2. L’exploration de la coagulation:
• Tests globaux ou tests d’orientation (TQ, TP, TCK): simple automatisables et peu
couteux
• Tests spécifiques qui permettent de poser le diagnostic, plus ou moins complexes
en fonction de l’anomalie.
3. Exploration de la coagulation : le TQ (TP)
Temps de Quick : c’est le temps de coagulation
après l’addition de thromboplastine ( facteur
tissulaire +phospholipide +calcium ) d’un plasma
pauvre en plaquette citraté à 37 c°
Explore les facteurs VII, X, V et II
X Xa
+ V
II IIa
I Fibrine
VIIa
VII
FT
Calcium
Test de Quick
4. le• Réactifs :
-Plasma témoin standard(PT) : pool de plasma.
-Plasma malade (PM) : plasma à tester.
-Thromboplastine calcique. -Tampon Owren-Koller.
• Mode opératoire :
Plasma témoin ou à tester ……………………100 µl Incuber 2 mn à 37 °C
Thromboplastine préincubée …………………200 µl En enclenchant le
chronomètre, surveiller la coagulation à partir de 10 secondes, arrêter le
chronomètre lorsqu’apparaissent les premiers fragments de fibrine.
5. INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS
• Les valeurs normales = 12 – 14 secondes.
• Le TQ du malade est considéré comme pathologique (allongé) s’il est
supérieur à 2 secondes par rapport à celui du témoin.
6. TQ ET TP (COURBE DE THIVOLLE)
• Le TQ est exprimé en pourcentage de taux de prothrombine après établissement de la courbe de
Thivolle. Ce pourcentage est calculé en utilisant une courbe d’étalonnage à l’aide de dilutions d’un plasma
témoin (PT) qui, par définition, correspond à 100 % de la normale. Le plasma témoin est dilué au 1/2, 1/3,
1/4, 1/5, 1/6, 1/7, 1/8 dans le tampon Owren Koller
7. TQ ET TP (COURBE DE THIVOLLE)
• Le TQ est réalisé sur chacune des dilutions et sur le plasma témoin pur. La
droite d’étalonnage est tracée sur un papier millimétré en portant en abscisse
l’inverse des dilutions et en ordonnée le temps de coagulation.
•PT pur…….100% PT 1/2…….50%
• PT 1/3…….33,33% PT 1/4……..25%
•PT 1/5…….20% PT 1/6…….16,66%
•PT 1/7…….14,28% PT 1/8…….12,5%
8.
9. thromboplastine
INR: INTERNATIONAL NORMALIZED RATIO
• Des variations importantes des résultats de TP rendus en % sont observées d'un
laboratoire à un autre et d'un réactif à l’autre.
• Pour les patients traités par antivitamines K (AVK) (la sensibilité des
différentes thromboplastines à l’effet des AVK est variable): C’est un problème!
• Les thromboplastines ont des sensibilités différentes à la dépression des facteurs
vitamines K dépendants. Ainsi, au cours d'un traitement AVK, un TP compris entre 18% et
25% avec une thromboplastine donnée peut correspondre à une valeur comprise entre 25
et 35% avec une autre thromboplastine
10. • C'est pourquoi un autre mode d’expression a été proposé dés 1983 et il est
exclusivement réservé à la surveillance des traitements anticoagulants oraux
par les antagonistes de la vitamine K (AVK) : l’international normalized ratio
(INR)
• L’INR correspond au rapport du TQ du patient sur celui du témoin, élevé à la
puissance ISI (international sensibility index), cet index définissant la sensibilité
du réactif utilisé.
INR = (TQ malade / TQ témoin)ISI
11. Le Temps de Céphaline Activé
XI XIa
IX
X
I Fibrine
XIIa
PK
KHPM
XII
R1 : Activateur + PL
R 2 Calcium
IXa
VIII
Xa
V
II IIa
Ca++
Ca++
c’est le temps de coagulation après
recalcification d’un plasma pauvre en
plaquette citraté à 37 c° préincubé avec un
activateur du système contact (kaolin pour
TCK) et des phospholipides ( céphaline )
Explore les facteurs
VIII, IX, XI, XII
X, V, II, Fib
TCA
12. • Réactifs :
-Plasma témoin standard(PT) : pool de plasma.
-Plasma malade (PM) : plasma à tester.
-CK prest.
-CaCl2 à 0,025M.
• Mode opératoire :
Plasma témoin ou à tester ……………………100 µl
CKprest…………………...…………………..100 µl Incuber 3 mn à 37 °C
CaCl2 pré-incubée …………………………...100 µl
En enclenchant le chronomètre, surveiller la coagulation à partir de 25 secondes.
13. • INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS
• Les valeurs normales = 25 – 40 secondes. (chaque labo doit définir ces propres
normes et pour chaque nouveau réactif ou nouveau lot sur une trentaine de sujets
sains)
• Le temps de coagulation du patient mesuré est comparé à celui du plasma témoin.
Le TCA du malade est considéré comme pathologique (allongé) s’il est supérieur 10
secondes par rapport à celui du témoin.
• En pratique, le TCA du malade (M) est rendu en secondes par rapport à un témoin
(T). On l'exprime en rapport TCA M/ T, l'allongement étant considéré comme
significatif lorsque le rapport M/T est supérieur à 1,20.
