Microbiología: Técnicas de diagnóstico rápido (detección de antígeno)

1. TÉCNICAS RÁPIDAS DE DETECCIÓN DE ANTÍGENO

2. INFECCIÓN Diagnóstico etiológico (microbiológico) A) Detección del microorganismo B) Detección de la respuesta inmune del hospedador Visión directa Cultivo Detección de Ag Detección de genoma Serología Estudio de respuesta celular

3. Dx TARDÍO (salvo IgM). Seropositividad no implica infección actual. Útil en gérmenes no cultivables/difíciles de obtener. Valoración de estado inmune. Serología Complejidad técnica, personal adiestrado, infraestructura. Mínimo 2 horas. Género y especie. Posible cuantificación. No necesita viabilidad del germen. Detección de ADN/ARN No antibiograma. FP y FN. Análisis múltiple subóptimo. Rápido. Algunos muy sencillos. Identifica género +/- especie. No necesita viabilidad del germen. Detección de antígeno No siempre factible. LENTO Identificación de género y especie. Antibiograma . Cultivo Gérmenes que no se tiñen. Sólo formas y propiedades tintoriales (inespecífico). No antibiograma. Rápido. Sencillo. No necesita viabilidad del germen. Valoración de la muestra. Visión directa (tinciones habituales) Inconvenientes Ventajas Técnica

5. Técnicas de detección de antígeno Inmunofluorescencia Enzimoinmunoensayo (EIA) Inmunocromatografía (ICG) Aglutinación facilitada 3-4 h < 30 min < 30 min <1 a 3 h (según formato y automatización)

6. Fundamento: Antígeno : Molécula reconocida como no propia por el organismo, la cual es capaz de desencadenar una respuesta inmunitaria . Epitopo=determinante antigénico Sitio de unión al antígeno (región hipervariable) Anticuerpo : Proteína (inmunoglobulina) producida en respuesta a la estimulación por un antígeno, con el cual reacciona de forma específica Unión antígeno (Ag)-anticuerpo (Ab)

10. Inmunofluorescencia Más rápida Más artefactada Consume más tiempo Más nítida Permite el estudio simultáneo de varios Ag Requiere entrenamiento previo del técnico y el observador. Evaluación de la muestra Ig Anti Ag Ag IFDirecta Ag Ig Anti Ag Ig Anti Fc IFIndirecta

15. ¿Qué microorganismos podemos detectar? (y 3) Tests comercializados Hongos Criptococo: Cápsula/ glucuronoxil manano Aspergillus : galactomanano Candida : mananos Pneumocystis jiroveci Giardia Cryptosporidium parvum Entamoeba histolytica Plasmodium falciparum : HRP-2 Plasmodium spp: LDH y aldolasa Leishmania Wuchereria bancrofti Protozoos

19. ¿Por qué es mejor no usar orina? H. influenzae, S. pneumoniae: Colonización orofaringe. S. agalactiae, E. coli: Colonización periné neonatos “ un resultado  de detección de antígeno en orina puede deberse a colonizaciones bacterianas o a infecciones invasoras diferentes a la meningitis”