1. Bioseguridad en
Microbiología y
Laboratorios Biomédicos
4rd Edición
Luz Esmeralda Murcia Urrego
FUNDACION INSTITUTO DE INMUNOLOGIA

2. INTRODUCCION
Desarrollo de prácticas de BS
 1941 - Meyer and Eddie

74 intectados con brucellosis in US
 Enfermedades más comunmente
reportadas

Hepatitis

Tuberculosis
 Tifoidea
 Encefalitis equina venezolana
 Brucelosis turalemia
 Infecciones estreptocóccicas 2

3. INTRODUCCION
Desarrollo de prácticas de BS
 Causas de infecciones asociadas
en laboratoristas
 Exposición a aerosoles.
 Manipulación de agujas

Pipeteo con la boca.
 Manipulación de cultivos o especímenes.
3

4. INTRODUCCION
Cadena de Infección
t o
im ien
n
a nte
E /M
PO l
Reservorio del patógeno sona
or per
t
tec
Puerta de escape o pro
uip
Eq
Transmisión
Ruta de entrada / dosis infecciosa ció
n
za
uni
RI Inm
ES Huésped susceptible
GO cia
ilan
Vig
Período de incubación
4

5. PRINCIPIOS
Requerimientos generales del laboratorio
POE
INSTALACIONES
5

6. PRINCIPIOS
Requerimientos generales del laboratorio

Supervisor bien informado
 Personal bien informado
• Enterado de riesgos potenciales
• Ilusrado en prácticas / técnicas
 Manual de bioseguridad específico para el
laboratorio
6

7. PRINCIPIOS
Requerimientos generales del laboratorio
 Niveles de Bioseguridad
 Prácticas y técnicas de Laboratorio
 Procedimientos Operativos Estándar POE

Procedimientos Operativos Especiales
 Barreras primarias (Equipo de seguridad)
 Barreras secundarias (Diseño y
construcción
7

8. Requerimientos Generales del
Laboratorio
 Cabinas de bioseguridad BSL2/3
 Dotación

Batas
 Guantes
 Protección ocular, facial, respiratoria etc.
 Ayudas para pipeteo
 Centrífugas (rotores, anti-aerosoles etc)
8

9. PRINCIPIOS
Definición
 BIOSEGURIDAD:
Aplicación de las combinaciones de
prácticas y procedimientos, facilidades del
laboratorio, y equipos de seguridad
cuando se trabaja con microorganismos
potencialmente infecciosos y tiene por
objeto proteger la salud de los
profesionales
9

10. PRINCIPIOS
Niveles de bioseguridad
 BSL1 Agentes que no se les conoce
que causen enfermedad
 BSL2 Agentes asociados con
enfermedades en humanos
 BSL3 Agentes indígenas / exóticos
asociados con enfermedad humana y
con potencial transmisión por aerosol.
 BSL4 Agentes exóticos / peligrosos y
naturaleza amenazadora de vida
10

11. Bioseguridad Nivel 1
Introducción
Trabajo con agentes bien conocidos,
caracterizados y que no ocasionan
enfermedad en humanos sanos adultos, y
representando un mínimo potencial de riesgo
al personal del laboratorio y al ambiente.
11

12. Bioseguridad Nivel 1
Introducción
Agentes bien caracterizados
 Naegleria gruberi
 Bacillus subtillis
 Canine Hepatitis virus

E.coli
12

13. Bioseguridad Nivel 1
Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)
Requerimientos:
 Diseño de puertas
 Lavamanos
 Superficies de trabajo fáciles de limpiar
 Impermeabilidad de sillas
 Aireación ninguna

Iluminación

Gabinetes
13

14. Bioseguridad Nivel 1
Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)
14

15. Bioseguridad Nivel 1
Prácticas microbiológicas estándar
 Restingir o limitar el
acceso cuando se está
trabajando
 Prohibido comer, beber,
y fumar
 Prohibido pipetear con
la boca
15

16. Bioseguridad Nivel 1
Prácticas microbiológicas estándar
16

17. Bioseguridad Nivel 1
Prácticas microbiológicas estándar

Lavado de manos
 Decontaminar área de trabajo diariamente

Minimizar salpicaduras y aerosoles
 Decontaminar los desechos

Programa de control de roedores e insectos
17

18. Bioseguridad Nivel 1
Equipos de seguridad (Barrera primaria)
Ropa protectora
• Bata
• Guantes

Equipo personal
• Protección facial
• Respiratoria
18

19. Bioseguridad Nivel 1
Requisitos de entrenamiento
 Supervision
 Científico con conocimiento general en
microbiología o ciencia afín
 Personal Laboratorista
 Conocimiento y habilidades específicas en las
técnicas y procedimientos de laboratorio
19

20. Bioseguridad Nivel 2
Introducción
Trabajo con agentes de moderado
riesgo potencial al personal y al medio
ambiente.
20

21. Bioseguridad Nivel 2
Introducción
Se dispone de Inmunización o
tratamiento antibiótico
Ejemplos:

Virus del Sarampión

Salmonella spp.
 Toxoplasma spp.
 Virus Hepatitis B
21

22. Bioseguridad Nivel 2
Introducción
Extrema precaución con agujas
contaminadas e implementos
cortopunzantes

Ejemplos:
 Patógenos sanguíneos
 Fluídos o secreciones
22

23. 23

24. Bioseguridad Nivel 2
Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)
24

25. Bioseguridad Nivel 2
Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)
 Requerimientos
 Puertas bloqueables
 Lavamanos
 Gabinetes amplios
 Superficies de trabajo fáciles de limpiar

Impermeabilidad de sillas
25

26. Bioseguridad Nivel 2
Facilidad del Laboratorio (Barreras
Secundarias)
 Requerimientos
 Lavador de ojos
 Adecuada iluminación
 Cabina de bioseguridad
 Aireación dentro del laboratorio sin
recirculación a ningún área del laboratorio
26

27. Bioseguridad Nivel 2
Equipos de seguridad (Barreras primarias)
Cabina de Bioseguridad
Clase II
 Circulación del aire

Disposición del equipo

Técnica
27

28. Bioseguridad Nivel 2
Equipos de seguridad (Barreras primarias)
BSL-1 Más:
Uso de cabinas de
bioseguridad (clase II) para
trabajo con agentes
infecciosos que involucran:
 Aerosoles y salpicaduras
 Grandes volumenes

Altas concentraciones
28

29. Bioseguridad Nivel 2
Facilidad de laboratorio (barreras
secundarias)
29

30. Bioseguridad Nivel 2
Facilidad del laboratorio (Barreras
secundarias)
Facilidades BSL-1 Más:

Autoclave
 Lava - ojos
30

31. Bioseguridad Nivel 2
Prácticas especiales
 Supervisión
 Científico competente con mayor responsabilidad
• Limita el acceso de inmunocomprometidos
• Restringe el acceso a inmunizados
 Personal Laboratorista

Conocimiento y habilidades específicas en las
técnicas y procedimientos de laboratorio
 Conocimiento de riesgo biológico
31

32. Bioseguridad Nivel 2
Prácticas especiales
 No
 Romper, doblar,
re-usar, re-
enfundar las
agujas

Recoger vidrio roto
directamente con
las manos
32

33. Bioseguridad Nivel 2
Prácticas especiales (cont.)
33

34. Bioseguridad Nivel 2
Prácticas especiales (cont.)

Políticas y
procedimientos para
entrada al laboratorio
 Señalización de
Bioseguridad
 Manual de bioseguridad
específico para el
laboratorio
 Entrenamiento anual
34

35. Bioseguridad Nivel 2
Prácticas especiales (cont.)
 Uso de instrumentos para el
transporte
35

36. Bioseguridad Nivel 2
Prácticas especiales (cont.)

Immunización
 Líneas base séricas
36

37. Bioseguridad Nivel 2
Prácticas microbiológicas estándar
Igual que BSL1
 Reportar salpicaduras y accidentes

No animales
37

38. Bioseguridad Nivel 3
Trabajo con agentes que
potencialmente pueden causar
enfermedad letal como resultado de la
exposición por la vía de inhalación.
38

39. Bioseguridad Nivel 3
 Examples:
• M. tuberculosis
• Virus de encefalitis de St. Louis
• Coxiella burnetii
39

40. Bioseguridad Nivel 3
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
40

41. Bioseguridad Nivel 3
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
 Facilidades BSL-1 y 2 Más:
 Edificio separado o zona aislada
 Entrada de doble puerta

Flujo de aire interno dirigido y de un solo paso
41

42. Bioseguridad Nivel 3
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
 Facilidades BSL-1 y 2 Más (cont.):
 Recintos para equipos generadores de
aerosoles
 Sellado (ventanas, otros accesos)
 Muros, pisos y techos son resistentes al
agua y fáciles de limpiar
42

43. Bioseguridad Nivel 3
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
•Facilidades BSL-1 y 2 Más (cont.):
Protección de las líneas de vacío
43

44. Facilidad de diseño
(Barreras terciarias)
Locación
del CDC
Atlanta
44

45. Facilidad de diseño
(Barreras terciarias)
Estructura
Ventilación
45

46. Bioseguridad Nivel 3
Prácticas Especiales
Prácticas Especiales BSL-2 Más:
 Trabajo en cabinas
certificadas

Uso de equipos
controladores de aerosoles
 Decontaminación de
derrames inmediata
46

47. Bioseguridad Nivel 3
Equipos de Seguridad (Barrieras Primarias)
Equipos de Seguridad BSL-1 y 2 Más:

Cabina de bioseguridad clase II o III
para manipulación
de material
infeccioso
47

48. Bioseguridad Nivel 3
Equipos de Seguridad (Barrieras Primarias)
Equipos de Seguridad BSL-1 y 2 Más:
Protección respiratoria
48

49. Bioseguridad Nivel 3
Prácticas Especiales
Supervisión

Científico competente con experiencia en el
trabajo con los agentes
• Establece los criterios para ingreso
• Restringe accesos
• Desarrolla políticas y procedimientos
• Entrena al personal del laboratorio
49

50. Bioseguridad Nivel 3
Prácticas Especiales
Personal del Laboratorio
 Sigue estrictamente las indicaciones
 Demuestra habilidades
 Recibe entrenamiento apropiado

Reporta accidentes

Participa en la vigilancia médica
50

51. Bioseguridad Nivel 4
 Trabajo con agentes exóticos y peligrosos
que individualmente poseen un alto riesgo
de ser transmitidos en laboratorios por
aerosoles y amenaza la vida
51

52. Bioseguridad Nivel 4
 Exposición potencial a patógenos que se
dispersan por aerosol o con desconocido riesgo
de transmisión
 Infección posiblemente letal
 Elemplos:
 Ebola zaire
 Virus Sin nombre
 Fiebre del valle rift
52

53. Bioseguridad Nivel 4
Facilidad del laboratorio (Barreras
secundarias)
53

54. Bioseguridad Nivel 4
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
 Facilitdad BSL-1, 2 y 3 Más:
 Edificio separado o zona aislada
 Entrada de doble puerta

Flujo de aire interno dirigido y de un solo paso
 Fuente y extractor de vacío exclusivo
54

55. Bioseguridad Nivel 4
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
 Facilidad BSL-1, 2 y 3 Más (cont.):
 Recintos para equipos generadores de
aerosoles
 Sellado (ventanas, otros accesos)
 Autoclave de doble puerta

Muros, pisos y techos son
completamente sellados
55

56. Bioseguridad Nivel 4
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
 Facilidades BSL-3 Más (cont.):
 Puertas internas y externas interbloqueadas
para prevenir aperturas simultámeas

Líquidos afluentes son decontaminados por
un método aprobado antes de su disposición
final
 Debe haber un sistema de comunicación
entre el interior y el exterior del laboratorio
56

57. Bioseguridad Nivel 4
Facilidad del laborarotio (Barreras
Secundarias)
(cont):
 Aire de emergencia
 Salida de emergencia
 Planta eléctrica de
emergencia
57

58. Bioseguridad Nivel 4
Equipos de seguridad (Barreras
primarias)
 (cont.):
 Cabina biológica
clase II B2 o III
58

59. Bioseguridad Nivel 4
Equipos de seguridad (Barreras
primarias)
 (cont.):
 Traje personal de
presión positiva
59

60. Bioseguridad Nivel 4
Prácticas especiales
 (cont.):
 Se decontamina todo
desecho sólido o
líquido
 Acceso exclusivo y
controlado

Cuarto de cambio de
ropa

Cuarto de fumigación

Duchas
60

61. Bioseguridad Nivel 4
Prácticas Especiales
Supervisión

Científico competente con experiencia en el
trabajo con los agentes
• Establece los criterios para ingreso
• Restringe accesos
• Desarrolla políticas y procedimientos
• Entrena al personal del laboratorio
61

62. Bioseguridad Nivel 4
Prácticas Especiales
Personal del Laboratorio
 Sigue estrictamente las indicaciones
 Demuestra habilidades
 Recibe entrenamiento apropiado

Reporta accidentes

Participa en la vigilancia médica
 Recibe vacunas disponibles
62