Cítrico.

4. Tabla 1. Clasificación de las biomoleculas.
Par nuestra investigación nos enfocaremos en aquellas biomoleculas que
son orgánicas, ya que son las que se presentan en mayor concentración en
los alimentos a analizar.
Carbohidratos o sacáridos
Son los compuestos orgánicos más abundante de las células biológicas.
Contienen carbono, hidrógeno y oxígeno; se encargan de almacenar:
energía, combustibles e intermediarios metabólicos para el organismo.
También cumplen un esencial papel al formar parte de la trama estructural
del ARN y ADN, ya que los anillos que conforman, almacenan y expresan
informaciones genéticas. De igual manera a se encuentran formando
paredes celulares y exoesqueletos en los artrópodos. Por último se
desempeñan como lubricantes en las articulaciones, adhesivos en las
células.
Se clasifican en monosacáridos, disacáridos y polisacáridos. Su unidad
básica son los monosacáridos o azucares simples.(V. Melo y O. Cuamatzi,
2006).
Como menciona la Universidad Jorge Tadeo Lozano, con el fin de
reconocer la presencia de carbohidratos en una determinada sustancia. Se
han utilizado numerosas pruebas para su identificación en las cuales
resaltamos:
Prueba de Benedict: se usa para detectar la presencia de azúcares
reductores porque el reactivo de Benedict contiene cobre y éste se
reduce en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción
el azúcar se oxida. La reacción antes mencionada se conoce como
una reacción oxidación-reducción (“REDOX”) porque la oxidación del
azúcar sucede simultáneamente con la reacción de reducción del
cobre.
Cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica
calor, el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras
mayor sea la abundancia de azúcares reductores.
Un cambio a color verde indica la presencia de menos azúcares reductores.
Las azúcares que no reducen, como la sacarosa, no producen cambios en
color y la solución se mantiene azul.

5. Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de
yodo y yoduro, permite reconocer polisacáridos, particularmente el
almidón por la formación de una coloración azul-violeta intensa y el
glicógeno y las dextrinas por formación de coloración roja.
Proteínas
Las proteínas cumplen una numerosa funcionalidad en los organismos.
Esto debido a las diferentes formas que logran adoptar.
Entre las principales funciones que satisfacen las proteínas tenemos que
conforman las unidades estructurales a partir de las cuales se ensamblan
las células. Aunque además de proporcionar forma y estructura a la célula,
las enzimas promueven reaccione químicas intercelulares. Las proteínas se
encargan igualmente controlan el pasaje de nutrientes, otras llevan
mensajes de una célula a otra desde la membrana hacia el núcleo de una
célula. Incluso algunas proteínas especializadas pueden actuar como:
anticuerpos, toxinas, hormonas, moléculas anticongelantes, fibras elásticas
o generadores de luminiscencia. (Alberts, Bray, Hopkin, Johnson, Lewis,
Raff, Roberts y Walter2004).
Las pruebas realizadas para su identificación son:
Reacción Xantoproteica: Es debida a la formación de un compuesto
aromático nitrado de color amarillo, cuando las proteínas son
tratadas con ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado
positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos
bencénicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez
realizada la prueba se neutraliza con un álcali vira a un color
anaranjado oscuro.
Reacción de Biuret: La producen los péptidos y las proteínas, pero
no los aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace
peptídico que se destruye al liberarse los aminoácidos.
Cuando una proteína se pone en contacto con un álcali concentrado,
se forma una sustancia compleja denominada Biuret, que en
contacto con una solución de sulfato cúprico diluida, da una
coloración violeta característica.

6. Cuestionario
1. ¿Qué es una prueba de control? Y diga cuál es su importancia en el
procedimiento realizado.
De acuerdo con la revista 5, en “Aplicación de muestreo estadístico a las pruebas
control”, las pruebas de controles constituyen un componente importante del
trabajo de campo del auditor. Las mismas son comprobaciones que este realiza
para asegurarse de que determinados controles están funcionando correctamente.
El objetivo de una prueba de controles será obtener un grado de certeza razonable
de la eficacia de los controles, y de que la proporción de errores en su
funcionamiento no excede determinado nivel máximo aceptable. De esta forma se
puede lograr una evaluación de la eficacia de las actividades de control vigentes.
Permite calificar el nivel de confianza de la prueba, es decir la probabilidad
de que las conclusiones obtenidas del muestreo sean correctas.
La selección aleatoria impide que las preferencias del auditor favorezcan la
selección de algunos elementos de la población en deterioro de otros.
Permite limitar el tamaño de la muestra al mínimo necesario, evitando
realizar pruebas de auditoría sobre una cantidad mayor de elementos.
Los resultados de la prueba permite elaborar recomendaciones sobre una
base más objetiva.
Permite hacer más defendibles las conclusiones de la prueba.
2. A partir de los resultados obtenidos, complete la siguiente tabla donde
se citará ejemplos determinados de la presencia o no de las moléculas
orgánicas evaluadas en las diferentes sustancias.
Molécula orgánica
Sustancia
Positiva Negativa
Azúcar reductor
Soya
Maíz
Quinua
Maní
Almidón
Maíz tierno
Maní
Quinua
Soya
Lípido Soya

7. Maní
Maíz
Quinua
Proteína
Soya
Maní
Quinua
Maíz
Tabla 11. Síntesis de presencias en los alimentos analizados.
3. ¿Qué otros reactivos nos permiten identificar azúcares, almidones,
proteínas y grasas?
Azúcares y almidones
De acuerdo con la Universidad Jorge Tadeo lozano se tiene como ensayos para
detectar carbohidratos a:
Ensayo de Molisch: Es un ensayo para reconocimiento general de
carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan con
ácido sulfúrico concentrado hastamonosacáridos y se convierten en
derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con α-
naftol formando un color púrpura violeta.
Ensayo de Barfoed: Permite diferenciar entre monosacáridos y disacáridos
reductores, igualmente contiene ion cúprico que se reduce a un óxido
cuproso más rápidamente con los monosacáridos que con los disacáridos.
Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es específico para cetosas y se basa en
la conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior
condensación con resorcinol formando así complejos coloreados.
Ensayo de Bial: Este contiene orcinol en ácido clorhídrico, el cual forma
complejos de coloración solo con las pentosas.
Proteínas
Reacción Xantoproteíca Determina la cantidad de proteína soluble en una
solución empleando ácido nítrico concentrado, de esta manera, forma
compuestos nitrados amarillos. (S. Ramos, 2007)
Según la Universidad Jorge Tadeo Lozano, se consideran además:

8. Reacción con la ninhidrina: El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma
complejos coloreados con la ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los
aminoácidos cuyo grupo amino es primario, amarillo para la prolina e
hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene un grupo amido en la
cadena lateral. Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino libres
presentes en péptidos y proteínas.
Reacción de Millón: El anillo fenólico tiene un comportamiento característico
frente a las sales de Mercurio a pH ácido, formando complejos color rojo
ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina y las proteínas que la contienen
Reacción de Sakaguchi: El grupo guanidinio presente en la cadena lateral
de la Arginina reacciona con soluciones de alfanaftol en presencia de
Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados rosados o rojos.
Reacción de Ehrlich: La presencia de anillos aromáticos fenólicos o
nitrogenados en la cadena lateral de los aminoácidos se puede identificar
mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito de Sodio por formación
de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así detectar la
presencia de Tirosina e Histidina libres o formando péptidos y proteínas.
Reacción de Hopkins Cole: El anillo indólico presente en la cadena lateral
de los alfa-aminoácidos libres o haciendo parte de péptidos y proteínas se
puede reconocer mediante reacción con el ácido glioxílico a pH ácido,
puesto que forma complejos de coloración violeta o amarillo violeta,
permitiendo así identificar al triptófano.
Reacción con acetato de Plomo alcalino: Los Aminoácidos azufrados como
Metionina, Cisteína y Cistina se reconocen por la formación de precipitados
de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman cuando
reacciona con Acetato de Plomo en medio alcalino.
Grasas
Sudán IV:Sirvenpara determinar principalmente lípidos homofásicos. este
se basa en que el colorante es más soluble en lípidos que en el propio
disolvente en el que va contenido. La prueba da positivo si la sustancia a
analizar toma el color rojo. (G. Méndez, 2004)

9. ¿En aminoácidos libres es posible encontrar enlaces peptídicos?
Los aminoácidos libres presentan un grupo amino y un grupo carboxilo, los
cuales se encuentran unidos a un carbono central, mas no entre ellos, por
lo cual no hay presencia de enlaces peptídicos, porque para ello se requiere
la unión del aminol de un aminoácido con un carboxilo de otro aminoácido.
(Peña, Arroyo, Gómez, Tapia, Gómez, 2004).
CONCLUSIONES
El reactivo biuret sólo funciona para detectar la presencia de proteínas, mas
no incluye aminoácidos, puesto que el biuret reacciona con enlaces
peptídicos formados por la unión de aminoácidos propios de las proteínas.
En los alimentos analizados, haymás de una presencia de biomoleculas
propuestas a identificar, lo que quiere decir que en un alimento no hay una
sola presencia de una determinada molécula orgánica, sino que cada tipo
está presente bien sea en menor o mayor proporción.
La soya es rica en proteínas al estar en mayor proporción que las demás. Y
por el otro lado pobre tanto en grasas como almidones.
El maíz es rica en almidón einsuficiente en lípidos.
El maní es generoso en proteínas y escasa en lípidos.
La quinua es abundante en almidón einsuficiente en grasa.
Los lípidos están presente en las cuatro sustancias.
Los diferentes métodos utilizados son cualitativos, esto quiere decir que los
reactivos indican la presencia de ciertas biomoleculas, mas no la cantidad
en las que se encuentran concentradas.

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