2. Electroforesis capilar de Zona
(CZE)
• Tiene la disposición más simple del
electrolito de fondo (BGE).
• Descripción cuantitativa por dos
fenómenos: migración y dispersión.
• Presencia o ausencia del flujo
electroosmotico (EOF).
• Moléculas cargadas
7. Cromatografía electrocinética
micelar (CEKC, MEKC)
• Moléculas con carga y si carga
• Combinación de CZE y RPLC
• Utilización de agentes surfactantes
• Formación de micelas de diferentes tipos
• Utilización de ciclodextrinas
• Combinación de agentes surfactantes y
ciclodextrinas
15. Isotacoforesis capilar (CITP)
En esta modalidad de electroforesis las bandas de
los analitos migran todas a la misma velocidad;
por eso recibe este nombre de iso, igual, y taco,
velocidad.
La muestra ha de inyectarse entre dos tampones:
el frontal, que contiene los iones de mayor
movilidad (esta movilidad ha de ser mayor que
la de los componentes a analizar), y el terminal
en el que van los iones de menor movilidad que
los iones de la muestra.
16.
17. • La selección de los electrolitos guías y terminales
depende del conocimiento de los valores de las
movilidades y del pKa para todos los componentes
de la muestra.
• En un principio, los iones migran a distintas velocidades,
según v = μeE, y la diferencia en las velocidades de
migración da lugar a la separación de los distintos
analitos en bandas adyacentes, con la especie más
rápida situada en la banda más próxima al tampón
conductor y la especie más lenta inmediatamente por
delante del terminal.
18. • Una vez que se han formado las bandas,
todas se mueven a la misma velocidad.
• Esto ocurre porque el potencial se hace
más reducido para las bandas más
móviles y se hace más intenso para las
bandas más lentas, de manera que la
corriente es la misma en todas las zonas
del tampón. Las separaciones entre
bandas son nítidas.
19. • Si un soluto empieza a difundir a la banda
próxima más rápida, se encuentra con un
campo más bajo, lo cual reduce su
velocidad hasta hacerle caer, de nuevo,
en su banda original.
• Las diferentes bandas de analitos están
situadas a continuación las unas de las
otras, y no hay bandas de tampón entre
ellas que las separen.
20.
21. • El resultado no es un electroferograma
con los distintos picos, sino un diagrama
en función del tiempo con forma de
escalera.
22.
23. Aplicaciones
• Separación de proteínas
• Separación de fármacos(antiinflamatorios)
• Separación de cationes y aniones en
corridas diferentes
• Análisis del color/sabor de los alimentos:
• - Determinación de colorantes sintéticos
mediante CITP (muestras de diversos
• alimentos sólidos: puddings, golosinas)
24. Aplicaciones
Análisis de iones inorgánicos:
- Análisis cualitativo de aniones presentes
en cerveza, salsa de soja, té y café.
- Determinación semicuantitativa de calcio,
sodio, cloruros, fosfatos y citratos en
muestras de leche
25. • Generalmente se ha efectua bajo condiciones
de cero EOF aunque nos es una restricción..
Los Isotacoferogramas pueden mostrar
diferencias en el orden de migración en
presencia o no de EOF.
• La detección en es usualmente con detectores
de "bulk property" de la solución electrolítica. Se
ha utilizado detección de conductividad .
También se han utilizado detectores térmicos
( medida del calor de Joule producido dentro de
cada zona) o detectores que miden la caída de
voltaje de cada zona.
26. Electrocromatografía capilar
• La electrocromatografía capilar es un híbrido
entre la HPLC y la CE donde se reúnen algunas
de las mejores características de cada técnica
por separado, por lo que tiene ventajas sobre
ellas. De esta manera la electrocromatografía
capilar puede usarse para la separación de
especies no cargadas.
• Proporciona una elevada eficacia en las
separaciones de microvolúmenes de disolución
de muestra, sin necesidad de aplicar un bombeo
de alta presión.
27. • En la electrocromatografía capilar la fase
móvil se transporta a través de la fase
estacionaria por el bombeo ejercido por el
flujo electroosmótico y no por un bombeo
mecánico, lo que simplifica
significativamente el equipo.
28. • Ademas, el sistema de bombeo
electroosmotico origina un perfil de flujo
plano. en lugar de un perfil de flujo
hidrodinamico. El perfil de flujo plano
conduce a un menor ensanchamiento de
banda que en el flujo hidrodinamico, y por
tanto la eficacia de la separacion es
mucho mayor.
29.
30.
31.
32. Aplicaciones
•Microvolumenes
•Especies cargadas
•Especies no cargadas
33.
34.
35. Referencias
• Morteza G. Khaledi. High-Performance
Capillary Electrophoresis. United States of
America: Jhon Wiley & Sons; 1998
• Philippe S.K. Capillary Electrophoresis
methods and protocols. Germany: Human
Press; 2008