1. ELS CUCS INFINITS. Regeneració en planàries
Andrea Portero i Martínez
Berta Torrents i Pérez
Departament de Biologia
INS La Llauna
13/01/2014
2. ÍNDEX
1. Resum i abstract
2. Introducció
2.1. Presentació o justificació del tema
2.2. Objectius del treball
2.3. Marc Teòric
3. Material i Mètode
4. Resultats
5. Discussió dels resultats
6. Conclusió
7. Agraïments i valoració personal
8. Annexos
4. 2.1. Justificació del tema
Laboratori
BIOMEDICINA
Medicina
Regenerativa
Ciència
Guarir malalties
Investigació
Cèl·lules mare
5. 2.2. Objectius
• Estudiar la importància de les cèl·lules mare en la regeneració en planàries;
saber on es troben aquestes cèl·lules, si són o no necessàries per a la
supervivència de l'organisme i com influeix el seu nombre en la capacitat de
regeneració.
• Conèixer com funciona la regeneració.
HIPÒTESIS
-Si les planàries depenen de les cèl·lules mare per sobreviure, llavors, en
matar per irradiació totes les seves cèl·lules mare, no seran capaces de
sobreviure i moriran.
- Si les planàries depenen únicament de les cèl·lules mare per poder
regenerar-se, llavors, en matar per irradiació totes les seves cèl·lules mare, no
seran capaces de regenerar-se després de patir una lesió.
7. 3. Material i Mètode
PART 1
Distribució de cèl·lules mare.
• Senyalització amb anticossos .
• Observació al microscopi de
fluorescència.
PART 2
Afectació de la quantitat de cèl·lules
mare a la capacitat regenerativa.
• Irradiació de les cèl·lules mare:
Estudi de la supervivència sense
elles.
Lesió de les planàries i estudi de
la seva recuperació.
8. 3. Material i Mètode
PART 1
WASHES*
MeOH H2O2
Carnoy MeOH
HCl Carnoy
H2O2
2%
HCl
Tubs Falcon
5 min.
2h
1h
16-20 h
WASHES* (10’ each):
50% MeOH in PBTx
75% MeOH in PBTx
(PBS+0.3% triton X-100)
25% MeOH in PBTx
x2 PBTx
50 min.
10. PART 1
Ab 1ary: antihistona H3 fosforilada
Incubate with 1ary Ab
Wash at RT in PBTx
in 1%BSA in PBTx
Do the last wash in
1%BSA in PBTx
Block 1% BSA in PBTx
2h
16-20 h
Ab 2ary: GαM 488 (Goat-anti-mouse 488)
Incubate with 2ary Ab
in 1%BSA in PBTx
14-16 h
Enllaç* (Feu clic a la imatge)
Wash in PBTx
6-8 h
12. 3. Material i Mètode
PART 2
Irrad.
50pl
60’ a 100Gy
Fiss.
Ctl.
Amputació
Ctl.
Senyal.
Fiss.
Senyal.
Amputació
13. No irrad. i tallades
Irrad. i tallades
Fissionades
Ctl.
No irrad. i no tallades
Irrad. i no tallades
Tallades 27/11/13
14. 4. Resultats
PART 1
Cap ctl.:
Cap irrad.:
Prefaringe ctl.:
Prefaringe irrad.:
Cua ctl.:
Cua irrad.:
15. 4. Resultats
PART 2
PLANÀRIES IRRAD. I TALLADES
Cos que ha regenerat el cap
Cap que ha regenerat el cos
PLANÀRIES NO IRRAD. I TALLADES
16. 5. Discussió dels resultats
PART 1
Prefaringe ctl.
Prefaringe irrad.
Vídeo* (feu clic sobre la imatge)
Vídeo* (feu clic sobre la imatge)
Ctl.
Irrad.
17. 5. Discussió dels resultats
PART 2
Irradiades i tallades
Fissionades i
irradiades
Irradiades i no tallades
20. 6. Conclusió
Les cèl·lules mare tenen una participació important en el procés de la
regeneració de manera que, quan es redueix el seu nombre, la velocitat de
regeneració disminueix.
21. 7. Agraïments i valoració personal
• CESIRE–CDEC. Sílvia Lope.
• Facultat Biologia, UB. Dr. Francesc Cebrià.
• PRBB–CMRB. Dra. Mercè Martí. Zoila Babot Riera.
• PCB.
• INS La Llauna. Margarida Asensio. Roser Bosch. Xavier Ferrer-Francesch
22. 8. Annexos
ANNEX I. Senyalització del sistema nerviós amb anticossos.
1ary Ab: Anticòs primari 3C11 (contra la sinapsina)
2ary Ab: Anticòs secundari Goat-anti-rabbit 568
Vídeos* (feu clic sobre les imatges)
Cervell ctl. 1
Cervell ctl. 2
Cervell irrad. 1
Cervell irrad. 2
