1. Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

2. • ¿Qué es Control de Calidad?
Sistema diseñado para incrementar la
probabilidad de que cada resultado
reportado por el laboratorio sea válido y
pueda ser utilizado con confianza por el
médico para tomar una decisión diagnóstica
o terapéutica.
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

3. ¿Por qué el Control de Calidad?
 Ningún proceso es eficiente
(100%).
 Reducir errores hasta un 3 a 2%
(2 de cada 100 pacientes tienen
algún tipo de error).
 Errores pequeños clínicamente
significativos.
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

4. CONTROL DE CALIDAD INTERNO/ FUENTE DE ERROR
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

5. MUESTRA
CLINICA
MEDIO DE
CULTIVO
REACTIVOS Y
COLORANTES
EQUIPOS
PRUEBAS DE
SENSIBILIDAD
PERSONAL
CONTROL DE
CALIDAD
EXTERNO
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

6. MUESTRAS CLINICAS
La muestra debe ser
representativa del
proceso infeccioso.
Evitar la contaminación
con microorganismos de
la flora normal del área
afectada
Debe seleccionarse el
lugar anatómico correcto
de donde se obtendrá la
muestra.
Utilizar la técnica
apropiada y los
instrumentos o elementos
adecuados.
Recolectar un volumen
apropiado de muestra
para evitar los resultados
falsos negativos.
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

7. MUESTRAS CLINICAS
Identificación de la muestra.
Evitar derramar la muestra y
mantener en todo momento
las medidas de bioseguridad
apropiadas.
Colocar la muestra en un recipiente
adecuado para su transporte, con el
fin de asegurar la sobrevivencia del
posible agente infeccioso.
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

8. Las tendencias actuales
en
microbiología clínica apuntan al
desarrollo de métodos rápidos de
diagnóstico para determinar la
presencia de agentes infecciosos;
sin embargo, el aislamiento y la
identificación de patógenos
viables
son
técnicas
irremplazables para el diagnóstico
de la enfermedades infecciosas

10. MEDIOS DE CULTIVO
Condiciones que debe reunir un medio de cultivo
Contener
nutrientes
adecuados
Poseer
humedad
suficiente (agua)
Tener un pH
ajustado
Estar estéril
inicialmente

11. MEDIOS DE CULTIVO
• Las pruebas básicas de control de calidad de los medios
preparados deben incluir:
medición del pH
pruebas de esterilidad
capacidad de crecimiento y reacción
aspecto, dureza y profundidad del agar.
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12. Control de los
medios
deshidratados
y
de
los
aditivos
comerciales
En la recepción:
• comprobará la fecha de caducidad
• indicará la fecha de recepción en el envase
• lo almacenará en las condiciones adecuadas
Al utilizarlos:
• Conservación en lugar adecuado, (instrucciones
de los fabricantes)
• Fecha de caducidad
• Los recipientes estén perfectamente cerrados.

13. Control de
la
preparación
de los
medios de
cultivo o
aditivos
Como normas generales tener en cuenta los
factores:
Sobrecalentamiento de los ingredientes basicos
Adición de la sangre o de otros aditivos sensibles al
calor por encima de 50ºC
Envasar menor cantidad de medio que la recomendada
Identificación:
Cada lote de medio o aditivo preparado se marcará en su envase
(placa o tubo):
Tipo de medio que se trata, lote y de la fecha de preparación.

14. Control de
la
preparación
de los
medios de
cultivo o
aditivos
Almacenamiento:
Almacenar en las condiciones adecuadas establecidas (Tº
ambiente, frigorífico 2-8ºC o congelador –20ºC).
Los medios en placa deben guardarse en bolsas de plástico
bien cerradas.
Puede afectar negativamente:
Almacenar a una Tª no adecuada
Alternar la Tª de almacenamiento de Tª ambiente a 2-8ºC.
Almacenar las placas en bolsas abiertas o mal cerradas.
Cerrar la bolsa contenedora de las placas antes de que estas se
hayan enfriado y gelificado apropiadamente
Registro:
De cada lote de medio de cultivo o de aditivo preparado se llevará
un registro

15. Control
del medio
preparado
Antes de poner en uso, se controlara:
Características físicas (aspecto, color, excesivo nº de
burbujas, precipitados etc..)
Esterilidad
Funcionamiento para el cual ha sido preparado:
Propiedades bioquímicas (diferenciales y diagnósticas)
Recuperación de los microorganismos deseados
Inhibición o supresión de los microorganismos no
deseados
Registrarán los resultados obtenidos de los controles
(nombre del personal)

16. Control de
los Medios
de Cultivo
preparados
por casas
comerciales
Se recomienda:
Empresas certificadas según ISO 9000
El laboratorio emite un Certificado de Calidad
Debe cumplir con las operaciones, incluyendo
la de suministro y entrega
Los fabricantes deben aportar,
con cada lote suministrado,
evidencia como:
Nº de lote
Fecha de caducidad del producto
Condiciones de conservación
Control de esterilidad y criterios de
aceptabilidad
Control de crecimiento e inhibición con
cepas seleccionadas para el uso del medio y
criterios de aceptabilidad indicando las
cepas utilizadas
Fecha de la emisión de la
especificación

18. CRITERIOS DE CALIDAD
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Rajadura del plato o envase.
Rajadura en la superficie del medio.
Variaciones en el volumen del medio.
Hemólisis.
Cristales en el medio.
Presencia de burbujas.
Presencia de coágulos.
Cambio de color normal.
Contaminación.
Falla en la inhibición de microorganismos
saprofitos.

19. PROBLEMAS CON LOS MEDIOS
1. Turbidez o precipitación
• Mala calidad del agua.
• Sobrecalentamiento.
• Disolución incompleta.
2. Oscurecimiento
• Alteración del pH.
• Sobrecalentamiento.
• Solución incompleta.
3. Crecimiento bacteriano pobre
• Substancias inhibidoras en el agua o en el recipiente.
• Alteración en el pH.

20. PROBLEMAS CON LOS MEDIOS
Problemas con los medios
4. Valor de pH incorrecto
• Medir el pH por encima de los 25°C.
• Sobrecalentamiento en la esterilización, vuelta a
fundir o calentamiento prolongado a 50°C.
• Disolución incompleta del medio.
• Mala calidad del agua.
• Recipiente mal lavado o con residuos químicos.
• Mala conservación del medio deshidratado o
vencido.

24. CEPAS PATRON
Problemas con los medios
Selección:
• Poseer las características de la especie que representa.
• Tener estabilidad genética.
Origen:
• Comercial y propio laboratorio
• ATCC :Colección Americana de Colonias Tipo.
• DMS : Colección Alemana de Hongos y Bacterias Pg
• NCIC : Colección Inglesa de Bacterias para la Indus.
• JFCC : Colección Japonesa de Microorganismos.
• CCTM : Colección Francesa de Microorganismos.

25. CEPAS PATRON
Problemas con los medios
Conservación :
• Liofilizado.
• Congelado.
• Medios de cultivo.
Importancia:
• Validan los procesos de las pruebas.
• Permiten la realización de los análisis

26. REACTIVOS Y COLORANTES
•
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.
La
concentración
de
las
soluciones de tinción, por
efecto de la evaporación de los
solventes o las variaciones
introducidas en los métodos
recomendados, pueden afectar
los resultados de las tinciones
para
diferenciar
Microorganismos
por
su
reacción a la tinción de Gram y
la morfología, tintes para
cápsulas, esporas, etc.

27. REACTIVOS Y COLORANTES
REACTIVOS Y COLORANTES
• Para facilitar el control de los tintes, se
recomienda
preparar
placas
con
microorganismos aislados en el trabajo
rutinario o cepas de la ATCC frescas,
tomado en cuenta aquellos que pudieran
ser más útiles según la tinción a evaluar.
• Para el control diario de la tinción de
Gram, se recomienda el uso de una cepa
ATCC de Staphylococcus aureus y de
Escherichia coli.
• Es necesario llevar un registro de estos
controles.

29. EQUIPOS
•
•
EQUIPOS
Mantenimiento preventivo
Mantenimiento correctivo
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

30. EQUIPOS
CONTROL DE TEMPERATURA
EQUIPO:
CÓDIGO:
MES:
AÑO:

31. Debe redactarse un manual de procedimientos
operacionales que incluya:
•
•
•
•
Listado de los equipos con nombre, marca, modelo,
número de serie, fecha de recibo y número de
inventario de la institución.
Registro del mantenimiento preventivo y correctivo,
periodicidad de la inspección y fallas del instrumento.
Debe incluirse un apartado de corrección de fallas y
acciones correctivas efectuadas.
Instrucciones de uso del instrumento, redactadas en
forma clara y en el idioma de los usuarios. Incluir
precauciones de seguridad, procedimientos de
limpieza, cuidado del instrumento y acciones
correctivas.

32. EQUIPOS
EQUIPOS
Mblgo. Kellyn Gomez Castro.

33. PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD
•
•
•
•
•
•
•
•
Preparación del agar Mueller Hinton
Preparación de la suspensión
Inoculación de la placa
Colocación de los discos
Incubación
Lectura
Interpretación de los halos obtenidos
Reporte
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34. PRUEBAS DE SUSCEPTIBILIDAD
• Agar base deshidratado
• Post autoclavado enfríe a 45-50°C.
• Vierta a placa en superficie horizontal 4 mm de
profundidad.
• Volumen:
• 60-70 ml para placas de 150 mm
• 25-30 ml para placas de 100 mm.
• Enfríe a T°ambiente
• Almacene en refrigeración (4-8 ºC).
• Duración: 7 a 14 días (sellados).
• Control de esterilidad y calidad (1 a 2 placas por lote).
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35. Efectos del pH:
• Rango de pH: 7,2 a 7,4
pH ácido:
• Pierden potencia los aminoglucósidos y
macrólidos.
• Aumenta la actividad de penicilinas.
pH alcalino
• Efectos son opuestos.
• Controle el pH post gelificación

36. Efectos de la timidina o timina
Exceso de timidina
• Falsa resistencia a sulfonamidas y trimetoprim.
• Evalúe cada lote nuevo de agar Mueller Hinton
Enterococcus faecalis ATCC 29212, o ATCC 33186 y
cotrimoxazol (SXT).
• Halo de inhibición para SXT
> 20 mm: satisfactorio.
< 20 mm o crecimiento intra-halo es insatisfactorio.

37. Variación de cationes divalentes
Variación de Ca++ y Mg++
• Aminoglucósidos y tetraciclinas en
Pseudomonas aeruginosa.
• Contenido excesivo falsa resistencia.
• Contenido bajo falsa sensibilidad
Ión Zn++
• carbapenems.

38. Profundidad del agar
• 4 mm
• Variabilidad de 3 a 5 mm.
• Profundidad < 3 mm
lecturas Falsamente susceptibles.
• Profundidad > 5 mm
lecturas falsamente resistentes.

40. SUPERVISION DEL PERSONAL
DE LABORATORIO.
 Evaluación.
 Certificación.
 Controles.
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41. SUPERVISIÓN DEL PERSONAL
“El personal es el factor más importante en la calidad
del trabajo en el laboratorio de microbiología”.
PERSONAL:
 Dedicación y actitud positiva hacia el trabajo.
 Capacidad académica.
 Actualización constante.
 Elementos indispensables para su labor.

42. SUPERVISIÓN DEL PERSONAL
“Debe existir una ficha técnica de cada trabajador donde se
registren los posibles accidentes.”
REGISTROS:
 Infecciones suscitadas al manipular secreciones u organismos Infecciosos.
 Realizar estudios radiológicos y colocación de PPD.
 Otros.

43. EVALUACIÓN DEL PERSONAL
 CERTIFICACIÓN DE COMPETENCIA DEL PROFESIONAL:
Hoja de vida.
 EVALUACIÓN PERMANENTE DEL PERSONAL :





Reporte de trabajo.
Programas de educación continuada.
Trabajos de investigación.
Conferencias.
Oros.
Todo nuevo empleado que se adicione a la plantilla de la sección, debe ser
documentado, evaluado y certificado, incluyendo las fases pre-analíticas,
analíticas y post-analíticas de funcionamiento del laboratorio.

44. CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
EVALUACIÓN EXTERNA
laboratorio
• Resultado seguro
• Resultados confiables
Los laboratorios de microbiología y la evaluación externa, permiten
llegar a resultados seguros y confiables.

45. ISO 15189

46. Mblgo. Kellyn Gomez Castro.